Лабораторная работа №5
Тема: Одно- и двумембранные органеллы
Цель: изучить структуру органелл одномембранного и двумембранного строения.
Задачи:
детально разобрать строение митохондрий, ЭПС, лизосом и пероксисом на микропрепаратах и электронных микрофотографиях;
изучить процесс экзоцитоза на схеме и микрофотографиях.
Оснащение:
Микроскопы.
Микропрепараты.
Атласы.
Электронные микрофотографии.
Задание: рассмотреть и зарисовать препараты и микрофотографии по теме занятия.
Препарат 1. Митохондрии в клетках кишечной аскариды
При данном способе окраски (по методу Альтмана) митохондрии выявляются как зернышки или нитчатые структуры в цитоплазме клеток.
Зарисовать препарат на большом увеличении, отметить ядра клеток (1) и митохондрии (2).
На электронной микрофотографии митохондрии рассмотреть наружную и внутреннюю мембраны митохондрий, ее матрикс. Отметить увеличение поверхности внутренней мембраны, обращенной в матрикс, за счет образования крист. Увеличение поверхности мембран необходимо для размещения необходимого количества компонентов цепи переноса электронов и ферментов окислительного фосфорилирования, т.к. митохондрии обеспечивают энергией не только свою жизнедеятеятельность, но и энергоресурсы всей клетки.
Митохондрии в разных тканях имеют различную форму и внутреннюю структуру. Рассмотрите на электронных микрофотографиях митохондрии в мышечной ткани, в клетках печени и в клетках коры надпочечников. При анализе микрофотографий необходимо отметить количество крист и их форму.
На электронной микрофотографии гранулярной эндоплазматической сети рассмотреть совокупность мембранных структур – цистерн (плоских мешков), вакуолей и трубочек. Отметить, что со стороны гиалоплазмы мембраны покрыты рибосомами – немембранными органеллами биосинтеза белка на экспорт и для собственных мембран клетки. Обратить внимание, что в толще гранулярной ЭПС находятся митохондрии округлой формы.
На электронной микрофотографии лизосом рассмотреть их ультрамикроскопические строение. Отметить, что первичные лизосомы имеют гомогенное содержимое, представленное растворами ферментов, а вторичные лизосомы содержат плотные включения содержимого фагосом. Постарайтесь найти на этой микрофотографии митохондрии и гранулярную ЭПС.
Пероксисомы часто характеризуются негомогенной структурой. Рассмотрите ультраструктуру пероксисомы на электронной микрофотографии. Необходимо найти светлую часть пероксисомы, в которой содержатся оксидазы аминокислот, каталаза и ряд других ферментов, и темную часть, представленную кристаллоподобной структурой. Данная структура называется нуклеоидом, в пероксисомах обнаруживается не всегда.
Задание: 1) найти на электронной микрофотографии, иллюстрирующей процесс экзоцитоза, диктиосомы, гранулярную ЭПС, ядро клетки и транспортные пузырьки между ЭПС и диктиосомой.
2) Рассмотреть и зарисовать схему экзоцитоза и отметить органеллы, принимающие в этом участие (рис. 6).
Рис. 6. Схема экзоцитоза
Задание к следующему занятию: подготовиться к опросу по теме «Ядро. Типы деления клеток (митоз, мейоз, амитоз). Клеточный цикл. Гаметогенез. Овогенез. Сперматогенез».