2. Конструктивный подход к изучаемым структурам.

При изучении гистологического препарата необходимо учитывать следующие особенности: в поле зрения микроскопа "элементы тканевых структур представляются, за небольшим исключением, в разрезе. Воссоздание цельности структур совершается после их рассмотрения путем воображаемой реконструкции. В отдельных случаях структура в целом может быть воспроизведена посредством графической или пластической реконструкции по многим строго последовательным срезам. Желающий научится микроскопировать, должен стремиться выработать у себя трехмерное представление о микроскопических структурах. При анализе полых органов необходимо учитывать характер среза (поперечный, продольный, тангенциальный).

3. Цель зарисовки.

Изучение препаратов должно сопровождаться их зарисовкой. Зарисовка микроскопических срезов представляет важный методический прием при исследовании клеток, тканей и органов. Зарисовка - не самоцель. Она помогает сосредоточить внимание на изучаемых объектах, выделить их со всеми деталями из окружающего. Зарисовка включает в себя элемент самоконтроля.

Обязательным условием успешного выполнения практических занятий является систематическая подготовка к ним по материалам лекций, учебнику, рекомендуемой дополнительной научной литературе.

4. Цель и принципы окрашивания гистологического препарата.

Клетки и ткани животного происхождения обладают избирательной способностью к красителям. Поэтому окрашивание срезов необходимо производить для того, чтобы в преломляющем свете микроскопа можно было отчетливо рассмотреть различные тонкие структуры объекта. В неокрашенных срезах можно рассмотреть только такие части, которые отличаются друг от друга различными преломлением световых лучей. Выявление невидимых на срезе деталей строения основано на неодинаковом (избирательном) их отношении к различным красителям.

5. Свойства красителей, принципы окрашивания.

Красители классифицируются по происхождению и химическому составам. По свойствам они делятся на группы кислых и основных красителей. Одни структуры среза вступают в реакцию с кислыми красителями т.е. обладают оксифильными (ацидофильными) свойствами. К группе кислых красителей относятся: кислый фуксин, пикрофуксин, пикриновая кислота, эозин. Чаще всего мы будем изучать срезы, обработанные эозином, который окрашивает цитоплазму, оболочку клеток, межклеточное вещество соединительной ткани в розовый цвет. По происхождению - эозин искусственный краситель.

К группе основных (базофильных) красителей, с которыми реагируют базофильные компоненты клеток и межклеточного вещества кислой природы (РНК, ДНК, гиалуроновая к-та и др.). относятся: кармин, сафранин, метиловый синий, азур, гематоксилин ( по способу приготовления краски различают гематоксилин Майера, Бемера. Вейгерта, железный гематокси­лин Гейденгайна и др.). Красящим свойством обладают не сам гематоксилин, а продукт его окисления. Гематоксилин окрашивает базофильные структуры в синий или фиолетовый цвет. Этот краситель растительного происхождения, который добывается из кампешевого дерева, растущего в Америке и у нас в Армении. Гематоксилин выявляет четко ядра клеток. Изучаемые нами препараты чаше всего будут окрашены гематоксилин-эозином. Кармин, также ядерный краситель, но животного происхождения, вырабатывается из насекомых кошенели, живущих на кактусовых деревьях. Большинство же красителей получены синтетическим путем (искусственные краски). Имеются красители со специальными свойствами, позволяющие выявить ее компоненты, окрашиваемые черным цветом (импрегнация солями серебра – для окраски нейронов, судан черный, осмиевая кислота выявляют липиды). Гликоген выявляется кармином Беста или шик реакцией по мак-Манусу. В данном случае, мы видим в срезах не сам гликоген, а продукт реакции его с красителем, просматривающийся в виде гранул лилово-красного цвета.