
- •Заняття № 4 Тема: Пікорнавіруси. Лабораторна діагностика ентеровірусних інфекцій: поліомієліту, Коксакі, есно. Ротавіруси. Риновіруси. Афтовіруси. Кардіовіруси.
- •Користуватися основними способами діагностики вірусних нфекцій;
- •Теоретичні питання:
- •Основна література:
- •Додаткова література:
- •Методика проведення практичного заняття
- •Технологічна карта практичного заняття
- •Практична робота студента
- •Методичні рекомендації по виконанню практичної роботи
- •Зарисуйте дослід в протокол та напишіть висновок. У висновку вкажіть який діагноз підтверджується і чому.
- •Приклади тестових завдання:
- •Пояснення до теми
- •Для самостійної роботи студента
- •Додаток б (довідковий) Характеристика родини Picornaviridae
- •Види та серотипи роду Enterovirus
- •Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика поліомієліту” Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика ентеровірусних інфекцій (Коксакі та есно)”
Пояснення до теми
„Пікорнавіруси. Лабораторна діагностика ентеровірусних інфекцій: поліомієліту, Коксакі, ЕСНО. Риновіруси. Афтовіруси. Кардіовіруси.”
Для самостійної роботи студента
Збудники ентеровірусних інфекцій |
Входять до родини Picornaviridae |
Загальна характеристика представників родини Picornaviridae |
Це РНК-геномні, мілкі, найбільше просто організовані віруси, що уражують людину та тварин |
Антигенна будова ентеровірусів |
Антигенність ентеровірусів пов’язана з білками капсиду і, перш за все, с білками VP1.Віруси містять комплементзв’язуючий (групоспецифічний) антиген, загальний для роду і типоспецифічний (індивідуальні) для кожного серотипу (серовара) антигени. |
Резистентність ентеровірусів |
Ентеровіруси мають значну стійкість до багатьох факторів зовнішнього середовища. Вони виживають при рН в межах 2,5-11,0. Стійкі у кислому середовищі. Тривалий час зберігаються у воді, грунті, випорожненнях. Вони резистентні до дії багатьох дез.засобів, жировозчинників, поверхнево-активних речовин. Декілька років зберігаються у замороженому стані. В той же час, ентеровіруси інактивуються УФВ, при нагріванні до 50 С гинуть через 50 хвилин, а при кип’ятінні маже миттєво. |
Поліомієліт |
Гостре інфекційне захворювання, що спричиняється поліовірусами та характеризується ураженням сірої речовини спинного мозку та стовбура головного мозку, в результаті чого розвиваються в‘ялі паралічі і парези м‘язів ніг, тулуба, рук. |
Таксономія збудника поліомієліту |
Родина Picornaviridae Рід Enterovirus Вид Poliovirus |
Основні структурні компоненти віруса поліомієліта |
|
Антигенні варіанти віруса поліомієліта |
|
Джерело зараження поліомієлітом |
|
Механізми передачі поліомієліта |
|
Шляхи передачі поліомієліту |
|
Які
|
Найбільш сприйнятливі діти у віці від 3 місяців до 5 років. |
Основні етапи патогенезу поліомієліту |
|
Локалізація персистенції віруса поліомієліта |
Епітелій тонкого кишечника Вірусоносіїв |
Імунітет після перенесеного поліомієліту |
Перенесене захворювання залишає стійкий, довічний типоспецифічний постінфекційний імунітет гуморального характеру. Захисну дію мають типоспецифічні вірус нейтралізуючі сироваткові антитіла і, особливо, секреторні IgA, що знаходяться в області вхідних воріт |
Принципи лабораторної діагностики поліомієліту |
|
Методи лабораторної діагностики поліомієліту |
|
Матеріал для вірусологічного дослідження поліомієліту |
Випорожнення, слиз носоглотки, мозкова тканина трупа |
Вірусологічний метод діагностики поліомієліту |
Полягає у виділенні та ідентифікації вірусу. З цією метою дослідним матеріалом, після обробки антибіотиками і центрифугування, інфікують первинні культури клітин з нирок мавп або нирок ембріона людини та перещеплю вальну клітинну культуру амніона людини. Наявність вірусу (індикацію) встановлюють за вираженою ЦПД, методу бляшок або кольоровій пробі. Ідентифікацію (типування) вірусу проводять в реакції нейтралізації з культуральною рідиною та діагностичними типоспецифічними сироватками 1,2 та 3 типів на культурі клітин |
Компоненти кольорової проби для виділення віруса поліомієліта |
Дослідний матерал + культура клітин в середовищі 199 |
Компонети кольорової проби для ідентифікації віруса поліомієліта |
Виділений вірус + специфічна сироватка + культура клітин в середовищі 199 |
Результат кольорової проби при виділенні віруса поліомієліту |
ЦПД, колір середовища змінюється |
Результат позитивної кольорової проби при ідентифікації вірусу поліомієліту |
Затримка цитопатичної дії, колір середовища змінюється |
Серологічний метод діагностики поліомієліту |
Досліджують парні сироватки, які беруть на початку захворювання і з інтервалом в 3-4 тижні, в РЗК, ІФА або ставлять РН на культурі клітин з поліомієліт ними діагностикумами 1,2 та 3 типів. Про наявність захворювання свідчить 4-кратне та більше збільшення титру антитіл в парній сироватці у порівнянні з першою |
Полімеразна ланцюгова реакція у діагностиці поліомієліта |
Це експрес-метод дозволяє ідентифікувати вірус (виявляючи специфічну РНК) та ідентифікувати дикі, патогенні штами вірусу від вакцинних штамів |
Засіб створення активного імунітета при поліомієліті |
Жива вакцина Вбита вакцина ВООЗ надає перевагу живій поліомієлітній вацині, бо вона створює внаслідок вакцинальних штамів (І – ІІІ типів) у кишечнику не тільки гуморальний, але й місцевий імунітет (sIgA) |
Переваги живої поліомієлітної вакцини |
1.Ефективна. 2.Створює довічний імунітет. 3.Індукує утворення секреторних IgA (подібно природній інфекції). Вакцинний вірус, циркулює серед населення, посилює клективний імунітет. 4.Зручна для використання, вводиться per os. 5.Не потребує частої ревакцинації |
Недоліки живої поліомієлітної вакцини |
1.Можливий ризик вакцино асоційованої інфекції у щеплених та оточуючих людей. 2.Небезпечна для введення людям з імунодефіцитом. |
Інактивована поліомієліт на вакцина |
Переваги: 1.Ефективна. 2.Безпечна для пацієнтів з імунодефіцитами. 3.Не викликає вакциноасоційованої інфекції. Недоліки: 1.Не індукує утворення секреторних IgA. 2.Для створення довічного імунітету необхідне багаторазова ревакцинація. 3.Не створює колективний імунітет |
Засіб створення пасивного імунітета при поліомієліті |
За допомогою людського гамма-глобуліна (донорського) |
Ускладнення, що формуються після перенесеного поліомієліту |
Стійкі в‘ялі паралічі, у вагітних – мимовільні аборти, мертвонародженість плода
|
Ентеровірусна (Коксакі та ЕСНО) інфекція |
Група захворювань, що викликаєтьсявірусами роду ентеровірусів та характеризується синдромом інтоксикації і поліморфізомом клінічних проявів. |
До якої родини відносяться віруси Коксакі та ЕСНО |
Picornaviridae |
Особливості антигенної бідови вірусів Коксакі |
|
Тропизм до тканин вірусів Коксакі та ЕСНО |
|
Джерело інфекції при ентеровірусній (Коксакі та ЕСНО) інфекції |
|
Механізми ентеровірусної (Коксакі та ЕСНО) інфекції |
1. Крапельний 2. Фекально-оральний |
Шляхи передачі при ентеровірусній (Коксакі та ЕСНО) інфекції |
|
Особливості патогенезу ентеровірусної (Коксакі та ЕСНО) інфекції |
Вхідні ворота інфекції: слизові оболонки носу, глотки, тонкої кишки. Після проникнення в організм відбувається його розмноження у лімфоїдній тканинині, епітеліальних клітинах, регіонарних лімфатичних вузлах. Потім вірус потрапляє у кров і викликає первинну вірусемію . Найбільший тропізм ентеровірусів відмічається до ЦНС та м‘язевої тканини. Але можуть уражуватися і інші органи: серце, печінка, підшлункова залоза, легені, нирки, кишечник. Для ентеровірусів характерна персистенція вірусу в організмі з тривалим зберіганням в кишечнику, м‘язах, паренхіматозних органах, шкірі, ЦНС, що зумовлює хронічний перебіг деяких форм.
|
Клінічні прояви інфекції Коксакі |
Поліморфізм клінічної картини: а) гострі респіраторні захворювання; б) поліомієлітоподібні захворювання; в) кишкові інфекції та ін. |
Клінічні прояви інфекції ЕСНО |
Поліморфізм клінічної картини: а) серозний менінгіт; б) поліомієлітоподібні захворювання; в) гострі респіраторні захворювання; г) кишкові інфекції та ін. |
Принципи лабораторної діагностики ентеровірусних інфекцій |
1. Виявлення збудника 2.Визначення специфічних змін в організмі |
Методи лабораторної діагностики ентеровірусних інфекцій |
|
Матерал для виявлення ентеровірусів |
|
Імунітет при інфекції Коксакі та ЕСНО |
|
Ротавірусні інфекції |
Гострі інфекційні захворювання, що характеризують ураженням шлунково-кишкового тракту за типом гастроентериту. |
Таксономія збудника ротавірусних інфекцій |
Родина Reoviridae Рід Rotavirus |
Морфологія ротавірусів |
|
Антигени ротавірусів |
Розрізняють групові, під групові та типові антигени. За груповим антигеном (білок VP-6) рота віруси поділяються на серогрупи (A, B, C, D, E, F {G}). Типоспецифічними антигенами є глікопротеїни зовнішнього капсиду VP-7 (G-тип) та VP-4 (Р-тип). Ротавіруси мають антигенну мінливість |
Джерела та шляхи розповсюдження ротавірусів |
|
Патогенез
|
|
Лабораторна діагностика рота вірусної інфекції |
В лабораторній діагностиці рота вірусного гастроентерита є два підходи: 1.Виявлення віруса, його антигенів або нуклеїнової кислоти у випорожненнях хворого на першому тижні захворювання. * У випорожненнях виявляють вірус в перші 2-3 доби захворювання, для цього готують суспензію випорожнень у розчині Хенкса та вивчають в електронній мікроскопії або проводять імуноелектронну мікроскопію. * Антигени рота вірусів у фекаліях виявляють за допомогою таких серологічних реакцій, як ІФА, РІФ, коаглютинації тощо. * Геном рота вірусів можна виявити за допомогою РНК-зондів та ПЛР Серологічний метод – виявлення специфічних антитіл та наростання титру антитіл в сироватках хворих та реконвалісцентів за допомогою ІФА, РНГА, РЗК, РН, РІФ. Для вивчення парних сироваток першу беруть у хворого на 3-4-й день захворювання, другу – згодом на 12-14 добу, 4-кратне збільшення титру антитіл і більше вказує на рота вірусну інфекцію |
Специфічна профілактика ротавірусної інфекції |
В стадії розробки |
Етіологія риновірусних інфекцій |
РНК-вмісні віруси родини Picornaviridae рід Rhinovirus |
Шляхи передачі риновірусної інфекції |
Контактно-побутовий Аерозольний |
Методи мікробіологічної діагностики риновірусної інфекції |
1. Ескпрес: РІФ 2. Вірусологічний: віруси виділяють в культурі клітин 3. Серологічний: виявлення наростання титру антитіл в РН |
Етіологія ящура (афтовірусної інфекції) |
РНК-вмісні віруси родини Picornaviridae рід Aphtovirus |
Ящур |
Зоонозна інфекція, передається від тварин, особливо від великої рогатої худоби. Людина інфікується при догляді за тваринами, а також при вживання сирого молока та молочних продуктів. |
Методи мікробіологічної діагностики ящура |
|