
- •Заняття №2
- •Лабораторна діагностика короновірусної та аденовірусної інфекції.
- •Користуватися основними способами діагностики вірусних нфекцій;
- •Теоретичні питання:
- •7. Рід морбілівірусів (Morbillivirus). Вірус кору, біологічні властивості Патогенез захворювання. Імунітет і специфічна профілактика.
- •8. Рід пневмовірусів (Pneumovirus). Респіраторно-синцитіальний вірус людини. Біологічні властивості. Патогенез захворювання. Імунітет.
- •Основна література:
- •Додаткова література:
- •Методика проведення практичного заняття
- •Технологічна карта практичного заняття
- •Практична робота студента
- •Приклади тестових завдань:
Приклади тестових завдань:
1. З метою визначення типу виділеного малоактивного вірусу парагрипу використовують
* А. РГ гемадсорбції
В. РГ гемаглютинації
С. РПГА
Д. РЗК
Е. РН
2. При спалаху гострої респіраторної інфекції, з метою встановлення діагнозу грип, проводиться експрес-діагностика, яка грунтується на виявленні специфічного вірусного антигену в досліджуваному матеріалі (змив з носоглотки). Яку серологічну реакцію використовують для цього?
А. Реакція зв’язування комплементу
В. Реакція аглютинації
*С. Реакція імунофлюоресценції
Д. Реакція преципітації
Е. Реакція опсонізації
3. Серологічна діагностика грипу передбачає виявлення наростання титру антитіл до збудника в сироватці крові хворого. В скільки разів повинен зрости титр антитіл з парною сироваткою, щоб результат вважався достовірним?
А. В 2 рази
* В. В 4 рази і більше
С. В один раз
Д. В 3 рази
Е. В пів-титру
4. Вірус грипу містить внутрішні антигени - нуклеопротеїдні (NP), полімеразні (P1, P2, P3), матриксний білок (М) та зовнішні антигени - гемаглютинін (Н) і нейрамінізазу (N). Яким з них належить основна роль у створені імунітету до грипозної інфекції?
А. Нуклеопротеїдним антигенам
В. Матриксним білкам
С. Полімеразним білка
Д. Тільки нейрамінідаза
*Е. Гемаглютиніну та нейрамінідазі
5. Після перенесення кору розвивається:
*А. Стійкий і тривалий імунітет
В. Часті рецидиви
С. Імунологічна толерантність
Д. Неспецифічний імунітет
Е. Ареактивність клітин
6. У вірусологічній лабораторії проводиться ідентифікація вірусу грипу. Для цього накопичену культуру вірусу змішали з еритроцитами барана і розлили у два ряди пробірок. До першого ряду додали діагностичну сироватку типа А (і там спостерігалося утворення осаду у вигляді "парасольки" до титру сироватки), до другого - типа В ( спостерігався осад у вигляді "гудзика"). Тип вірусу було визначено як В. Яка серологічна реакція була використана для ідентифікації вірусу?
А. РПГА
В. РСК
*С. РГГА
Д. РН
Е. РІФ
7. В дитячому садочку дитина захворіла на кір. Яким способом попередити можливість захворювання на кір у контактних осіб?
А. Введенням протикоревої вакцини
В. Призначенням імуностимуляторів
С. Призначенням антибіотиків
*Д. Введенням протикоревого імуноглобуліну
Е. Призначенням ацикловіру
8. У хлопчика 8 років підвищилась температура тіла до 38,80С, з`явилися нежить, кон`юнктивіт, кашель. На шкірі відзначалося великоплямисте висипання, при огляді порожнини рота білуваті висівкоподібні висипання на слизовій оболонці щік. Раптово з’явилося важке дихання і настала смерть при явищах асфіксії. Про яке с перерахованих нижче захворювань йде мова?
А. Скарлатина
В. Дифтерія
*С. Кір
Д. Менінгококовий назофарінгіт
Е. Грип
9. У пологовому будинку зареєстровано спалах респіраторної вірусної інфекції новонароджених. При вірусологічному дослідженні встановлено, що вірус не культивується на курячих ембріонах, а на перещеплюваних культурах клітин виявляє цитопатичну дію у вигляді симпластів та округлих клітин з відростками, з підвищеною променевою заломлюваністю. Який з названих збудників найбільш імовірно є причиною спалаху?
А. ортоміксовіруси
В. герпесвіруси
С. аденовіруси
Д. пікорнавіруси
*Е. РС-віруси
10. Труднощі специфічної профілактики грипу А пов'язані з:
*А. Мінливістю вірусного гемаглютиніну (H)
В. Мінливістю вірусного нуклеопротеїду (NР)
С. Мінливістю полімеразних білків (Р1,Р2,Р3)
Д. Резистентністю вірусу в навколишньому середовищі
Е. Чутливістю людей, особливо дітей, до цієї інфекції
Додаток А
(довідковий)
ПОЯСНЕННЯ ДО ТЕМИ
„Ортоміксовіруси. Параміксовіруси.
Лабораторна діагностика грипу, парагрипу, РС-інфекції, кору та паротитної інфекції.Лабораторна діагностика короновірусної та аденовірусної інфекції.”
ДЛЯ САМОСТІЙНОЇ РОБОТИ СТУДЕНТА
Таксономія збудника грипа |
Родина Ортоміксовіруси (Orthomyxoviridae) Рід Influenzavirus РНК-вмісний вірус |
Грип |
Гостре інфекційне вірусне захворювання людини, що характеризується ураженням респіраторного тракту, лихоманкою, загальною інтоксикацією, порушенням діяльності серцево-судинної та нервової систем |
Основні структурні компоненти віруса грипа |
|
Антигени вірусу грипу |
Віруси грипу мають поверхневі та внутрішні антигени. Внутрішні (S-антиген) – це антигени білків нуклеокапсиду та матріксного білка. Вони відрізняються стабільністю, вони є типоспецифічними та не дають перехресних реакцій. Поверхневі (V-антигени) – є проективними антигенами – це антигени поверхневих глікопротеїнів – гемаглютиніна (Н-антиген) та нейрамінідаза (N-антиген). Антигенна мінливість зумовлена двома процесами – антигенним дрейфом та антигенним шифтом |
Дрейф антигенів |
Незначні зміни в структурі Н- та N-антигенів за рахунок крапкових мутацій в генах, які кодують їх. В результаті утворюються змінені сероваріанти (штами) того ж підтипу |
Шифт антигенів |
Повна заміна ділянки геному, що кодують синтез Н- та (або) N-антигенів, що призводять до утворення нового підтипу вірусу грипа А |
Нові антигенні варіанти вірусу грипа (відмінні ознаки) |
Розрізняються по антигенній будові гемаглютиніна та нейрамідази |
Основні варанти вірусів грипа по антигенній будові |
4. Вірус грипа Д |
Приклади антигенних формул різних штамів віруса грипа |
H2N2 (A1 Сингапур) H3N2 (A1 Гонконг) |
Умови циркуляції віруса грипа серед людей |
Зниження або відсутність колективного імунітету у населення |
Умови з'явлення нових антигенних варіантів віруса грипа |
|
Середовище для культивування віруса грипа |
|
Стійкість віруса грипа в зовнішньому середовищі |
Стійкість вірусів грипу до факторів зовнішнього середовища невелика. Вони чутливі до ефіру, УФ-випромінення, стандартним дезінфектантам та детергентам, при 56 С гинуть через декілька хвилин. У повітрі приміщень віруси можуть зберігатися декілька годин, в клінічному матеріалі при 4 С – протягом тижня |
Джерело інфекції при грипі |
1. Хворі люди (тварини – як резервуар інфекції) 2. Вірусоносії |
Шляхи передачі грипа |
Повітряно-крапельний |
Основні етапи патогенеза грипа |
Зараження через носоглотку ↓ Проникнення вірусу в клітини циліндричного епітелію за допомогою нейромінідази ↓ Первинна репродукція віруса в епітелії дихальних шляхів ↓ Вірусемія ↓ Загальнотоксичний синдром ↓ Ураження лімфоцитів ↓ Вторинний імунодефіцит, ускладнення |
Принципи лабораторної діагностики грипа |
2. Виявлення специфічних змін у організмі |
Особливості постінфекційного імунітету |
Людина, що перенесла грип, набуває стійкий постінфекційний гуморальний та клітинний імунітет, який відрізняється своєю вузькою специфічністю та направлений проти сероваріанта (штама) віруса грипу, що викликав це захворювання. Значить, протигрипозний імунітет є підтипо- та штамоспецифічним. Тому поява нових штамів того ж підтипу вірусу А навіть з дуже незначним дрейфом поверхневих антигенів суттєво знижує ефективність імунітету, що вже є в начвності. Подальша антигенна мінливість того ж підтипу вірусу, а тим паче поява, в наслідок шифта антигенів, нового підтипу вірусу А, робить людину беззахисною проти грипозної інфекції |
Основні механізми імунітету при грипі |
Протиінфекційний імунітет тривалий і напружний, але дуже високоспецифічний (він типо-, підтипо- і навіть варіантоспецифічний) |
З чим пов’язана висока чутливість дітей до вірусу грипа |
Висока ранимість дітей обумовлена недосконалістю неспецифічних та специфічних механізмів імунітету, вразливістю інших систем та органів, що пов’язано з анатомо-фізіологічною незрілістю організму |
Методи лабораторної діагностики грипа |
|
Експрес-метод діагностики грипу |
Виявлення вірусу (антигену) в дослідному матеріалі) за допомогою РІФ (прямої та непрямої) та ІФА. Можна виявити в матеріалі геном вірусів за допомогою ПЛР. |
Інгридієнти, що необхідні для накопичення вірусу грипа у вірусологічному методі діагностики |
2. Курячий ембріон або культура клітин в середовищі 199 |
Індикація вірусів грипу у вірусологічному методі діагностики |
Проводиться в залежності від лабораторної моделі (за загибеллю, за клінічними та патоморфологічними змінами, за ЦПД, РГА, РГАд) |
Інгридієнти для ідентифікації віруса грипа в РГГА |
|
Інгридієнти для визначення антитіл проти вірусів грипу в РГГА (серодіагностика грипу) |
|
Чинник підтвердження діагноза грипа за допомогою серологічного метода |
Нарастання титру антитіл не менш ніж в 4 рази |
Засоби створення активного імунітету при грипі |
|
Засоби створення пасивного імунітету при грипі |
2. Гамма-глобулін протигрипозний |
Препарати для неспецифічної профілактики грипа |
Інтерфероногени
|
Таксономія збудників парагрипу |
Родина Параміксовіруси (Paramyxoviridae) Серотипи 1 та 3 відносяться до роду Respirovirus, а серотипи 2, 4а, 4b - Rubulavirus |
Парагрип |
ГРВІ, що характеризується переважним ураженням верхніх дихальних шляхів та помірною інтоксикацією |
Основні структурні компоненти віруса грипа |
1.Однониткова -РНК 2.Капсид 3.Зовнішня ліпідно-вуглеводно-протеїнова оболонка |
Антигенні властивості вірусів парагрипу людини (ВПГЛ) |
S-Ar внутрішній, V-Ar поверхневий |
За антигенами вірусних білків HN, NP, F розрізняють 4 основних серотипи вірусів парагрипу |
ВПГЛ -1 ВПГЛ - 2 ВПГЛ – 3 ВПГЛ – 4 |
Стійкість вірусів парагрипу в зовнішньому середовищі |
Швидко гинуть під впливом різних факторів: температури, кислот, лужини, УФВ та ін, чутливі до табельних дезінфікантів. |
Епідеміологія парагрипу |
Ждерело інфекції - хворі люди Шлях передачі повітряно-крапельний, рідко контактно-побутовий |
Основні етапи патогенеза парагрипу |
Проникнення вірусу через слизові оболонки носу, глотки, гортані ↓ Репродукція вірусу в клітинах поверхневого епітелію верхніх дихальних шляхів ↓ Вірусемія, в наслідок розпаду загиблих клітин і вірусів виникає токсемія ↓ Ураження гортані, трахеїв ↓ Вторинний імунодефіцит, що сприяє розвитку бактеріальних ускладень |
Методи лабораторної діагностики парагрипу |
1. Експрес-метод діагностики (РІФ, ПЛР) 2. Вірусологічний метод діагностики 3. Серологічний метод діагностики (РГГА, РЗК, РН ) |
Особливості посінфекційного імунітету |
Нетривалий та ненапружний, типоспецифічний, можлива реінфекція. |
Препарати, що використовуються для специфічної профілактики та лікування парагрипу |
Профілактичні – відсутні Лікувальні – імуномодулятори |
Таксономія вірусу епідемічного паротиту |
Родина Параміксовіруси (Paramyxoviridae) Рід Rubulavirus РНК-вмісний вірус |
Антигенні властивості вірусів епідемічного паротиту |
Серологічно однорідний |
Епідемічний паротит („свинка”) |
Гостра
дитяча інфекція, що характеризується
ураженням |
Епідеміологія епідемічного паротиту |
Джерело інфекції – хворі люди Шляхи передачі – повітряно-крапельний, рідко контактно-побутовий, через інфіковані слиною предмети |
Резистентність вірусу епідемічного паротиту |
Вірони мають незначну стійкість у зовнішньому середовищі. Вони чутливі до ефіру, детергентам, деззасобам (розчини спирту, лізола інактивують віруси за декілька хвилин), ферментам (трипсину, фосфоліпазам), висушуванню, УФ-променям, високим температурам (при 55-60 С віруси інактивуються протягом 20 хвилин) |
Основні етапи патогенезу епідемічного паротиту |
Проникнення вірусу через вхідні ворота інфекції – верхні дихальні шляхи ↓ Розмноження вірусів в клітинах поверхневого епітелію верхніх
дихальних шляхів, і можливо в
↓ Вірусемія, рознесення вірусу по організму ↓ Потраплення вірусу в яїчки, підшлункову та щитовидну залози, мозкові оболонки, що призводить до їх запалення ↓ ↓ Можуть бути ускладнення – орхіт Безсимптомний (і
як наслідок – менінгоенцефаліт, панкреатит. |
Методи лабораторної діагностики епідемічного паротиту |
1. Вірусологічний метод діагностики 2.
Серологічний метод |
Вірусологічний метод діагностики епідемічного паротиту |
Його проводять, інфікуючи курячі ембріони або культури клітин (клітини нирок мавп, ембріону людини, HeLa та інші). Індикацію вірусу проводять у курячому ембріоні за допомогою РГА, в культурах клітин за наявністю ЦПД або МІФ. Ідентифікацію виділеного вірусу проводять за допомогою РГГА, РІФ, РН, РЗК |
Серологічний метод діагностики епідемічного паротиту |
Проводиться з парними сироватками хворого, які беруться з інтервалом в 10 – 15 діб. Наростання титру антитіл в 4 і більше разів вказує на паротитну інфекцію. Використовується також ІФА для виявлення в сироватці хворого специфічних антитіл класу IgM, що вказує на активну інфекцію |
Препарати, що використовуються для лікування та профілактики епідемічного паротиту |
Для лікування та пізньої профілактики - специфічний імуноглобулін. Специфічна профілактика – жива вакцина. |
Таксономія респіраторно-синцитіального вірусу (РС-вірус) |
Родина Параміксовіруси (Paramyxoviridae) Рід Pneumovirus РНК-вмісний вірус |
РС-інфекція |
Гостре
захворювання нижніх дихальних шляхів
у новонароджених та дітей |
Основні властивості характерні для РС-віруса |
|
Антигенні властивості РС-вірусів |
S-Ar внутрішній, V-Ar поверхневий. Серологічно неоднорідний, має сероваріанти |
Епідеміологія РС-інфекції |
Джерело інфекції – хвора людина, вірусоносій Шляхи передачі – контактно-побутовий та повітряно-крапельний |
Особливості патогенезу РС-інфекції |
Вхідні ворота інфекції: верхні дихальні шляхи ↓ Проникнення вірусу в епітеліальні клітини ↓ Репродукція вірусу в клітинах циліндричного епітелію верхніх дихальних шляхів, що призводить до їх загибелі ↓ Генералізація процесу з розповсюдженням на нижні дихальні шляхи ↓ Розвиток вторинного імунодефіциту, що призводить до розвитку вторинних бактеріальних інфекцій ↓ Можлий розвиток імунопатологічних реакцій в результаті утворення імунних комплексів |
Методи лабораторної діагностики РС-інфекції
|
1. Експрес-метод діагностики (ІФА, РІФ, рідше РЗК, РН) 2. Мікроскопічне (гістологічне) обстеження 3. Вірусологічний метод діагностики 4. Серологічний метод діагностики (РН, РЗК, РНГА, ІФА)
|
Таксономія збудника кору |
Родина Параміксовіруси (Paramyxoviridae) Рід Morbillivirus РНК-вмісний вірус |
Антигенні властивості вірусу кору |
Серологічно однорідний |
Кір |
Гостре інфекційне захворювання, що характеризується лихоманкою, катаральним запаленням слизових оболонок верхніх дихальних шляхів та очей, також плямисто-папульозним висипанням на шкірі. |
Стійкість віруса кору в зовнішньому середовищі |
Швидко гинуть під впливом різних факторів: температури, кислот, лужини, УФВ та ін, чутливі до табельних дезінфікантів. |
Епідеміологія кору |
Джерело інфекції – хвора людина. Хворіють люди різного віку, але частіше діти 4 – 5 років. Шляхи
передачі: основний - повітряно-крапельний,
рідше - контактний. Найбільша
інфікованість у продромальний період
та в 1-шу добу появи висипу. Через 5
діб після появи висипу хворий не
|
Особливості патогенезу кору |
Слизова оболонка верхніх дихальних шляхів та очей ↓ Потраплення вірусу в підслизову оболонку та лімфатичні вузли ↓ Репродуція вірусу в клітинах цих тканин та органів ↓ Потраплення в кров (вірусемія) ↓ Ураження
ендотелію що зумовлює появу висипу ↓ Розвиток набряку та некротичні зміни тканин |
Імунітет після перенесеного кору |
Після перенесеного кору формується довічний гуморальний імунітет |
Методи лабораторної діагностики кору |
|
Експрес-діагностика кору |
Її використовують частіше інших більш складних методів для раннього виявлення антигену та внутрішньоклітинних вірусних включень і для виявлення специфічних антитіл. Антигени визначають, досліджуючи методом імунофлюоресценції уражені епітеліальні клітини, які отримують з відокремлення носоглотки та/або зіскобів елементів висипання. В У носоглотковому відокремленні або у мазках-відбитках, які пофарбовані за Романовським-Гімзе, можна виявити гігантські багатоядерні клітини – симпласти, що містять цитоплазматичні включення темно-рожевого кольору на фоні фіолетової цитоплазми. Антитіла виявляють у сироватці починаючи з 2-го тижня захворювання методом ІФА або РНГА |
Вірусологічний метод діагностики кору |
Заснований
на виділенні вірусу з крові та
носоглоткового змиву хворого на
культурі клітин (первинно-трипсонізовані
культури клітин нирок мавп, ембріону
людини та |
Серологічний метод діагностики кору |
Носить частіше ретроспективний характер. Досліджують парні сироватки у реакціях РЗК, РНГА, РГГА. Антитіла виявляють в сироватці починаючи з 2 –го тижня захворювання. Збільшення титру антитіл в 4 рази і більше підтверджує діагноз. Використання ІФА дозволяє виявити антитіла до вірусу кору класа IgM та IgG. Наявність IgM говорить про гостру корову інфекцію, а IgG свідчить про раніше перенесену інфекцію або вакцинацію |
Специфічна профілактика кору |
Планову
специфічну профілактику кору проводять
|
Таксономічне
положення збудників |
Родина Coronaviridae Рід Coronavirus РНК-вмісний вірус Широко розповсюджені в природі, викликають ураження респіраторних органів (в тому числі SARS), ШКТ, нервової системи людини, а також тварин. |
Антигенні властивості коронавірусів |
Серологічно неоднорідні – 3 серотипа |
Резистентність коронавірусів |
Віруси чутливі до кислот, УФ-променів; при нагріванні до 560С гинуть через 10-15 хвилин. При кімнатній температурі зберігаються декілька днів. Стійки до низьких температур, ліофілізації. |
Епідеміологія
|
Джерело інфекції – хвора людина. Шляхи передачі - повітряно-крапельний. |
Особливості
патогенезу |
Вхідні ворота інфекції: слизові оболонки верхніх дихальних шляхів ↓ Первинна репродукція вірусу ↓ Профузний насморк ↓ Формування противірусного гуморального імунітету ↓ ↓ Можливе виникнення Виникнення вторинного симптомів гострого імунодефіциту гастроентерита ↓ Вторинні бактеріальні інфекції
|
Методи
лабораторної діагностики |
|
Таксономічне положення збудника аденовірусної інфекції |
Родина Adenoviridae Рід Mastadenivirus ДНК-вмісні віруси |
Антигенні властивості аденовірусів |
Серологічно неоднорідні, поділяється на серогрупи та серотипи |
Резистентність аденовірусів |
Аденовіруси достатньо стійки у зовнішньому середовищі. У неочищених суспензіях при кімнатній температурі і рН у межах 6-9 віруси виживають протягом двох тижнів, у воді при 4 С – більше двох місяців. Віруси залишаються життєздатними на фомітах – пилових та інших часточках, що взвішені у повітряному середовищі. Інфективність вірусів не знижується при обробці ефіром та хлороформом. Аденовіруси швидко гинуть при нагріванні до 56 С (через 5 хвилин), під дією УФВ, при обробці дезінфектантами |
Епідеміологія респіраторної аденовірусної інфекції |
Джерело інфекції – хвора людина, вірусоносій. Шляхи передчі – повіртряно-крапельний, повітряно-пильовий, „кишкові” аденовіруси мають аліментаний шлях передачі. |
Особливості патогенезу аденовірусної інфекції |
Вхідні ворота інфекції: слизві оболонки верхніх дихальних шляхів, очей ↓ Репродуція вірусу в епітеліоцитах верхніх дихальних шляхів та регіонарних лімфовузлах ↓ Коротка вірусемія та генералізація процесу ↓ Органні ураження (слизових оболонок глотки, кон‘юктив, носу, ураження легенів, мезентеріальних лімфатичних вузлів, печінки, селезінки тощо) За типом ураження чутливих клітин розрізняють 3 типи інфекцій: 1. Продуктивна інфекція. 2. Персистуюча інфекція. 3. Трансформуюча інфекція. |
Методи лабораторної діагностики аденовірусної інфекції |
1. Експрес-методи діагностики ( РІФ, ІФА, РІА, ІЕМ). 2. Вірусологічний метод. 3. Серологічний метод діагностики (РЗК, РН, РГГА, ІФА). |
Додаток Б
(довідковий)
Граф логічної структури на тему: «Структура назви вірусу грипу»
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика грипа”
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика парагрипу”
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика епідемічного паротиту”
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика кору”
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика РС-інфекції”
Граф логічної структури на тему: „Лабораторна діагностика аденовірусної інфекції”