Лабораторная работа. Нарушение устойчивости растворов биополимеров.

Цель работы: изучить процессы высаливания, коацервации и денатурации растворов биополимеров.

Сущность работы: провести опыты, подтверждающие влияние различных факторов на устойчивость растворов биополимеров.

Опыт 1. Высаливание белков различными электролитами.

Реактивы: раствор яичного белка 2%-ный, раствор сульфата меди(II) 4%-ный, раствор хлорида натрия 10%-ный, раствор тиоцианата калия 10%-ный.

Ход работы : В три пробирки наливают по 1-2 мл раствора яичного белка и добавляют равные объемы растворов солей (сульфата меди, хлорида натрия, тиоцианата калия) по 2 мл, далее приливают 3 мл дистиллированной воды в каждую пробирку, тщательно перемешивают.

Описать наблюдения:_________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Опыт 2. Обратимое высаливание белков.

Реактивы: раствор яичного белка 2%-ный, насыщенный раствор сульфата аммония, 4%-ный раствор сульфата меди(II), 10%-ный раствор щелочи.

Ход работы: в две пробирки наливают по 3 мл раствора яичного белка, добавляют равный объем раствора сульфата аммония в каждую и взбалтывают. В осадок выпадают глобулины. Через 5-7 минут содержимое 1-й пробирки отфильтровывают, на филтре осаждаются глобулины, в фильтрате – альбумины. Далее к фильтрату добавляют кристаллический сульфат аммония, в осадок выпадают альбумины. Раствор отфильтровывают, с фильтратом проводят биуретовую реакцию. (см. Лаб. раб. «Белки»), она должна быть отрицательной!

Во 2-ю пробирку добавляют 4-5 мл дистиллированной воды и перемешивают. Наблюдается постепенное растворение осадка (обратимое высаливание).

Описать наблюдения:_________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Опыт 3. Высаливание белков молока

Реактивы: молоко 2%, насыщенный раствор сульфата аммония.

Ход работы: к 1 мл молока прибавляют 3мл дистиллированной воды и 2мл насыщенного раствора сульфата аммония. При этом происходит осаждение казеина и молочного глобулина.

Описать наблюдения:_________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Опыт 4. Денатурация белка:

Реактивы: раствор яичного белка 2%-ный, раствор уксусной кислоты 1%-ный, конц. раствор азотной кислоты, горелка.

Ход работы: в три пробирки наливают по 2 мл раствора белка, содержимое 1-й пробирки нагревают. Во 2-ю пробирку добавляют 2-3 капли 1%-ной уксусной кислоты и нагревают; в 3-ю пробирку осторожно, по каплям добавляют концентрированную азотную кислоту. Все явления, происходящие в пробирках фиксировать.

Описать наблюдения:_________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________