10. Транскрипция днк у прокариот. Кодирующая и антикодирующая цепи днк.

Уотсон и Крик думали есть что-то между ДНК и белком, т.к ядро отдельно от цитоплазмы. 3 типа РНК: и, т, р-РНК. 1 уровень экспрессии – решение, что именно с данного гена будем мы сейчас делать белок. Согласно Крику репликация-транскрипция-трансляция. Позднее – обратная транскрипция, синтез ДНК по РНК. Это если РНК-вирус нападет. Но это все равно. 1 цепь ДНК значима, а 1 нет. Антикодонная нужна нам. Радиометки нам дали это понять. Волкин и Астрахан 1962.

11. РНК - полимеразы. Строение, виды, функции.

Ферменты, которые делают РНК, работает так же как ДНК-полимераза, (с тех же концов). Состоит из 5 полипептидных цепей – 4 кор-ферментов. Способность искать и присобачиваться к промотеру – 5 цепь (ϭ-фактор). Три типа I – в ядрышках. (рибосомы) II 20-40%) III – большая часть.

12. Инициация транскрипции. Промотор, стартовая точка.

На 5' конце промотором нач-ся на 3' терминаторе конч-ся=ген. Промотер. Справа плюсики, слева минусики. Т.о. -20+20. Мин. 12нк. Во всех промоторах те же последовательности – консерв., они – сигналы, которые полимераза узнает. ТАТААТ – ящик Прибнова. Так как между А и Т две связи, а между Г и Ц три связи, им легче порваться. Здесь расходиться цепочкам легче. И синтез идет 5'–3'. Центр ящика -10.

-35 – участок распознавания, прикрепляется сигма-часть. Есть такие промоторы, которые без CAP и CRP не распознаются. Они транскрипцию активируют. У эукариот – -25, -75. Старт всегда А. (Ц или Т сбоков) 19-27 влево – ящик Хогнесса. ТАТАА он контролирует выбор старта.

13. Элонгация и терминация транскрипции.

Как при репликации ДНК. Здесь рибонуклеозидмтрифосфаты как предшественник. Рост происходит путём присоединения цепи его к 3'. Дифосфаты высвобождаются. У эукариотов и-РНК – 1 ген, у про м.б. много (полицистронная)

Заканчивается всё в кодоне. Особый белок у палочки контролирует точность терминации. Он к 5' концу, преследует РНК-полимеразу, РНК сбрасывается с ДНК при достижении сайта-терминатора.

14. Гетерогенная ядерная днк. Процессинг, сплайсинг.

Процессинг – изм. .РНК перед исп-ем её в биос. Ф. вырезают интроны, остаются эекзоны (альбумин 7700, а экзон 1859). Правило Шамбона: Интрон начинается с Г-У, заканчивается А-Г. и-РНК модиф-ся. 5’ конец присоединяет 7-метилгуаниалат 5’–5’ связью, формируется КЭП. Иногда их много (1,2,3). К хвосту 200 А, и метилы. Такой ДНК очень устойч. и м. сущ-ть неск. лет (у про сразу расп, 1 белок). Франц. узнали, что РНК .. это контролирует гетерогенная ядерная РНК может пройти через рибосомы один раз, образуется РНК-матюраза. (она интроны вырезает).

15. АРС-азы. Особенности строения, функции.

Хогвен обнаружил, что аминокислоты соединены с РНК и это делают АРС-азы. Адаптор делается в 2 этапа. Сначала Трансляция 1 (активация аминокислоты, соединение т-РНК с ней с помощью АРС-аз), Трансляция 2 (т-РНК переносит кислоту, кодоны распознаются итд) У АРС-аз 3 центра: специфичный к т-РНК, к аминокислоте, свзывание АТФ.

16. Транспортная рнк. Строение, функции. Строение рибосом.

Сайт спец-сти, связанности кодона, рибосомы, трансляции 2. Крик предположил адапторы. Роберт Холли расш. тРНК. 4S, 75-85 нуклеотидов. Трилистник. Левый дигидроурединовая форм-т трет. стр-ру иРНК, правый тепси-Ц, вверху АЦЦ. Им-т 4 2цепочечных (2 витка, Г-образная структура) и 5 1цепочечных. В ней есть псевдоуридин, дигидроуридин, аденозин, метилинозин, метилурацил. Не образуют 2цепочечных уч-ков. Антикодон петля из 7 нк, взаим. с иРНК. Контур АРС-азы соотв. иРНК, контакт на дигидроуредин. стебле и антикод. петле. Если 1 ам-та, а кодоны разные – изоакцепторная. (1=АРС-аза). Контроль 100 генов. Антикодоны 3'–5', кодоны 5'–3'. Некоторые тРНК узнают больше 1 кодона. Аланин – ГЦУ; ГЦЦ; ГЦА. Первые 2 основания одинаковые, поэтому Крик сказал, что узнаются 1ые 2 основания, а посл. качается, уоббл-теория. Но кодоны лейцина УУА и ЦУА, поэтому переносятся разн. тРНК. 1 осн. антикодона опр-т, сч-ся ли тРНК 1,2 или 3 раза. Т.о. выр-сть = неодн-сть 3 код.

Сведберг константа седиментации рибосом. Прокариот 70=50+30. Большая - 34 белка, 23S и 5S рРНК. Малая – 21 белок, 16S и 1S рРНК. Эукариот 80=60+40. Большая - 28S, 7S и 5S рРНК. Малая –18S и 1S рРНК. Самособирается. В норме субъединицы раздельны, а иРНК их соединяет.У прокариот 16S нужна и 6 белков. 80нк=1 рибосома. Они садятся на 5' конец иРНК. Первые 25 – КЭП. Первый 7-метилгуанилат. Иногда КЭП несколько, потом уч-ок где иРНК с рРНК соединяются.