
- •Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза пособие для врачей
- •Краткая аннотация.
- •1. Краткая характеристика хламидии
- •2. Методы лабораторной диагностики урогенитальных хламидиозов.
- •2.1. Бактериоскопический метод
- •2.2.Выявление антигенов в клинических образцах.
- •2.2.1. Метод люминесцирующих антител.
- •2.2.2. Метод иммуноферментного анализа.
- •2.3. Бактериологический метод
- •2.4. Серологические методы диагностики.
- •2.5. Методы амплификации нуклеиновых кислот
- •3. Меры предосторожности при диагностике урогенитальных хламидиозов
3. Меры предосторожности при диагностике урогенитальных хламидиозов
Сбор и обработку клинического материала для выявления или выделения Chlamydia trachomatis проводят, соблюдая режим работы бактериологических лабораторий. Необходимо исключать возможность загрязнения исследуемым материалом рук лабораторных работников, его попадания в глаза, нос, рот.
Хламидий быстро инактивируются под действием высокой температуры: при 60°С - в течение 15 минут. При 80°С - через 10 минут, при кипячении - через 3 минуты. Материал, содержащий штаммы Ch. psittaci, может быть обеззаражен в течение 3 часов при комнатной температуре: фенолом (1%р-р), хлорамином (3% р-р), лизолом (3% р-р), марганцовокислым калием (1:500), формалином с содержанием 38-40% формальдегида.
Урогенитальные штаммы хламидий Ch. trachomatis высокочувствительны к 70° этанолу, растворам 2% лизола, 0.05% нитрата серебра, 0,1% иодида калия, 0.5% перманганата калия, 25% перекиси водорода и инактивируются при комнатной температуре в течение 2 суток. Хлорамин в 3% концентрации инактивирует микроорганизмы в течение 1 минуты.
Заключение
Разнообразие методик, применяющихся в последние годы для диагностики урогенитального хламидиоза, приводит к определенным трудностям при их применении в системе практического здравоохранения. Большой опыт работы по диагностике этого заболевания в ЦНИКВИ и анализ литературных данных позволяет нам сделать некоторые обобщения и разработать алгоритм обследования больных в зависимости от стадии заболевания, анамнеза (давность заболевания, наличие предшествующего применения антибиотиков), особенностей используемой тест-системы.
Бактериоскопический метод исследования следует применять при заболеваниях глаз, где чувствительность этого метода 90-100%. При симптоматических формах урогенитального хламидиоза адекватные результаты диагностики могут быть получены при определении антигена хламидий методом ПИФ или НИФ (чувствительность 60-75%, специфичность около 98%), при использовании бактериологического метода культивирования in vitro на чувствительных клетках (чувствительность метода, по разным источникам, от 75% до 95%, специфичность 100%), молекулярно-биологическим методами, из которых самым распространенным является ПЦР (чувствительность 100%, специфичность приближается к 100% при соблюдении режима работы специализированной лаборатории и при использовании сертифицированных тест-систем). Контроль излеченности оптимально проводить бактериологическими методами. При неудачах лечения рекомендуется проводить тест на антибиотикочувствительность. В тех случаях, когда инфицированные органы недоступны для прямого микроскопического исследования (воспалительные заболевания органов малого таза, бесплодие) информативным является использование серологических методов обследования (чувствительность и специфичность не менее 95%). Следует отметить, что тест-системы для определения антихламидийных IgM на ранних сроках инфицирования в настоящее время не зарегестрированы, а определение показателей местного (IgA) и гуморального (IgG) иммунитета будет давать отрицательные результаты при свежих формах хламидиоза. При диагностике бессимптомных и осложненных форм хламидиоза, на наш взгляд, оптимальным является применение серологических методов в сочетании с бактериологическими и молекулярно-биологическими методами обследования. Рекомендации по применению описаных методов суммированы в таблице:
Методы |
Рекомендации |
Время обследования |
Комментарии |
Бактриоскопический |
трахома конъюнктивит с включениями |
1 ч |
не чувствителен при урогенитальных инфекциях |
Определение антигенов: ПИФ, НИФ ИФА |
образцы урогенитальные конъюнктивные ректальные назофарингеальные конъюнктивные |
0,5ч 2-5 ч |
образцы хранятся до 7 дней образцы хранятся до 2-х недель |
Бактериологический (культура ткани) |
все хламидииные заболевания, кроме периодов антибиотикотерапии |
48-72 ч |
"золотой стандарт", применяется при контроле излеченности |
Серологический |
инвазивные хламидииные заболевания |
1,5-3 ч |
при бесплодии, артритах, хронических заболеваниях органов малого таза, пневмониях новорожденных |
Молекулярно-биологические методы (ПЦР, ЛЦР) |
любые образцы, в том числе сыворотка крови и секреты |
2ч |
возможно длительное сохранение материала |