1. Лабораторная диагностика: определение общих липидов в сыворотке крови (Biotest Chemapol).

2. Определение малонового диальдегида ( МДА ) в биологических образцах

Определение содержания малонового диальдегида в плазме крови.

Принцип метода:

МДА образует с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) в кипящем водном растворе окрашенный в розовый цвет продукт химической реакции, интенсивность окраски раствора пропорциональна содержанию МДА.

Реактивы: водный раствор ТБК 0,8%

Ход работы:

В две пробирки помещают соответственно два образца исследуемых биологических жидкостей: по 2 мл . безбелкового фильтрата крови* соответственно. В каждую пробирку добавляют по 1 мл 0,8% раствора тиобарбитуровой кислоты (ТБК) , перемешивают и нагревают на кипящей водяной бане 10 минут. Пробирки охлаждают. Прозрачные окрашенные растворы помещают в кюветы и растворы колориметрируют на ФЭКе, зеленый светофильтр, против воздуха.

Данные о содержании МДА получают в единицах экстинкции.

*Безбелковый фильтрат крови получен заранее по стандартной методике,: к определенному объему цельной крови добавляют определенный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ ) 10 -20% , осаждаются белки крови и эритроцитов, полученную смесь центрифугируют для отделения осадка., супернатант используют для определения содержания МДА.

Клинико-диагностическое значение:

ПОЛ является одним из ведущих механизмов поражения клеточных мембран. В составе крови и других биологических жидкостей (моча, слюна) содержатся химические соединения, образующиеся в процессе ПОЛ. К ним относятся диеновые конъюгаты, гидроперекиси, МДА. Содержание этих веществ изменяется пропорционально интенсивности ПОЛ., а содержание МДА является одним из важных показателей активности ПОЛ.. Продукты ПОЛ переносятся из плазмы крови с состав слюны через гемато-саливаторный барьер, но могут выделяться в слюну из тканей при болезнях полости рта (болезнь Сьегрена, пародонтит, инфекционные поражения слизистых тканей полости рта).

7 КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ: смотри задание для студентов к практическому занятию.

8. Литература для подготовки

Основная

1.Биохимия: Учебник /Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД. 2003. – 784 с.: ил. – (Серия «XXI век») С. 386. 444-448, 428-431.

2.Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/ Под. Ред чл.-корр. РАН. Проф. Е.С.Северина.-М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.-384с. С.213-215, 219.

3.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – 3-е изд., перераб. и доп. –М.: Медицина. – 2004. – 704с.

4. Биохимия . Тестовые вопросы. Учебное пособие/ Под ред. Д.М. Зубаирова, Е.А. Пазюк.-М.: «ГЭОТАР-Медиа»2010.-960с.

Дополнительная

1.Биологическая химия:учебник / В.К.Кухта, Т.С.Морозкина,Э.И.Олецкий, А.Д.Таганович. под ред. Тагановича-Минск. Агар, М.: Издательство БИНОМ,2008.-688с. С. 216 -217, 224..

2. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии., Часть».,Осговы патохимии( Учебное пособие для студентов медицинских ВУЗ-ов), СПб., ЭЛБИ.-2000.- 688 с.

3. Л.А. Данилова Анализы крови м и мочи -СПб,1999. 128 с.

Методические указания подготовлены

Доц. каф. биохимии к.х.н. Каминской Л.А

ГОУ ВПО УГМА РОСЗДРАВА

кафедра биохимии

Утверждаю

Зав. каф. проф., д.м.н.

Мещанинов В.Н.

_____‘’_____________2010г