40. В какой форме геном вируса сохраняется в клетке при латентной инфекции?

Характеристика возбудителя

Ядро вируса содержит двунитчатую ДНК (объемом 172 kb), кодирующую около 100 различных веществ. Вирусный геном покрыт капсидом, состоящим из 162 капсомеров. Капсид имеет форму икосаэдра (как и у других герпес-вирусов) и покрыт липидным бислоем, материал для которого вирус заимствует у клетки хозяина. Синтез вирусной ДНК и сборка вирусного капсида происходят в ядре клетки. Наружная мембрана вирусной частицы формируется из белков и липидов клетки хозяина и вирусных гликопротеинов, которые являются рецепторами вируса и к которым при развитии иммунного ответа вырабатываются нейтрализующие антитела. Наиболее известным из них является гликопротеин gp350, определяющий тропность вируса.

В зависимости от типа жизненного цикла ДНК вируса может быть представлена в двух формах: линейной и в виде эписомы. Обе эти формы реплицируются в ядре клетки хозяина. При продуктивной (литической) инфекции, когда идет активная репликация ВЭБ с разрушением инфицированной клетки (если вирус ее покидает), ДНК вируса имеет линейную структуру. При цитолитическом цикле развития вирус индуцирует экспрессию как собственных ранних антигенов, так и генов клетки хозяина, продукты которых участвуют в репликации вируса. Такой тип репликации ВЭБ имеет место при острой ВЭБ-инфекции (ВЭБИ) и активации хронической ВЭБИ.

Молекулярной основой латентной инфекции является эписома. В этом случае ДНК замкнута в кольцо: на концах линейной вирусной ДНК имеются «терминальные повторы», состоящие из 10—20 копий, которые способны соединяться под действием соответствующих сигналов. Такой тип генома характерен для ВЭБ-инфицированных (ВЭБ(+)) В-лимфоцитов. Даже при первичном инфицировании вирусом В-лимфоцитов в них практически не развивается литический тип репликации, а изначально ДНК вируса замыкается в эписому и в последующем реплицируется в таком виде синхронно с пролиферацией инфицированной клетки. Поэтому гибель ВЭБ(+) В-лимфоцитов связана не с опосредованным вирусом цитолизом, а с действием факторов противовирусного иммунитета, в первую очередь цитотоксических лимфоцитов. Крайне редко, но возможна интеграция вирусного генома в геном клетки хозяина, что значительно повышает вероятность мутаций и, как следствие, малигнизации .

При цитолитической репликации маркерами ВЭБ-инфекции являются :

1) вирусная ДНК-полимераза (при латентной инфекции вирус для репликации использует ДНК-полимеразу клетки хозяина);

2) фактор процессинга;

3) хеликаза;

4) примаза;

5) рибонуклеотид редуктаза;

6) тимидин-киназа. Наличие этого фермента объясняет возможность эффективного подавления цитолитического — но не латентного! — типа репликации вируса такими противовирусными препаратами, как ацикловир, валацикловир и т.д.;

7) вирусный капсидный антиген (viral capsid antigen — VCA), включающий комплекс белков р150, р18 и р23, из которых два последних являются иммунодоминантными;

8) ранний антиген (Epstein—Barr early antigen — EBEA), включающий белки р54 и р138;

9) шесть ядерных антигенов (Epstein—Barr nuclear antigen — EВNA): EВNA-1, -2, -3А, -3В, -3С и LP (leader protein);

10) три латентных мембранных протеина (latent membrane protein — LMP): LMP-1, -2А и -2В;

11) другие (в том числе пока мало охарактеризованные суперантигены ВЭБ ).

Существуют различные варианты латентной формы ВЭБИ, которые ассоциируются с различными клиническими проявлениями. У большинства иммунокомпетентных людей после перенесенной первичной инфекции формируется напряженный противовирусный иммунитет, на фоне которого вирус никак себя не проявляет. Это состояние расценивается как выздоровление, хотя у здоровых доноров небольшое количество клеток (примерно от 1 до 50 на 1 млн), в основном В-лимфоциты, несут в себе вирусную эписому . Но это, если можно так сказать, «фенотипически нулевые клетки», т.е. клетки с неактивированным фенотипом и отсутствием экспрессии латентных генов .

Однако у некоторых людей вирус может находиться вроде бы в латентном состоянии, но при этом некоторые его антигены экспрессируются (так называемая активная латенция). Обычно у таких пациентов спустя годы и даже десятилетия могут развиться ВЭБ-ассоциированные пролиферативные заболевания. Для таких ситуаций было предложено выделять различные варианты активной латенции.

· I тип — наиболее «сдержанная» (малоактивная) латенция. При этом экспрессируются EВNA-1, пара неполиаденилированных РНК (Epstein-Barr-encoded RNA — EBER) — EBER-1 и EBER-2. Кроме того, иногда синтезируется и LMP-2А. Этот вариант латенции ассоциирован с лимфомой Беркитта.

· II тип латенции встречается при эпителиальных опухолях (назофарингеальная карцинома и др.) и при болезни Ходжкина. В этом случае экспрессируются EВNA-1, LMP-1, LMP-2А и LMP-2В, EBER-1 и EBER-2.

· III тип — наиболее активная латенция, при которой выявляются EВNA-1 и EВNA-2, LMP-1, LMP-2А и LMP-2В, EBER-1 и EBER-2. Регистрируется при различных лимфомах и других опухолях, развивающихся на фоне иммунодефицита при посттрансплантационной лимфопролиферативной болезни, у больных со СПИД и др.