39.Приготування розч. Еозину, гематоксиліну Ерліха, Майера, Вайгерта. Кислий гематоксилін Ерліха

2г гематоксилін розчиняють в 100 мл 96%-спирту і додають 100 мл води, 100 мл хімічно чистого гліцерину, 3 г калійних квасців і 10 мл оцтової кислоти. Барвник повинен "дозрівати" приблизно 14 днів,періодично його збовтувати.В процесі «дозрівання» розчин з світло-червоного стає темно-червоним. У щільному закритому сосуді розчин зберігає фарбувальну силу довгий час. Якщо замість гематоксилін взяти 0,25-0,5 г гематеіна, то барвник придатний до вживання відразу ж після виготовлення.  Фарбування роблять таксамо, як і гематоксиліном Майера. Після фарбування добре промиваютьпроточною водою - зрізи повинні інтенсивно посиніти. Ядра фарбуються втемно-синій колір.

Кислий гемалаун Майера Може бути використаний відразу після приготування, дає чисту інтенсивно синє забарвлення ядер. 1г гематоксилін розчиняють в 1000 мл дистильованої води, додають 0,2 йодата натрію (NaІO3) і 50 г хімічно чистих калійних квасцов. Обидві солі розчиняють при багаторазовому помішуванні; при цьому розчин приймає фіолетово-синього забарвлення. Потім додають до розчину 50 г хлоралгідрату і 1 г кристалічної лимонної кислоти, після чого розчин стає фіолетово-червоним.Розчин при зберіганні в добре закритій посудині з ієнського скла може довго  залишатися придатним для застосування. Перевага: не потребує «дозрівання», завдяки швидкому окисненню гемотоксиліна йод атом натрія.

Гематоксилін Вейгерта Складають у міру потреби з двох основних розчинів. Основними є розчин Вейгерта I і розчин Вейгерта II. Перший являє собою 1%-розчин гематоксилін в 96%-спирті (1г гематоксилін + 100 мл96%-спирту). Другий розчин має наступний склад: 4 мл розчину полуторахлорістогозаліза (FeCl3), 1 мл концентрованої соляної кислоти, 95 мл дистильованої води. Перед застосуванням змішують обидва розчини точно в рівних обсягах. Час фарбування 1-2 хвилини, потім промивання водопровідною водою. За вказаний час зрізи фарбуються прогресивно. Для диференціювання застосовується 0,1%-розчин солянокислого спирту,потім ретельна промивка водопровідною водою.Обидва основних розчини можуть зберігатися тривалий час. Змішаний розчин можна застосовувати лише кілька днів.

Еозин – протоплазматичний барвник; використовується він у вигляді спиртових або,набагато частіше, водних розчинів. Для приготування еозину 0,1 г фарби розчиняють в 100 мл дистильованої води. 

40.Забервлення гіст.Зрізу гематоксилін-еозином.

1.Видаляють парафін із зрізів: послідовно нанести ксилол(1) -2хв.,ксилол(2)-2хв.Перевірити чи не залишився парафін(подивитись на чорному фоні) 2.Провести через спирти: 96град.(1)-2хв., 96град.(2)-2хв.,70град.-2хв.,50град.-2хв. 3.Сполоснути водою4.Зібрати воду навколо зрізу фільтр.папером. Фарбування: 5.Нанести гематоксилін на 5 хвилин. 6.Промивають у воді. 7.Помістити для диференціювання на 10хв. у воду. 8.Підсушити препарат фільтр.папером. 9.Забарвлюють еозином 3хв. 10. Видаляють воду з зрізів в одній порції 70 ° етанолу, двох порціях 96 ° спирта на 2 хв.в кожному.  11.Прояснюють зрізи в двох порціях ксилолу(1) – 7-10 хвилина, ксилолу(2) – 7-10 хвилина. 12.Заключення препар. в гліцерині або в канад.бальзам(нанести краплю гліцерину чи канад.бальзаму і покрити покрівним скельцнм) Результат: ядра кл., ядерця, хромосому фарбуються в синій, синьо-фіолетовий колір, цитоплазма – в різні відтінки рожевого.