33.Мікротом,його будова.Мікротомні ножі.

Мікротом-спеціальний механічний пристрій,призначений для виготовлення гістологічних зрізів певної товщини.Є мікротоми-1)санний,2)для парафінових зрізів,3)-заморожуючий Основні частини мікротома:станина,механізм мікро подачі,механізм підйому,зажим для блоків,ножові салаки з ножетримачем. Різання досліджуваного об’єкта на мікротомі проводять за допомогою спеціальних мікротомних ножів.Є декілька видів ножів в залежності від форми леза-ніж типу А(мяка сталь для малих об’єктів),В(більш тверда сталь для целоїдинових зрізів),С(тверда сталь для найбільш щільного матеріалу кістка,хрящ). Треба знати,щоб отримати правильний зріз треба як слід наточити ножі.Є кілька способів точіння,але найбільш надійним по цей час вважається ручне гостріння ножів. При гострінні ножа має бути таке положення ножа,коли ріжучий край і плоскость леза знаходяться під кутом один до одного.Спочатку мікротомний ніж точать на камені,попередньо змочивши його водою чи маслом:правою рукою ніж беруть за ручку,а лівою за вільний кінець і ставлять на протилежний від себе край камінця таким чином щоб ріжуча поверхня стикалась зі всією поверхнею камінця.Потім починають рухати ніж до себе,поступово зміщаючи його в сторону з таким розрахунком,що під час руху вся ріжуча поверхня від одного кінця до другого пройшла по каменю.По закінченню руху ніж перевертиють через спинку і знову гострять в протилежному напрямку.Гостріння можна вважати закінченим,коли при перегляданні в мікроскоп ріжучий край виглядає рівним. Після заточування,ніж треба вимити,насухо витерти і направити на ремні.Для цього треба ремінь зі шкіри і чотиригранний брусок з шириною грані рівній ширині ремня.Правку мікротомного ножа проводять з допомогою таких рухів як при заточування,тільки ніж розташовують на ремні так,щоб під час правки він був обернений до людини,що точит спинкою,а не ріжучим краєм. Гарно відточений і направлений мікротомний ніж повинен легко перерізати людську волосину,яку тримають за один край і не залишати борозд на парафіновому блоці під час різки.

34. Приготування зрізів.Техніка знімання парафінових зрізів з ножа.

Наклеєний на деревяну колодку парафіновий блок стійко закріплюють в зажимі мікротома,розташовуючи довгою віссю паралельно ялиннику мікротома.Потім встановлюють необхідний кут різки і правильний кут нахилу ножа і надійно закріплюють гвинтовим зажимами.Регулюючи гвинтами механізм подачі блок встановлюють так щоб верхя його площина знаходилась в горизонтальному положенні і не доходила до леза ножа на 0,5-1 мм. Встановлюють товщину зрізів на шкалі для отримання товстих зрізів(25-30 мкм).Різким рухом салазок роблять перший зріз для моделювання блока,зрізаюсь скалпелем надлишковий парафін,лишаючи навкруги залитого об’єкта шар не більше 2-3 мм.Встановлюють необхідну товщину зрізів і приступають до різки матеріалу. Готовий зріз обережно знімають з ножа вологою щіточкою( в напрямі від спинки до леза) і переносять або на підготовлене предметне скло або в чашку з теплою(35-40 С) дистильованою водою.Воду попередньо кип’ятять щоб попередити появу на нижній поверхні зрізів бульбашок повітря.Ставлять зрізи в воду(предметне скло) обов’язково поверхнею,що стикалась з ножем,виявити це можна по характерному блиску.