ми для использования бактериями сахара. Чтобы избежать этих явлений, растворы некоторых веществ стерилизуют отдельно при значении рН, обеспечивающем их целостность, и добавляют их в среды после стерилизации. Это частный случай так называемой раздельной стерилизации. Таким приемом пользуются довольно часто, так как многие компоненты среды нельзя стерилизовать при одинаковом режиме давления, температуры, рН и т. д. Растворы компонентов среды, простерилизованные разными способами, перед посевом стерильно объединяют в нужном соотношении.

Дробная стерилизация (тиндализация)

Дробная стерилизация применяется для стерилизации сред, портящихся под действием температур выше 100°С. Этот прием был введен английским ученым Тиндалем. Принцип тиндализации заключается в том, что проводят нагревание среды или ее компо­нентов при нормальном давлении несколько раз и в период между прогреваниями дают прорасти жизнеспособным спорам. Предпо­лагается, что возникающие из спор клетки погибают при последую­щем прогревании, не успев образовать новые споры. Прогрева­ние можно осуществлять в парах кипящей воды или, как говорят, текучим паром. Обработку текучим паром проводят 3 раза по 30—40 мин в автоклаве с незавинченной крышкой, или в кипятиль­нике Коха. Время прогревания отмечается с момента энергичного выделения пара.

Кипятильник Коха представляет собой металлический цилиндр, обычно покрытый теплоизолирующим слоем, чаще всего — асбестом. Внутри цилиндра находится сетчатое ведро или подставка на ножках, куда помещают стерили­зуемый материал, прикрыв его клеенкой для защиты от конденсационной воды. На дно цилиндра наливают воду так, чтобы уровень ее не доходил до дна подставки. Кипятильник закрывают крышкой, в которой имеется отверстие для выхода пара, и нагревают с помощью газовой горелки или электричества.

В промежутки между прогреваниями среды помещают на сут­ки в термостат, отрегулированный на 30° С, для проращивания спор. Практическое значение тиндализации в настоящее время весьма ограничено, так как между прогреваниями некоторые спо­ры могут не прорасти, а часть появившихся вегетативных клеток может вновь образовать споры и з таком виде противостоять дей­ствию высокой температуры. Кроме того, этот метод требует боль­шой затраты времени.

Среды, не выдерживающие нагревания при 100°С, прогревают более осторожно при 60—80°с. 4—5 дней подряд. Однократный прогрев материала при температурах ниже 100"с известен под названием пастеризации.

Пастеризация предложена Пастором. Она предназначена для уничтожения в основном бесспоровых микроорганизмов. Пастерилизация в подавляющем большинстве случаев не обеспечивает стерильнсть. субстрата. Пастеризацию проводят при 60—75°С от 15

92