Занятие № 12 экология микроорганизмов

Цель: Изучить влияние экологических факторов на рост и развитие микроорганизмов.

Основные понятия. Облигатные психрофилы, психротрофные микроорганизмы (факультативные психрофилы), термофилы, осмотолерантные микроорганизмы, галлофилы, лиофилизация, облигатные аэробы и анаэробы, микроаэрофилы, аэротолерантные анаэробы, антисептики.

Контрольные вопросы

1. Влияние температуры на рост и развитие микроорганизмов. Экологические группы бактерий по отношению к температуре.

2. Влияние влажности на рост и развитие микроорганизмов.

3. Влияние света и различных излучений на рост и развитие микроорганизмов. Влияние магнитного поля.

4. Влияние концентрации кислорода на рост и развитие микроорганизмов.

5. Влияние реакции среды на рост и развитие микроорганизмов. Соединения и ионы, токсичные для бактерий.

6. Адаптивные реакции микроорганизмов.

Занятие № 13 определение чувствительности бактерий к антибиотикам

Цель: Провести определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

Задачи:

1. Произвести определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агар с применением бумажных дисков

Материалы и оборудование. Чашки Петри с МПА, стерильные диски, смоченные растворами антибиотиков, чистые культуры сапрофитных бактерий и плесневых грибов, пипетки, спиртовки, шпатели.

Основные понятия. Антибиотики, бактериостатический и бактерицидный эффекты, R-факторы, резистентность.

Ход работы

Задание № 1. Произвести определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агар с применением бумажных дисков.

Диско-диффузионный метод определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам основан на регистрации диаметра зоны подавления роста вокруг бумажного диска с антибиотиком. На поверхность питательного агара в чашках Петри, засеянного испытуемыми микробами, наносят бу­мажные диски, пропитанные антибиотиками, и чашки инкубируют при 37°С. Наличие зоны задержки роста микробов вокруг дисков свидетельствует о чувствительности возбудителя к препарату, отсутствие зоны задержки роста – об устой­чивости.

Ход определения. В стерильные чашки Петри с МПА наносится культура микроорганизмов. В качестве посевного материала используется суточная бульонная культура – 0,2 мл бактериальной взвеси наносится на поверхность МПА и равномерно распределяется путем покачивания чашки с по­следующим отсасыванием избытка жидкости пипеткой.

Чашки подсушивают в течение 30-40 минут при комнатной температуре. Затем на поверхность засеянной сре­ды пинцетом накладывают диски, пропитанные различными антибиотиками. Диски накладывают на поверхность плот­но для тесного контакта со средой. Диски раз­мещают на равном расстоянии один от другого и примерно на 2 см от края чашки. Чашки ставят в термостат перевернуты­ми кверху дном или вкладывают под крышку чашки кружок фильтровальной бумаги, чтобы избежать размывания газона конденсационной водой, и инкубируют при 37°С в течение 18-ти часов.

Оценка результатов. С помощью линейки определяют диаметр зон за­держки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр самого диска. Единичные колонии или тонкая пленка роста микроор­ганизмов внутри зоны задержки роста не учитывается. Отсутствие зон задержки роста микробов вокруг дисков указывает на отсутствие чувствительности микроба к данному антибиотику. При зоне задержки роста микроба диаметром до 10 мм штамм расценивается как мало чувствительный. Зона задержки роста микроба более 10 мм указывает на чувствительность штамма. Чем больше зона задержки роста, тем выше чувствительность микроорганизмов к антибиотику. Результаты занести в таблицу №10.

Таблица № 10. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам.

Антибиотик	Размер зоны задержки роста (мм) для разных микроорганизмов
	Виды микроорганизмов
	E.coli	…
ампициллин
цефотоксим
…

Контрольные вопросы

1. Антибиотики, их практическое значение. Антагонизм микроорганизмов.

2. Открытие антибиотиков.

3. Классификация антибиотиков.

4. Единицы биологической активности антибиотиков.

5. Биологическая роль в природе.

6. Антибиотические свойства стрептомицина.

7. Антибиотические свойства пенициллина.