- •1. История развития биотехнологии. Основные этапы культуры клеток и тканей.
- •2. Использование достижений биотехнологии в отраслях производства.
- •4. Клеточная инженерия. Тотипотентность растительных клеток.
- •5. Клональное микроразмножение растений in vitro.
- •6. Основные этапы клонального микроразмножения растений.
- •7. Экспланты: происхождение, и их стерилизация.
- •8. Питательные среды для клонального размножения, каллусообразования и морфогенеза in vitro.
- •9. Модель Миллера-Скуга о роли гормонов в клеточной и тканевой культуре.
- •14. Размножение in vitro в биореакторах и образованием соматических зародышей.
- •15. Распространение вирусов, вироидов, микоплазм у растений.
- •16. Подготовка материала к оздоровлению от вирусных инфекций.
- •17. Использование термо- и химиотерапии при оздоровлении от вирусных болезней.
- •18. Биотехнология оздоровления картофеля от вирусных инфекций и других, патогенов.
- •19. Схема оздоровления древесно-кустарниковых растений.
- •20. Фитосанитария выращивания оздоровленных растений.
- •21. Диагностика вирусов при оздоровлении и размножении оздоровленных растений.
- •22. Иммуноферментный анализ: значение, методы ифа, применение.
- •23. Метод двойных антител твердофазного ифа «сэндвич - вариант».
- •24. Антитела, антигены, коньюгат, субстрат и метка.
- •25. Суспензионная культура клеток in vitro.
- •26. Получение протопластов растительных клеток.
- •27. Культивирование и слияние протопластов.
- •28. Парсексуализация (гибридизация) соматических клеток и применение в практике.
- •29. Создание ассоциаций клеток растений и микроорганизмов.
- •30. Биотехнолгия в симбиотической азотфиксации (бобово-ризобиальный симбиоз).
- •31. Конструирование рекомбинантной днк.
- •32. Получение инсулина на основе методов генной инженерии.
- •33. Этапы технологии получения гмо.
- •34. Улучшение качества и повышение продуктивности растений методами генной инженерии.
- •35. Получение трансгенных растений, устойчивых к стрессовым воздействиям.
- •36. Получение трансгенных растений, устойчивых к насекомым.
- •37. Получение трансгенных растений, устойчивых к грибной, бактериальной и вирусной инфекции.
- •38. Получение трансгенных растений, устойчивых к гербицидам биалофос, глифосат, бромоксилин.
- •39. Перенос генов и их трансформация (векторы).
- •40. Векторы переноса генов на основе Ti-плазмиды Agrobacterium tumifaciens.
- •41. Биобезопасность. Понятие биобезопасности. Методы оценки гмо. Контроль за биобезопасностью.
- •42. Особенности государственного регулирования генноинженерной деятельности и контроля за безопасностью получения и использования гмо в сша и рф.
- •43. Биотехнология производства метаболитов. Первичные и вторичные метаболиты.
- •44. Биотехнология получения аминокислот. Гидролиз сырья, химический и микробиологический синтез, биотрансформация предшественников аминокислот.
- •46. Биотехнология производства органических кислот. Получение уксусной, лимонной и др. Кислот.
- •47. Биотехнология получения вторичных метаболитов (идиолитов): антибиотиков, ферментов, стероидов и др.
- •48. Криосохранение и банк клеток тканей растений.
- •32. Получение инсулина на основе методов генной инженерии.
- •6. Основные этапы клонального микроразмножения растений.
- •7. Экспланты: происхождение, и их стерилизация.
- •8. Питательные среды для клонального размножения, каллусообразования и морфогенеза in vitro.
31. Конструирование рекомбинантной днк.
Генная инженерия – когда в гены хозяина вшиваются другие гены, или вышивается ген. Масло рапса очень горькое, вырезаем ген, который кодирует к-ту. Созданы сорта рапса, которые заменяют солярку. Конструирование ДНК (на примере плазмиды). Центрифугирование 4-6 ч., 20 тыс. оборотов. Получают плазмиды кишечной палочки – 1) ДНК разрезаем ферментом (рестриктаза) по липким концам. Ищет последовательность ААТТ и режет через эти основания. Фермент надо удалить в воде, центрифугой. 2) берем ген, который надо пришить. Пришиваем другими ферментами в ДНК (лигаза), она сшивает по липким концам. 3) Получаем гибридную (рекомбинантную) ДНК. Отмывка фермента центрифугированием.
Ген, ферм. которого разрушает гербицид. Больше 2-х признаков переместить за один раз нельзя.
32. Получение инсулина на основе методов генной инженерии.
Получают плазмиды кишечной палочки – 1) ДНК разрезаем ферментом (рестриктаза) по липким концам. Ищет последовательность ААТТ и режет через эти основания. Фермент надо удалить в воде, центрифугой. 2) берем ген ДНК человека, который надо продуцирует инсулин. Пришиваем лигазой в ДНК, она сшивает по липким концам. 3) Получаем гибридную (рекомбинантную) ДНК. Отмывка фермента центрифугированием.
33. Этапы технологии получения гмо.
Достигнутые результаты по культивированию кл. и тканей, и возможности получения целого растения из 1 кл., позволили получать растения с несвойственными им признаками (ГМО).
Вариант с 7-ю этапами: 1) поиск и удаление нужного гена из организма донора. 2) клонирование гена. 3) встраивание гена в вектор трансформации растения. 4) трансформация растительной клетки (плазмида, протопласт, каллусная ткань). 5) образование каллусной ткани путем размножения клетки и получения побегов, которые потом укореняют. 6) получение целых растений. 7) проверка ГМР на продуктивность и биобезопасность.
Вариант с 4-мя этапами: 1) Выбор гена и его клонирование. Для трансформации берут гены, определяющие устойчивость к неблагопр. факторам, насекомым, гербицидам. Берут у дикорастущего растения или выделяют из бактерий. 2) Подбор генотипа растения – реципиента. Берут высокоурожайные сорта по имеющимся недостаткам. 3) Введение гена и его экспрессия в геноме реципиента. Перенос осущ-ся векторами. Для двудольных – агробактериальный вектор с ипол-м Тi-плазмиды. 4) Регенерация из клетки целого растения, отбор трансген. раст. Для злаковых регенерация идет хуже.
34. Улучшение качества и повышение продуктивности растений методами генной инженерии.
Методами ГИ получены растения с высоким содержанием белка, жира, сахаров. Зерно злаковых бедно лиз-, три-, тре-. Получена трансгенная кукуруза, обогащенная лиз-. рапсовое масло без беруновой к-ты. Для увеличения продуктивности пришивают гены С4-фотосинтеза к С3-фотосинтезу (только на свету). получен рис (ген из кукурузы). Пришиты гены, контролирующие количество хлоропластов и хлорофилла А и В. В раст. томата, картофеля пришит ген СПС (сахаро-фосфат-селитетазы) из кукурузы. У этих растений улучшен метаболизм.
Получены гвоздики и хризантемы с нетрадиционной окраской цветков за счет образования антоцианов.