Інструкційна картка до проведення лабораторного заняття № 3

1.Тема заняття «Йодометричний метод визначення глюкози ».

2. Мета проведення заняття: засвоїти визначення вмісту глюкози у глюкозовмісних продуктах йодометричним методом.

2.1.Після виконання роботи студент повинен

знати основні методи якісного та кількісного визначення вуглеводів; методику визначення глюкози в розчині йодометричним методом;

уміти проводити кількісне визначення глюкози в розчині йодометричним методом

3. Матеріально-технічне оснащення робочого місця:

Обладнання: лабораторні терези; мірні колби місткістю 100 мл; лійка для фільтрування; фільтрувальний папір; титрувальна установка, піпетки на 25 мл, 10 мл; реактиви , матеріали: 0,1 н розчин натрій тіосульфату; 1 н розчин сульфатної кислоти; 0,1 н розчин натрій гідроксиду; 1,0 % -ний розчин крохмалю.

4. Інструктаж з техніки безпеки : інструкція №1, 2, 7.

5. Короткі відомості з теоретичної частини роботи.

Принцип методу ґрунтується на здатності йоду в лужному середовищі окислювати тільки альдози, не впливаючи на кетози.

Глюкоза є альдозою, тому вона окислюється йодом в лужному середовищі за рівнянням:

СН₂ОН– (СНОН)₄–СОН + I₂ +2 NaОН СН₂ОН– (СНОН)₄ – СООNa + + 2 NaI + 2 Н₂О

Це рівняння складається з двох реакцій:

I₂ + 2 NaОН  NaОI + 2 NaI + Н₂О ;

СН₂ОН– (СНОН)₄ –СОН +NaОI +NaОН СН₂ОН–(СНОН)₄– СООNa + + NaI + 2 Н₂О

Йод, який не прореагував з глюкозою, визначають у кислому середовищі титруванням розчином натрій тіосульфату. Дана реакція проходить також у дві стадії:

NaОI + NaI +H₂SO₄  I₂ + Na₂SO₄ + Н₂О;

I₂ + 2Na₂S₂O₃  2 NaI + 2 Na₂S₄O₆

6. Зміст і послідовність виконання

Ретельно подрібнену наважку речовини (1 г) перенесіть у мірну колбу місткістю 100 мл, розчиніть вміст у дистильованій воді , доведіть об’єм до мітки, перемішайте. Вміст колби профільтруйте. З прозорого розчину в колбу Ерленмейера відберіть 10 мл, що відповідає наважці 0,1 г вихідної речовини.

У колбу додайте 25 мл 0,1 н розчину йоду і через 2-3 хв при енергійному перемішуванні повільно додайте 35 мл 0,1 н розчину натрій гідроксиду до зникнення забарвлення. Колбу закрийте гумовою пробкою і витримуйте 20 хв у темному місці. Потім додайте 5 мл 1 н розчину сульфатної кислоти і титруйте йод, що виділився 0,1 н розчином натрій тіосульфату, додаючи в кінці титрування розчин крохмалю (індикатор).

Паралельно проведіть контрольний дослід з 10 мл дистильованої води. Вміст глюкози (%) обчисліть за формулою:

(А-В) 0,009 V₁

Г = 100% , де

n V₂

А і В - кількість натрій тіосульфату, витраченого на титрування відповідно контрольної і дослідної проб, мл;

0,009 – кількість глюкози, еквівалентна 1 мл 0,1 н розчину йоду, г/мл (молекулярна маса глюкози 180, еквівалент 90, титр 0,1 н);

n – наважка, г;

V₁ – об’єм розчинення наважки, мл;

V₂ – об’єм, взятий для титрування, мл;

100 – коефіцієнт перерахунку у відсотки.

7 . Методичні рекомендації з виконання та оформлення роботи : в кінці роботи зробіть висновок про вміст глюкози в досліджуваному розчині

8.Рекомендована література

1.Кучеренко М.Є. та ін Біохімія. – К.: ВПЦ «Київський університет»2002. с.17-31

2. Боєчко Ф.Ф. Біологічна хімія. – К.:Вища школа,1995, с.223-229.

3.Кретович В.Л. Биохимия растений. – М.: Высшая школа.1985.

4. Салюк А.І. Практикум для студентів технологічних спеціальностей денної форми навчання. – К.: НУХТ.2008, с.4-5