Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методы исследования.ppt
Скачиваний:
102
Добавлен:
16.07.2019
Размер:
25.07 Mб
Скачать

Изображение клетки с введенными в нее флуоресцентными белками. Глубина расположения молекул определяется цветом: красный соответствует самым нижним слоям, фиолетовый — наиболее приближенным к наблюдателю.

Метод цитохимии оказался очень плодотворным, дав биохимикам возможность выделять разные органеллы клетки в относительно чистом виде.

Он позволяет, кроме того, определять химический состав органелл и содержащиеся в них ферменты и на основании получаемых данных делать выводы об их функциях в клетке.

Тема:

Прижизненное исследование клеток

Микроскопическое исследование живых клеток и тканей широко применяется в цитологии и позволяет

получить

наиболее

полную информацию

об их

жизнедеятельности

проследить движение,

процессы

деления,

разрушения,

роста,

дифференцировки и взаимодействия клеток,

 

продолжительность их жизненного

цикла,

реактивные изменения в

ответ на действие

различных факторов.

 

 

 

Прижизненное окрашивание клеток

Витальное

Суправитальное

краситель вводят в

организм животного, при этом он

избирательно окрашивает

определенные клетки, их органеллы или межклеточное вещество.

окрашивание живых клеток, выделенных из организма.

Методы прижизненной окраски

Прижизненные красители - это органические соединения, обладающие относительно небольшой токсичностью для живых клеток.

Различают основные (нейтральный красный, метиленовый синий) и кислые красители (трипановый синий, литиевый кармин).

При работе с любым из витальных красителей следует учесть, что краситель нужно растворять только в той среде, в которой могут переживать клетки исследуемого организма.

Окраска живых клеток дает возможность выявлять изменения, происходящие в клетках и тканях при разных внешних воздействиях.

Исследования клеток в организме (in vivo)

1.Метод вживления прозрачных камер с изучаемыми клетками в организм животного.

2.Метод трансплантации клеток крови и костного мозга от здоровых животных-доноров животным-реципиентам, подвергнутым смертельному облучению.

Исследования живых клеток и тканей в культуре (in vitro)

Культивирование клеток – это процесс искусственного выращивания клеток в контролируемых условиях in vitro.

Выделение

клеток

Из крови; из мягких тканей с помощью ферментов разрушающих внеклеточный матрикс.

Культивирование

клеток

Клетки выращивают на специальных питательных средах;

обеспечиваются стерильность среды и определенная температура;

различают суспензионные и монослойные культуры

Использование клеточных культур

для проведения экспериментальных наблюдений на клетках и тканях человека;

для гибридизации клеток;

для промышленного производства вакцин и различных продуктов биотехнологии.

Соматическая гибридизация

Соматическая гибридизация – это слияние клеток, принадлежащих к разным биологическим видам.

Гетерокарион, который образуется при слиянии двух клеток различных типов, способен к митозу, в результате чего образуется гибридная клетка.

Клонирование гибридных клеток приводит к образованию гибридных клеточных линий, которые используются для изучения генома.

Гибридомы

Гибридомы – это бессмертные клеточные клоны, продуцирующие антитела одной специфичности. Их получают при слиянии нормальных В- лимфоцитов, продуцирующих антитела, с опухолевыми клетками (В-лимфомы).

Каждый клон гибридомы является источником моноклональных антител.