Поляризационная микроскопия
Поляризационный микроскоп является модификацией светового микроскопа, в котором установлены два поляризационных фильтра — первый (поляризатор) между пучком света, и объектом, а второй (анализатор) между линзой объектива и глазом.
Поляризационная микроскопия позволяет получать изображения неокрашенных анизотропных структур (например, коллагеновых волокон, миофибрилл или клеток микроорганизмов).
Люминисцентная микроскопия
Люминесцентная микроскопия
(лат. Lumen, luminis свет; греч. Micros малый + skopeo рассматривать, исследовать) – метод микроскопии, основанный на способности некоторых веществ люминесцировать, т.е. светиться при освещении невидимым ультрафиолетовым или синим светом
Справа – изображение, полученное с помощью сканирующей флуоресцентной микроскопии, демонстрирует целостность замаскированных мембраной эритроцитов наночастиц (зеленый) после их проникновения внутрь раковой клетки. Полимерные ядра наночастиц помечены красным красителем, а раковая клетка – синим.
Физические основы люминесценции:
атомы и молекулы ряда веществ, поглощая коротковолновые лучи, переходят в возбужденное
состояние. Обратный переход из возбужденного состояния в нормальное происходит с испусканием света, но большей длиной волны.
История развития люминесцентной микроскопии:
1910 год - А. Кёллер доказал принципиальную возможность создания люминесцентного микроскопа.
1911 год – изобретение люминесцентного микроскопа и его использование М.С. Цветом при изучении люминесценции хлорофилла растительных клеток.
1935 год – начало широкого использования флюорохромных красителей .
1953 год – разработка метода возбуждения люминесценции падающим светом с использованием интерференционной светоделительной пластинки.
В последующие годы был налажен выпуск люминесцентных микроскопов и устройств, основанных на этом принципе, развитие технологий медико-биологических исследований
Разновидности люминесценции:
Флюорохромы
красители, не вызывающие сильной окраски объектов в обычном свете, но флуоресцирующие при облучении ультрафиолетовыми лучами.
Устройство люминесцентного микроскопа
Наличие мощного источника света в осветителе, излучающего преимущественно в коротковолновой (ультрафиолетовой, синей) части спектра (ртутно-кварцевая лампа или галогенная кварцевая лампа).
Наличие системы светофильтров
-возбуждающие светофильтры пропускают только ту часть спектра, которая возбуждает люминесценцию;
-теплозащитный светофильтр защищает от перегрева другие светофильтры, препарат и оптику флуоресцентного микроскопа;
-"запирающие" светофильтры расположены между окуляром. Эти
светофильтры поглощают возбуждающее излучение и пропускают свет люминесценции от препарата к глазу наблюдателя.
Пример люминесцентного микроскопа
