У эукариот свой набор днк полимераз

Эукариоты отличаются от прокариот и по набору ДНК полимераз. Клетки млекопитающих содержат четыре различных ДНКполимеразы, а дрожжевые клетки, по крайней мере, пять –и .  Краткая характеристика свойств каждого фермента выглядит следующим образом:

 - Характеризуется праймазной активностью, высокочувствительна к афидиколину –ингибитору полимеразной активности. Функционирует на отстающей цепи..

 - имеет низкую процессивность. Участвует в процессе репарации ДНК. В отличие от  обладает низкой чувствительностью к афидиколину.

 - митохондриальная ДНКполимераза. Характеризуется низкой чувствительностью к афидиколину.

 - основная полимераза лидирующей цепи. Обладает высокой процессивностью, которая поддерживается специальным белком, называемым антигеном ядер пролиферирующих клеток (PCNA) подобна холоферменту ДНКполимеразы III E. coli.

 - функция этой полимеразы еще не полностью изучена.

Таблица суммирует некоторые известные свойства и расположение в клетке этих ферментов.

.Свойства ДНК-полимераз
					
Место в клетке	Ядро	Ядро	Митохондрия	Ядро	Ядро
Ассоциированная праймаза	Да	Нет	Нет	Нет	Нет
Биологическая функция	Репликация отстающей цепи	Репарация ДНК	Репликация ДНК митохондрий	Репликация лидирующей цепи	Репликация
Число субъединиц	4	1	4	2	?
ММ кД	160-185	40	125	125	210-230
Км мкМ	2-5	10	0.5	2-4	?
Процессивность	Умерен.	Низкая	Высокая	Низкая	Высокая
Активность в присутствии PCNA	Умерен.	Низкая	Высокая	Высокая	Высокая
3 экзонуклеаза	Нет	Нет	Да	Да	Да
Чувствительность к 2-3 дд- НДФ	Низкая	Высокая	Высокая	Низкая	Умерен.
Чувствительность к арабинозил-ЦТФ	Высокая	Низкая	Низкая	Высокая	?
Чувствительность к афидиколину	Высокая	Низкая	Низкая	Высокая	Высокая

Как и у прокариот, репликационная вилка имеет Y-образную асимметричную струк

Механизм синтеза рнк во многом напоминает синтез днк

Об участии в синтезе белков РНК известно с 40-х годов ХХ столетия, но роль и-РНК как молекулы посредника стала известна в 1961 году благодаря работам французских биохимиков Ф.Жакоба и Ж. Моно. В начале 60-х открывается и фермент, катализирующий синтез РНК – РНК-полимераза. В целом, механизм синтеза РНК по многим свойствам напоминает синтез ДНК. Для работы РНК-полимеразы необходимы:

1. Матрица. Роль матрицы, как правило, выполняет двуцепочечная ДНК.

2. Субстраты. Необходимы все четыре рибонуклеозид трифосфата АТФ, ГТФ, ЦТФ и УТФ.

3. Ионы двухвалентных металлов. Обычно это ионы Mg²⁺.

Схема синтеза РНК может выглядеть следующим образом:

аАТФ+bГТФ+cЦТФ+dУТФ  РНК + (a+b+c+d) пирофосфат.

Синтез молекулы РНК идет в направлении 5’ 3’ с перемещением фермента по матрице в направлении 3’ 5’. Механизм соединения нуклеотидов под влиянием РНК-полимеразы подобен синтезу ДНК и заключается в нуклеофильной атаке внутреннего фосфата очередного рНТФ 3’-ОН группой на конце растущей цепи. Необратимость реакции связана с гидролизом пирофосфата, высвобождаемого в реакции синтеза РНК.

Однако существует и ряд особенностей в синтезе РНК. РНК-полимераза не нуждается в затравочном олигонуклеотиде (праймере), не обладает нуклеазной активностью, перемещается значительно медленнее по матрице (приблизительно 50-100 оснований/сек для РНК против около 1000 осн/сек для ДНК). Точек инициации транскрипция намного больше чем у репликации. Число молекул РНКполимераз в клетке намного больше, чем ДНК-полимераз. Наконец, точность полимеризации РНК - намного ниже, чем ДНК. Это допустимо, так как дефектные молекулы РНК могут быть просто удалены и взамен синтезированы новые «правильные» молекулы.