- •Лабораторная работа № 1 цветные реакциии на белки и аминокислоты.
- •1. Биуретовая реакция
- •2. Нингидриновая реакция.
- •3. Ксантопротеиновая реакция (Мульдера).
- •4. Реакция Фоля.
- •5. Реакция на тирозин (Миллона).
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 2. Хроматографический метод определения аминокислот
- •Радиальная (распределительная) жидкостная хроматография
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 3 кислотный гидролиз и формоловое титрование по серенсену.
- •1. Кислотный гидролиз.
- •2. Формоловое титрование.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 4 физико-химические свойства белков.
- •1. Осаждение белков при кипячении.
- •2. Реакции осаждения белков при комнатной температуре нейтральными солями — высаливание.
- •3. Диализ белка.
- •4. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
- •5. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •6. Осаждение белков органическими кислотами.
- •7. Осаждение белков органическими растворителями.
- •8. Осаждение белков алкалоидными реактивами.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5. Строение сложных белков.
- •Н уклеопротеиды
- •1. Гидролиз нуклеопротеидов.
- •2. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопротеидов.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 6 ферменты.
- •1. Влияние реакции среды на активность амилазы.
- •2. Специфичность действия ферментов.
- •3. Влияние ингибиторов и активаторов на активность амилазы.
- •4. Активность α-амилазы слюны (количественное определение).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 7 витамины.
- •1. Качественная реакция на витамин в2.
- •2. Качественная реакция на витамин рр.
- •3. Качественная реакция на витамин в6.
- •4. Качественная реакция на витамин с.
- •5. Качественная реакция на викасол (жирорастворимые витамины).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 8 липиды.
- •1. Растворимость и эмульгирование жиров.
- •2. Гидролиз (омыление) жира.
- •3. Открытие в гидролизате составных частей жира.
- •4. Открытие ненасыщенности жирных кислот в жире.
- •5. Получение нерастворимых солей высших жирных кислот.
- •6. Гидролиз лецитина (фосфатидилхолина).
- •7. Качественная реакция на холестерин (реакция Шиффа).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 9 углеводы.
- •1. Доказательство наличия гидроксильных групп
- •2. Доказательство наличия карбонильных групп (альдегидная проба Мура).
- •3. Реакции восстановления металлов и окисления моносахаридов.
- •3А. Проба Троммера.
- •3Б. Проба Фелинга.
- •3В. Получение серебряного зеркала.
- •3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.
- •3Д. Проба Барфеда.
- •4. Качественные реакции на дисахариды
- •4А. Реакции на сахарозу.
- •4Б. Реакция на мальтозу и лактозу
- •5. Цветные реакции на крахмал и гликоген.
- •6. Гидролиз крахмала.
- •7. Гидролиз клетчатки.
5. Цветные реакции на крахмал и гликоген.
Реактивы: крахмал и гликоген, 0,1%-ные растворы; реактив Люголя; NаОН, 10%-ный раствор.
Ход работы: В две пробирки наливают по 2-3 мл 0,1% раствора крахмала и гликогена; добавляют 1-2 капли раствора Люголя. Перемешивают. Содержимое пробирок приобретает синий цвет в случае с крахмалом и красно-бурый цвет в случае гликогена. Окрашивание нестойкое и исчезает при нагревании, но появляется опять при охлаждении. Обесцвечивание происходит также при добавлении гидроксида натрия или калия. Можно проверить, разделив содержимое пробирок пополам. Исчезновение окраски при нагревании и добавлении щелочи обусловлено тем, что в образовании комплексов принимает участие молекулярный иод, а не иодит-ионы.
6. Гидролиз крахмала.
Принцип метода. При нагревании раствора крахмала с минеральными кислотами происходит гидролиз крахмала с образованием глюкозы, которую можно обнаружить характерными реакциями на моносахариды, в частности реакцией Троммера.
Реактивы: крахмал, 1%-ный раствор; HCl (конц.); NаОН, 10%-ный раствор; СuS04,1%-ньй раствор.
Ход работы: В две пробирки помещают по 5 мл раствора крахмала. В одну из них вносят также 2-3 капли концентрированной соляной кислоты и кипятят на водяной бане 15 минут. Вторая пробирка служит контролем, затем в обе пробирки приливают по 2 мл 10% раствора гидроксида натрия, и по 5 капель раствора сульфата меди и нагревают (проделывают реакцию Троммера). В пробирке, где проводился гидролиз крахмала соляной кислотой, при нагревании наблюдают образование красного осадка гемиоксида меди (реакция Троммера положительная), а в контрольной пробирке такой осадок не образуется (реакция Троммера отрицательная).
7. Гидролиз клетчатки.
Принцип метода. Гидролиз клетчатки минеральными кислотами происходит значительно медленнее, чем крахмала. Если же клетчатку предварительно обработать 80 % раствором серной кислоты, то процесс гидролиза клетчатки значительно ускоряется.
Реактивы: вата (источник клетчатки); Н2SO4, 3%-ный и 80%-ный растворы; реактив Фелинга и Барфеда.
Ход работы: Небольшое количество ваты (100-200 мг) помещают в пробирку, заливают 3% раствором серной кислоты и кипятят на водяной бане 10 минут. После нейтрализации содержимое пробирок разделяют на две части. В другой пробирке то же количество ваты предварительно обрабатывают небольшим количеством (примерно 0,5 мл) 80% раствора серной кислоты до полного растворения, затем разбавляют водой до объема 1 мл и кипятят на водяной бане в течение 5 минут. После нейтрализации содержимое пробирки делят также на две части.
С одной частью смесей, содержащих обработанную и необработанную вату, проводят реакцию Фелинга (добавляют по 1 мл раствора Фелинга и после перемешивания нагревают до кипения), а с другой частью этих смесей — реакцию Барфеда (добавляют по 1 мл раствора Барфеда и после перемешивания нагревают до кипения).
В пробирках, где находилась необработанная серной кислотой вата, наблюдается отсутствие осадка красного цвета (отрицательные реакции Фелинга и Барфеда).
В пробирках, содержащих предварительно обработанную вату, возникает красный осадок гемиоксида меди (положительные реакции Фелинга и Барфеда), что свидетельствует об образовании глюкозы.