2. Качественная реакция на витамин рр.

Витамин РР является производным пиридинового ядра. Антипеллагрической активностью, помимо никотиновой кислоты, обладает и ее амид:

В организме человека и животных витамин РР находится в основном в связанном с белками состоянии. Из витамина РР образуется два кофермента: никотинамидадениндинуклеотид — НАД+ и никотинамидадениндинуклеотидфосфат — НАДФ+. Эти коферменты входят в состав ферментов дегидрогеназ и участвуют во многих окислительно — восстановительных реакциях. НАД+ и НАДФ+ присоединяют к себе протоны и электроны от окисляемых субстратов; при этом в их молекулах восстанавливается остаток ниацина. Отсутствие витамина РР в пище вызывает пеллагру.

Принцип метода. Витамин РР при нагревании с раствором ацетата меди образует синий осадок медной соли никотиновой кислоты плохо растворимый.

Реактивы: ацетат меди, 5% раствор; витамин РР, 3% раствор в 10% растворе уксусной кислоты.

Ход работы: Перед определением 3% раствор витамина РР следует тщательно взболтать. Затем набирают в пробирку 20 капель его и нагревают до кипения, при этом мутный раствор становится прозрачным. Взболтав 5% раствор ацетата меди, приливают 20 капель его к нагретому раствору витамина РР. Затем содержимое пробирки доводят до кипения и сразу охлаждают ее под струей холодной воды, на дне пробирки выпадает синий осадок медной соли никотиновой кислоты.

3. Качественная реакция на витамин в6.

Группа витамина В₆: пиридоксол, пиридоксаль, пиридоксамин, являющиеся производными пиридина и носящие общее название пиридоксина, обладают активностью витамина В₆:

В организме каждое соединение может подвергнуться фосфорилированию при участии АТФ с образованием коферментов фосфопиридоксаля, фосфопиридоксамина. Эти коферменты входят в состав ферментов, участвующих в белковом обмене в реакциях трансаминирования, декарбоксилирования аминокислот, десульфирования, дегидратирования аминокислот, в образовании витамина РР из триптофана и в некоторых других реакциях. При недостатке витамина В₆ в питании у животных, прежде всего, нарушается обмен, белков; у человека недостаточность этого витамина встречается редко.

Принцип метода. Витамин В₆ при взаимодействии с раствором хлорного железа образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета.

Реактивы: хлорное железо, 1 % раствор; витамин В₆, 1 % раствор.

Ход работы: К 5 каплям 1% раствора витамина В₆ приливают равное количество 1% раствора хлорного железа и перемешивают. Развивается красное окрашивание.

4. Качественная реакция на витамин с.

Биологическая роль аскорбиновой кислоты в организме многообразна. Она принимает участие в окислительно-восстановительных процессах и связана с системой глютатиона. Аскорбиновая кислота участвует в синтезе стероидных гормонов в коре надпочечников и катехоламинов в мозговом слое надпочечников и необходима для процесса гидроксилирования как кофактор для проявления ферментов гидроксилаз. Она участвует в образовании тетрагидрофолиевой кислоты из фолиевой кислоты, в гидроксилировании лизина в оксилизин, пролина в оксипролин, необходимых для образования коллагеновых волокон; ускоряет всасывание железа, активирует фермент желудочного сока пепсиноген, что особенно важно при недостатке соляной кислоты в желудочном соке.

Характерной особенностью витамина С является его способность обратимо окисляться и восстанавливаться, благодаря чему он играет важную роль в процессах, протекающих в организме. При окислении аскорбиновой кислоты образуется дегидроаскорбиновая кислота.

Дегидроаскорбиновая кислота может при наличии подходящих условий вновь восстанавливаться в аскорбиновую кислоту. Если же таких условий нет, то она может окисляться дальше до щавелевой и треоновой кислот.

Принцип метода. Окисляясь, аскорбиновая кислота легко восстанавливает многие соединения: 2,6-дихлорфенолиннофенол, метиленовую синь, йод, хлорное железо, азотнокислое серебро. Первые три из названных соединений при восстановлении обесцвечиваются, а восстановление хлорного железа в хлористое можно легко обнаружить по реакции с железосинеродистым калием. Реакции аскорбиновой кислоты с 2,6-дихлорфенолиндофенолом и йодом лежат в основе методов количественного определения витамина С.

Реактивы: 2,6-дихлорфенолиндофенол, 0,01% раствор; метиленовая синь, 0,01% раствор; хлорное железо, 1% раствор; раствор Люголя; углекислый натрий, 10% раствор; азотнокислое серебро, 1% раствор; калий железосинеродистый, 2% раствор; аскорбиновая кислота, 0,05%.

Ход работы:

1) В пробирке смешивают по 2 капли раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола и аскорбиновой кислоты. Отмечают обесцвечивание 2,6-дихлорфенолимдофенола. Уравнение реакции представлено выше.

2) В пробирку вносят 2 капли раствора аскорбиновой кислоты и раствора Люголя. Отмечают обесцвечивание. Зная, что йод восстанавливается до йодистоводородной кислоты, записывают уравнение реакции.

3) В пробирке к 3 каплям раствора аскорбиновой кислоты добавляют 1 каплю раствора азотнокислого серебра. Выпадает темный осадок металлического серебра. В отличие от углеводов аскорбиновая кислота восстанавливает серебро без добавления щелочи. Записывают уравнение реакции.

4) В пробирке смешивают по 1-2 капли растворов аскорбиновой кислоты и хлорного железа. Добавляют в ту же пробирку 1 каплю раствора железосинеродистого калия и отмечают появление зеленовато-синей окраски. Записывают уравнение реакции: сначала восстановления хлорного железа в хлористое, а затем реакции взаимодействия хлористого железа с железосинеродистым калием. Образующиеся при том соединение синего цвета имеет состав Fe₃[Fe (CN)₆]₂.