Перечень практических работ:

1. Бактериологическая диагностика при стафило-, стрептококковой, синегнойной, шигеллезной инфекциях.

бакскопич-мазки, бактериологичич-посевы.

В 2этапа

1-выдел-е в чист культ

2-идентификация

1 день-мазок окраска по Грамму-тинкториальн и морфол св-ва.Посев на пит среду

2день-описание культ св-в(высота, величина ,цвет, пов-ть,прозр, края, консистенция),Приготовл мазка из чист колоний Накопление ч. культ на скош агаре

3день-описание хар-ра роста чист культ. Посев на пестр ряд

4день-учет биохим св-в и заключение

Это информативный метод, чувств, опред чувств к антибиот , но долго и дорого

Синегнойная палочка-при сепсисе беру материал из раны, при гангрене из раны, мазок по грамму –палочка , на среде накопленя-мясо-пептонном агаре, образуются колонии малоактивные , плохо ферментируют глюкозу, хорошо-белки, есть пигмент пиоцианин имеется запах земляничного мыла, облигатный аэроб, гемолизин-растворяет эритроциты, желатиназа, лецитиназа, экзотоксин А, патогенность обусловлена слизью капсулоподобного в-ва защищающего от фагоцитоза, чувствителен к антибиотикам. Шигеллы –на среду Плоскирева, гр- палочки, ферментирует манит, глюкозу и сахарозу-шигеллозоны, дифференцирует на роды. Стафилококки –бывают коагулазо+(St. aureus) и –(St. Hominis intermedius haemolyticus) . есть капсула, белок А-против фагоцитоза, лейкоцидин-уничтожает макрофагов, гемолизин- альфа и бета активность , энтеротоксин-вызывают, плазмокоагулаза-сгусток вокруг микроба, лецитиназа- расщепляют лецитин оболочки эритроцитов, гиалуронидаза-действует на соединительные ткани, фибринолизин- лизирует сгусток плазмы. Определяют видовую принадлежность, для ауреус –плазмокуагулазу, гемолизин, А-протеин.Стрептококки –гной, слизь из зева, моча- окраска по грамму, посев на кровяной агар, классифицруют по отутствию или наличию гемолиза, идентификация по Аг св-вам в р-и преципитации к серотипам A B D, при подозрении на сепсис посевы крови. Серологическое исследование для подтверждения ревматизма- определяют наличие ат к О-стрептолизину в РСК или преципитеции, а также С-реактивного белка.

2.Микроскопический метод диагностики при менингококковой, гонорейной инфекции, туберкулезе, при гнойно-воспалит заболеваниях (клебсиелла, синегнойная палочка, протей, кишечная палочка)

Менингит- спинно-мозовая жидкость или слизь из носоглотки при обследовании на бактерионосительство, кровь-сепсис, органы умерших от инфекции. Материал нужно как можно быстрее на исследование т.к. менингококки лабильны. Спинно-мозг жидкость –2 мазка из жидкисти со дна при стоянии, 1-метилен синим-2 по грамму. По грамму не красится,метилен. синим-гр-диплококки, неподвижны , не имеет спор, не образует капсул. Гонорея-отделяемое уретры, метиленоаой синью и по грамму.гр- диплококки внутри лейкоцитов. Туберкулез-1)микроскопия-DS не ставится на его основании и даже при обнаружении в материале нужен рентген, только в случае открытой формы обнаружат . Делают микроскопию, но при количестве в 1мл 10 в 5 степени не обнаружится этим методом. Использую р-ю гомогенизации т.е. с помощью 1% едкого натра. Р-ю флотации после гомогензации прогревают 30 мин температура-55, добавляют дистиллированную воду, встяхивают, отстаивают и исследуют всплывший материал красят по цилю-нильсену. 2)бактериологический-на среде Ленштейна-Енсена рост от 3 нед до 3 мес. Колонии сухие, морщинистые, изучают биохим св-ва. 3) биологический метод-заражают материалом морских свинок т.к. они восприимчивы к 1 туб. палочке.4) иммуноферментный анализ. 5) генетические методы-ЦПД и ДНК-зондирование. Гнойно-воспалит. –красятпо грамму.