1. Энтеробактерия Семейство Enterobacteriaceae. Более 30 Родов для человека более патогенные: Salmonella, Escherichia, Shigella, Proteus, Klebsiella…. Бактерии этого семейства являются наиболее частыми возбудителями кишечных инфекций. Их объединяет ряд общих признаков. Это короткие, не образующие спор, палочки с закругленными концами, подвижные (перитрихи) или неподвижные, некоторые имеют капсулы. Спор не образуют. Аэробы или факультативные анаэробы. Окрашиваются анилиновыми красками грамотрицательны. Хорошо растут на обычных питательных средах с мясном экстрактом. На большинстве плотных сред энтеробактерии образуют круглые выпуклые блестящие S- (гладкие) колонии, а также часто обусловленные потерей капсулы плоские, неровные и зернистые R- (шероховатые) формы. Для них характерна ферментация глюкозы (и других углеводов) с образованием кислоты и газа. По отношению к лактозе их делят на лактоза- ферментирующие и лактоза - неферментирующие. Каталаза - положительны, восстанавливают нитраты в нитриты. Множество представителей семейства являются частью нормальной микробиоты кишечника и могут быть найдены в кишечнике человека и других животных, тогда как остальные обитают в почве, воде или паразитируют на различных растениях и животных. Антигенная структура:

О- соматический антиген представлен липополисахаридами (ЛПС) наружной мембраны. Штаммы, лишенные О- антигена, образуют R- колонии и обычно авирулентны.

Н- жгутиковый антиген - термолабильные белки, имеются только у подвижных (имеющих жгутики) видов. состоит из белка флагелина

К- антиген - термостабильные полисахариды капсулы и наружной оболочки.

Все эти антигены позволяют дифферент. Роды и виды, выделить серогруппу и серовар. Антигенное строение в реак. Агглютинации. Непрямой гемааглютинации, преципитации при иммуноэлектрофорезе.

Патогенность: патогенное действие связанно с белками наружной мембраны, капсульным полисахаридом, пилями и разными токсинами. Вирулентность определяется их адгезивной способностью. Токсичность обусловлена эндо и экзотоксином. Имеются патогенные и условно патогенные и сапрофитические виды.

Экология: средой обитания явл. кишечный тракт позвоноч. Животных и человека. Род клибсиела не обнаруж в кишечнике. В организме чела содержатся в составе микробных биоценозов тонкой и толстой кишки. Патогенные виды у больных и носителей. С испражнениями попадают в окруж. Среду в ней могут сохраняться в зависимости от вида и условий.

2. Эшерихии. 

Род Escherichia назван в честь врача Эшериха, который первым выделил эти микробы при диурее у детей. Затем Грам- палочки Эшерих выделил из фекальных масс не только больных, но и здоровых людей, поэтому этот микроб назвали Bacterium coli Соmmиnае, а затем в честь Эшериха - Escherichia coli.

Виды рода:

1) Esch. coli (представитель нормальной микрофлоры кишечника человека и животных) иногда вызывает заболевание.

2) esch. blattae - выделен у животных.

Роль эшерих в нормальной физиологии человека:

1) esch. coli участвуют в пищеварении, так как они имеют очень высокую ферментативную активность;

2) esch. coil являются продуцентами витаминов группы B, К, Е;

3) esch. coli выполняют антагонистическую функцию по отношению к патогенным МиО, выделяют особые вещества – колицины;

4) esch. coli выполняют АГ-функции.

Биологические свойства видов Esch. coli:

? морфология: палочки, мелкие перетирихи, имеют pili common для адгезии и sex для конъюгации. Спор и капсул нет. Грам-.

? культуральпые свойства: Esch. coli не требовательны к питательным средам, так как они очень биохимически активны, факультативные анаэробы. ДДС - среды, содержащие лактозу, Esch. coli ферментируют лактозу среди многих enterobacterea, которые ее не ферментируют. Лактозу содержат среды - Эндо, Левена, Плоскирева. Состав этих ДДС: МПА - основа, лактоза - субстрат. Красители - индикаторы, которые определяют ферментацию лактозы. На среде Эндо Esch. coli ферментируют лактозу. Это изменяет цвет индикатора - фуксина, поэтому колонии Esch. coli будут малинового цвета с металлическим блеском. Колонии других enterobacterea будут бесцветными, так как они не ферментируют лактозу. Колонии Esch. coli S-формы, но возможна диссоциация в R-формы.

? ферментативные свойства: Esch. coli имеет очень высокую ферментативную активность - расщепляет углеводы до кислоты и газа. Это проверяют на ДДС - Гисса. Esch. coli восстанавливает нитраты в нитриты, H2S не выделяет - образует эндол.

? АГ-свойства: детально изучены Кауфманом, Книпшильдом и Вэлном. АГ esch. coli определяют при помощи специфических сывороток. На этом построена современная классификация эшерих.

 

АГ Esch. coli:

1) 0-АГ - соматический, глюцидо-липидо-протеиновый комплекс. По свойствам имеет групповую специфичность. Термостабилен. По 0-АГ выделяют более 170 серогрупп E.coli;

2) К-АГ - поверхностныи, состоит из фракций L-B, A. Этот АГ термолабилен. Он препятствует агглютинации 0-АГ, поэтому К-АГ (или В-АГ) определяют в реакции агглютинации с живой культурой при помощи К-АТ. Известно более 100 разновидностей К-АГ. 0-АГ следовательно определяют в гретой или кипяченой культуре (К-АГ разрушен);

3) Н-АГ - белковый, жгутиковый, термрлабилен. Выделяют 534М;

4) Vi-АГ - определяет вирулентность;

5) Nil-АГ- в ресничках;

6) АГ-Кунина общий с АГ эритроцитов.

По сочетанию АГ: 0-К-Н или 0-В-Н или, чаще всего, О-В выделяют серовары E.coli (особенно для патогенных E. coli); их обозначают по номерам O и B антигенов. Пример: E.coli 055Вз, E.coli 086В4, E.coli O177B6, - серологические варианты.

 

Роль E.coli в патологии человека: выделяют патогенные варианты внутри вида.

Варианты внутри вида E.coli разделяются на группы:

1) Энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП) - вызывают заболевание coli-энтеротиты, чаще всего у новорожденных;

2) Энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП) - вызывают холероподобные заболевания. Выделяют экзотоксин;  

3) Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП) - вызывают дизентериеподобные заболевания.

4)энтерогемморагич экзотоксин повр эпителий, теряет натр, воду, некроэ, кровотечения

Факторы патогенности:

1) Адгезины - common pili;

2) Факторы инвазий - их роль выполняют ферменты гиалуронидаза, фибринолизин;

3) Колонизация тонкого кишечника;

4) Выделение токсинов:

? все E. coli при разрушении образуют эндотоксин

? некоторые варианты Е-соli, которые имеют особые гены tox-плазмиды, выделяют экзотоксины. Экзотоксины имеют гемолитическое, нейтраминидозное, цитотоксическое (разрушение энтероцитов) действия. Кроме того - энтсротоксическое действие проявляется так:  Активируется аденнлатциклаза ? Повышается количество цАМФ  ? Нарушается водно-солевой обмен ? Развивается диурея   

Патогенез соli-инфекции или эшерихиозов.

Источник инфекции - больной, бактерионоситель.

Механизм заражения:

а) экзогенный - фекально-оральный;

b) эндогенный - активация микрофлоры, особенно на фоне иммунодефицита, чаще всего болеют новорожденные. Они заражаются ЭПКП. Бактерии поражают кишечник, могут вызывать тяжелую интоксикацию, иногда бактериемию, у новорожденных coli cencik.

Иммунитет - гуморальный. Образуются AT – Ig М, Ig A (секреторные) в кишечнике и в материнском молоке. Ig G - антитоксические. Иммунитет типоспецифичный, поэтому защищает от определенных сероваров. Не продолжительный. С особенностями иммунитета связано то, что дети до 1-го года чаще болеют при заражении ЭПКП, так как:

1) Ig М не проходит через плаценту, дети меньше болеют ЭТКП потому, что Ig G проходит через плаценту;

2) Важная защита детей - IgA (секреторные AT) и бифидум (фактор, стимулирующий молочнокислые бактерии-антагонисты). Находятся в материнском молоке, поэтому они защищают детей, которые находятся на естественном питании.

Лечение: антибиотиками после определения чувствительности. Это тетрациклины, кроме этого применяют эубиотики - препараты из бактерий-антагонистов (лактобактерин, бифидумбактерин, coli бактерии, бификол).

Cпецифическая профилактика - вакцины нет из-за очень большого количества сероваров.

 

Микробиологическая диагностика.  

1) Микроскопия - невозможна, так как все энтеробактерии одинаковые;

2) Бактериологическая диагностика - метод основан на выделении чистой культуры и ее идентификации.

Этапы:

? взятие материала - фекальные массы;

? посев на ДДС - Эндо, Левена для получения колонии;

? подбор характерных малиновых колоний, оценка чистоты;

? пересев чистых колоний для накопления;

? изучение свойств и идентификация по морфологическим, культурным, ферментативным, тинкторнальным и АГ свойствам (определение 0-АГ в гретой культуре и К-АГ - в живой).

 

Доказательства, что капрокультура является E.coli:

? палочки, подвижные перетрихи;

? Грам-;

? колонии на Эндо – малиновые;

? ферментирует глюкозу, лактозу, манит, сахарозу до кислоты и газа (в среде Гисса);

? агглютинируется О111 сывороткой (гретая культура) и В4 сывороткой (живая культура).

 

Главные отличия патогенных Е. соli от непатогенных:

1. по наличию факторов патогенности;

2. по АГ O и C сочетаниям.

 

Понятие о coli-mumpe и coil-индексе.

Это показатели фекального загрязнения. КТ - это количество воды (наибольшее), в котором содержится 1 E.coli. В норме (по требованиям государственных стандартов ГОСТ) КТ=333 мл или 500 мл. E.coli является показателем для оценки воды по таким причинам:

1) постоянно находятся в кишечнике человека и выделяются в воду с фекальными массами;

2) количество E.coli соответствует количеству других бактерий;

3) E.coli относительно хорошо сохраняются в воде, но не размножаются;

4) E.coli удобно выделять и идентифицировать по таким признакам:

а) палочки Грам-, подвижные;

b) ферментирует лактозу, на среде Эндо образует колонии малинового цвета.

Для определения КТ используют метод мембранных фильтров. Для этого исследуемую воду пропускают через специальные фильтры из нитроцеллюлозы, на них задерживаются бактерии. Затем фильтры раскладывают на среде Эндо и инкубируют при температуре 37 ° С 24 часа. Если в воде были E.coli, то на фильтре вырастают колонии малинового цвета. По количеству колоний делают вывод о количестве E.coli и определяют КТ.

КИ - это количество E.coli в литре воды. КИ=1000мл/КТ.

3.

4.Сальмонелы - возбудители острых пищевых токсикоинфекций.

 Сем Enterobacteriaceae,. Тип Proteobacteria), царство бактерии.

Виды рода Salmonella: S. enteritidis, S.typhy myrum, S. choleria suis и многие другие виды, которые часто имеют географические названия: S. London, S. Moskva и др. Грамотрицательны; факультативные анаэробы; большинство подвижно (благодаря перитрихиально расположенным жгутикам). На плотных питательных средах образуют круглые колонии серовато-белого цвета, при росте на бульоне — помутнение и осадок. При отсутствии гравитации сальмонеллы объединяются в тонкую плёнку[1]. Сальмонеллы сбраживают углеводы (глюкозу, маннозу, ксилозу, декстрин) и спирты (инозит, дульцит) с образованием кислоты, а иногда и газа.

Эти виды имеют типичные признаки рода Sal., но отличаются такими особенностями:

1) лактозу не ферм, (глюкозу, манит) ферм до кисл и газа;

2) АГ структуру, как и все Sal. - различаются по 0-АГ на группы, по H-АГ - на виды и серовары;

3) Sal. - возбудители токсикоинфекций или гастроэнтеритов имеют очень термостабильный, сильный эндотоксин;

4) Эти Sal. в природе являются обитателями кишечника многих животных, рыб, птиц. Они могут болеть или быть только носителями. При употреблении мяса животных в пищу происходит заражение человека. Такие заболевания называются сальмонелезы;

5) Заражение чаще всего происходит алиментарным путем при употреблении недостаточно термически обработанных продуктов, в которых содержится термостабильный эндотоксин;

6) Течение салмонелезов - острое. Заболевание протекает несколько дней и характеризуется поражением кишечника, повышением температуры (что связано с пирогенным действием эндотоксина), интоксикацией, расстройством кишечника (рвота, понос, диурея);

7) Для микробиологической диагностики можно использовать биологическую пробу на мышах, так как возбудители салмонелезов полипатогенны, в отличие от моно патогенных S.typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi В.

В микробиологической диагностике главный метод - бактериологический. Материал - пищевые продукты или выделения от больного (фекальные или рвотные массы). Выделение чистой культуры проводят путем посева на плотные ДДС - Эндо, Левена, Плоскирева. Колонии бесцветные, лактоза (-). Пересевают на МПА и проводят идентификацию по:

а) морфологическим;  

б) культурным;

в) ферментативным (образование кислоты и газа);

г) АГ-свойствам - проводят реакцию агглютинации на стекле с наборами монорецепторных сывороток в два этапа: I этап: при помощи 0-сыворотк ставим реакцию агглютинации и по таблице Кауфмана определяем группу (А, В, С,...). II этап: ставим реакцию агглютинации с Н-сыворотками для данной группы и по таблице определяем вид и серовар.

д) для подтверждения диагноза проводят биологическую пробу на белых мышах.

8) Специфическая профилактика - вакцины нет, потому что возбудителями могут быть более двух тысяч видов и вариантов;

9) Для лечения используют антибиотики тетрациклинового ряда.

5.Сальмонелы.

6.Шигеллы. Shigella dysenteriae. Сем Enterobacteriaceae

Род Shigella назван в честь японского ученого Шига, который в 1898 году открыл и изучил возбудителей дизентерии (от слов

enteron - кишечник и dys - нарушение).

Виды рода Shigella: Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydii, Shigella sonnei. Названия видов связаны с фамилиями авторо

в, которые открывали и изучали шигеллы (Sh). В плане эволюции шигеллы являются самыми молодыми среди энтеробактери

й. Они вызывают заболевания только у человека - дизентерию. Дизентерия - это острое или хроническое заболевание, вызыв

аемое шигеллами и характеризующееся поражением слизистой оболочки толстого кишечника и общей интоксикацией.

Общие признаки рода шигеллы:

1) Палочки, мало подвижные;

2) Грам-;

3) Не используют цитрат, как источник углерода;

4) Углеводы ферментируют до кислоты;

5) Лактозу не ферментируют;

6) Не образуют H2S;

7) Имеют внутриклеточную локализацию в энтероцитах толстого кишечника.

 

Биологические свойства видов шигелла:

- палочки, не имеют спор и капсул, не имеют жгутиков, имеют рili

Могут образовывать L-формы под действием антибиотиков.

культуральпые свойства - факультативные анаэробы, не требовательны к питательным средам, колонии на ДДС, бесцветные

. Лактозу не ферментируют, за исключением sh. sonnei, которая ферментирует лактозу медленно (через 48 часов - колонии стан

овятся малинового цвета). Колонии имеют S-формы, но возможна диссоциация в R-формы, которые более вирулентные (у sh.

sonnei).

ферментативные свойства - изучают при посеве на ДДС - Гисса или Рексела.

 по ферментативным свойствам можно выделить 3 группы:

1) Sh. dysenteriae - ферментируют только глюкозу, но при минимальной биохимической активности, являются наиболее патоге

нными;

2) Sh. flexneri, Sh. boydii - ферментируют глюкозу и манит, между собой по биохимическим свойствам не отличаются, менее пат

огенны;

3) Sh. sonnei - наиболее активны (ферментируют лактозу, но медленно), патогенны меньше всех других шигелл.

Таким образом, утрата биохимической активности приводит к увеличению патогенности - путем выделения экзотоксина и вн

утриклеточного паразитизма.

  АГ-свойства:

а) Есть термостабильный 0-АГ, соматический - комплекс белков, углеводов, липидов;

b) К-АГ - поверхностный, термолабильный.

По сочетанию 0-АГ и К-АГ выделяют группы А, В, С, D, внутри которых серовары.

 

Вывод: АГ-свойства используются главным образом для серологической идентификации. Это положено в основу международ

ной классификации шигелл.

 факторы патогенности шигелл:

а) Эндотоксин - действие комплексное на ЦНС, слизистую оболочку толстого кишечника - вызывает отек, нарушение проводи

мости капилляров;

b) Экзотоксин - по своему действию являются нейротоксинами и цитотоксинами - вызывают нарушения сердечно-сосудисто

й системы, аллергические реакции, влияют на ЦНС, являются белковым веществом. Наиболее сильный у Sh. Дизентерия;

с) Токсические амины;

d) Серотонин, вазопресин, брадикалин - биологически активные вещества;

е) Для адгезии на клетках common pili;

f) В роли факторов патогенности рассматривают способность шигелл к внутриклеточной локализации;

g) Ферменты патогенности - нейроминидаза, гиалуронидаза способствуют инвазии в энтероцитах, разрушают гликокалекс сл

изистых оболочек.

 Патогенез дизентерии.

Источник инфекции  - больной, бактерионоситель.

Механизм заражения - фекально-оральный или алиментарный, большое значение имеет фактор мух (механические переносчи

ки шигелл). Инфицирующая доза шигелл зависит от вида (max для sh. sonnei и min для sh. dysenteriae). Шигеллы проходят через б

арьеры желудка (погибают от кислой рН), кишечник и попадают в толстый кишечник. Происходит инвазия в энтероциты, их с

енсибилизация, разрушение. В таких местах образуются эрозии или язвы кишечника. При разрушении шигелл выделяется эндо

токсин.

Иммунитет - непродолжительный, не напряженный, гуморальный и клеточный, развиваются аллергические реакции по типу

ГЗТ. Возможно повторное заражение и заболевание, вызванное другими видами и вариантами шигелл. В слизистой кишечни

ка большое значение имеет образование секреторных IgA.

Лечение - антибиотиками после определения чувствительности (у шигелл есть R-плазмиды), используют тетрациклины, лево

мицитин, препараты из микробов-антагонистов (бификол., бифидум бактерии).

Специфическая профилактика - вакцины нет из-за большого количества сероваров и слабого нестойкого иммунитета.

Используют многие методы:

1) Бактериологический (выделение капрокультуры);

2) Серологическая диагностика - после перенесения заболевания, для определения AT у бактерионосителей;

3) Аллергическая диагностика - постановка кожных проб с аллергенами - дизентеринами;

4) определение увеличения титра (БФ) к шигеллам;

5) Экспресс-диагностика выявления АГ шигелл при помощи РИФ.

 

Бактериологическая диагностика дизентерии (выделение и идентификация копрокультур).

Этапы   Задачи этапов

1) Взятие материала - фекальные массы (стерильным тампоном). Обращают внимание на наличие в фекальных массах комочк

ов слизи, гноя, крови;       1) Сохранить возбудителя - для этого надо немедленно делать посев, так как шигеллы могут погибну

ть под действием микроба-антагониста;

 

2) Посев фекальных масс на ДДС Эндо, Левена     2) Получение изолированной колонии;

 

3) Изучение колонии;    3) Оценка чистоты колонии и их характеристика;

 

4) Пересев чистой колонии на среды Рессела:

     4) Провести накопление чистой культуры  и биохимическую идентификацию:

 

 

        

Посев на среду Рассела проводим уколом и по скошенной поверхности - для накопления чистой культуры. Учет проводим по

изменению цвета индикатора. Если ферментируется глюкоза, то изменяется цвет на дне пробирки, если ферментируется лакто

за, то индикатор изменяет свой цвет по всей пробирке через 48 часов. Если ферментируется манит - индикатор изменяется во

11-ой пробирке на дне. Сахарозу шигелла практически не ферментирует. Таким образом, среды Рессела заменяют среду Гисса

и скошенный МПА.

Окончательную идентификацию проводим после постановки реакции агглютинации с групповыми, видовыми и вариантным

и сыворотками к шигеллам.

 

Задача: определить вид и серовар шигеллы.

Для этого проводят реакцию агглютинации на стекле с адсорбированными моноспецифичными сыворотками к шигеллам.

Доказать, что капрокультура, выделенная у больного с подозрением на дизентерию, является Shigella flexneri:

1) Палочки, неподвижные, Грам-;

2) Колонии на средах Эндо или Плоскирева бесцветные;

3) Ферментируют на средах Рессела глюкозу и манит до кислоты;

4) Агглютинируются сывороткой групп B к Shigella flexneri.

 

7. Вибрионы. холерные вибрионы, которые были названы классическими. В 1906 году Готшлих выделил на карантинной станции Эль-Тор

вибрион, который был назван эль-тор (последняя пандемия холеры связана с ним).

 Семейство - Vibrionaceae.

Род - Vibrio (более 200 представителей патогенных, условно патогенных и непатогенных).

Виды рода: V. cholerae (биовары V.ch.classica и V.ch.eltor; с 1984 года считают, что эти биовары принадлежат к одному виду),  

- палочки, очень тонкие, слегка изогнутые (поэтому названы вибрионами и отсюда название всего семейства). И

меет pili - sex и common. Располагаются скоплениями, как станки рыб. Может быть полиморфизм. Образуют L-Формы. Главны

й отличительный признак по морфологии - один жгутик - монотрих. V.cholerae быстро двигается - в 5-10 раз быстрее, чем воз

будитель брюшного тифа. Грам-.

? культуральные свойства - холерные вибрионы не требовательны к питательным средам. Их колонии округлые, гладкие, S-фо

рмы, но возможна диссоциация в R-формы, при которой происходят глубокие изменения АГ структуры, но сохраняется патог

еннесть. Холерные вибрионы - анаэробы, поэтому на жидких средах при росте образуют пленку на поверхности среды. Отли

чия холерных вибрионов по культурным свойствам:

1) Рост возможен при температуре от 18°C до 42°C;

2) Щелочелюбивые и растут на средах при рН 7,6-9,2, по-этому ДДС имеет щелочное рН;

3) На 1% щелочной пептоновой воде рост происходит очень быстро, пленка образуется через 4-6 часов, на плотных средах ко

лонии вырастают через 10-16 часов;

 

? ферментативные свойства - холерные вибрионы имеют высокую сахаролитическую активность (ферментируют глюкозу, ман

ит, лактозу, сахарозу, крахмал) и протолитическую активность (разжижают желатин, восстанавливают нитраты в нитриты). Х

иберг создал классификацию вибрионов по ферментативным свойствам, где выделил 8 групп, к 1-ой группе относятся

V.ch.classica и V.ch.eltor. Они характеризуются:

 

С

Сахароза

(+)     А

арабиноза

(+)     М

манит

(+)

? АГ свойства:

1) 0-АГ - соматический, термостабильный, видоспецифический, типоспецифический. По 0-АГ вибрионы разделяются на 0 гр

уппы (более 60). Горднер и Венотерамен создали классификацию вибрионов по АГ строению. Холерный вибрион и v.L-Тоr о

тнесли к 0-1 группе, они агглютинируются 0-I сывороткой. Другие вибрионы называют неагглютинирующиеся или НАГи. В

0-АГ различают более 30 фракций: А, В, С, D... Важными являются А, В, С. По сочетанию компонентов А, В, С выделяют сер

овары: АВ-серовар Огава, АС-серовар Инаба, АВС-серовар Гикошима.

2) Н-АГ - белковый, жгутиковый. Общий для рода vibrio различия вибрионов по АГ строению обязательно используют для СИ

.

устойчивость вибрионов во внешней среде невысокая, но при этом вибрионы долго сохраняются при низких температурах (

в реках подо льдом), а повышение температуры вызывает их гибель (60°C - через 5 минут, 100°C - в течение минуты). Дезинф

ицирующие растворы 3-5% уничтожают вибрионы за несколько минут. Холерный вибрион eltor более устойчив, чем холерны

й вибрион classica.

? холерные бактериофаги - впервые описаны в 1918 году Де Эреленем. Мукериджи выделил 4 группы холерных бактериофаго

в, их используют для дифференциации холерных вибрионов;

1) V.cholero-classica лизируется бактериофагом четвертого типа или бактериофагом C;

2) V.cholcro-eltor лизируется бактериофагом второго типа или бактериофагом L-Tor.

? факторы патогенности - главным фактором являются токсины, выделяют три основных типа токсинов холерного вибриона:

1) Эндотоксин - образуется при разрушении, термостабильный, липополисахаридный. Определяет видовую и типовую специ

фичность. Является летальным фактором для мышей и к.э.;

2) Экзотоксин - белковый, термолабильный. Выделяется из клетки и состоит из двух фракций:       

? Главная фракция - холлероген (иногда весь экзотоксин называют холлероген). Эта фракция активирует фермент аденилат-ци

клазу ? Она катализирует продукцию цАМФ ? цАМФ регулирует ионный обмен и секрецию воды и электролитов из клеток эп

ителия в просвет кишечника ? в результате усиленной продукции цАМФ происходит нарушение электролитного обмена и гип

ерсекреция воды ? в результате возникает диурея и обезвоживание организма

? Вторая фракция - цитоксин - выполняет функции связывания с ганглиозмами клеток. Токсин, который выделяется в среду, н

о является термостабильным - угнетает транспорт Na через эпителии кишечника;

? Другие факторы патогенности: нейраминидаза, лецетиноза, протеиназа, адгезины common pili.

 

Патогенез холеры.

Источник инфекции - больной человек, иногда может быть вибрионоситель.

Механизм заражения - фекально-оральный, большое значение имеет водный фактор, иногда механические переносчики - мух

и. Возможно заражение алиментарным путем: молоко, рыба. Инфицирующая доза, не смотря на высокую вирулентность, боль

шая lO8-1011, потому что холерный вибрион должен пройти через барьер кислого рН в желудке. Группой риска являются бол

ьные с пониженной кислотностью. После барьера желудка холерный вибрион попадает в кишечник и при благоприятном щел

очном рН интенсивно размножается в тонком кишечнике (благоприятные условия - высокое содержание пептидов и щелочно

е рН). При быстром размножении холерных вибрионов происходит выделение и действие холерных вибрионов на центральн

ую и нервную вегетативную систему, паренхиматозные органы, эпителий кишечника - в результате развивается отек и некроз

в кишечнике, нарушение секреции и всасывания, увеличение выделения воды и ионов К. Выделяют три стадии развития холе

ры:

1) Холерный энтерит;

2) Холерный гастроэнтерит;

3) Холерный альгид - понижение температуры тела, обезвоживание и интоксикация.

 

Высокая летальность.

 

Иммунитет - гуморальный, антибактериальный IgM и антитоксический IgG. Большое значение имеет иммунитет кишечника

IgA , так как он препятствует адгезии холерных вибрионов на эпителиоцитах. Иммунитет стойкий, напряженный, но холера -

заболевание острое, поэтому во время болезни большого значения иммунитет не имеет.

Специфическая профилактика - вакцины из убитых холерных вибрионов (инактивированные), есть химические вакцины из А

Г; разрабатывают вакцину из 0-АГ и анатоксина-холерогена, такая вакцина создаст иммунитет антибактериальный и антитокс

ический. Иногда используют бактериофаг холерный для профилактики.

Лечение: 1) антибиотиками - тетрациклины - этиотропное лечение, 2) введение солевых растворов (патогенетическое лечени

е) - против обезвоживания.

 

Микробиологическая диагностика.

Главной особенностью является то, что ее необходимо провести очень быстро (36 часов).

1) Бактериологический метод:

 

Этапы   Задачи этапов

1) Взятие материала – фекальные массы (при подозрении на холеру берут материал у группы больных до 10 человек)  1) Сохра

нить возбудителя

 

 

2) Посев материала на жидкие ДДС - щелочная 1% пептоновая вода; рост в виде пленки наблюдают 4-6 часов  2) Выделить из

материала

 

 

3) Микроскопия пленки:

а) Окраска по Граму

b) Микроскопия живых препаратов

        3) а) выявить Грам - вибрионы

b) выявить подвижность, движение в одном направлении

 

 

3) пересев материала из пленки на плотные, щелочные ДДС 4) получить изолированные колонии через 6-10 часов

5) а) микроскопия колоний

b) ориентировочная агглютинация 0-1

сывороткой      5) а) оценка чистоты;

b) ориентировочная идентификация

 

6) пересев на щелочные ДДС

        5) накопление выделенной чистой культуры

1) изучение свойств выделенной чистой культуры по морфологическим, тинкториальным, ферментативным, АГ свойствам; чу

вствительность к бактериофагам       6) определение вида или идентификация

2) экспресс-диагностика: РИФ, ИФА;

3) серологическая диагностика - постановка РНГА для определения AT.

 

Доказать, что выделенный из фекальных масс больного возбудитель является холерным вибрионом:

1) палочки, изогнутые - вибрионы;

2) подвижные;

3) Грам-;

4) Рост на щелочных средах (рН-8,9);

5) На жидкой среде пленка через 4-6 часов;

6) Ферментация с арабинозой(-), манитом(+) и сахарозой(+) (на средах Гисса или Рассела);

7) Агглютинация O-I сывороткой холерной

Для дифференциации v.ch.classica и v.ch.eltor используют дополнительные признаки:

8) Гемолиз эритроцитов барана eltor+;

9) Гемагтлютинация эритроцитов курицы eltor+;

10) Устойчивость к полимикцину eltor+;

11) Лизис специфическим бактериофагом: eltor - бактериофаг II, vibrio choleo classica - бактериофаг (IV) или (бактериофаг С)