3.3. Домики для ламп

Лампы высокого давления должны размещаться в прочных защитных домиках, снабженных отверстиями для охлаждения. Домики должны иметь приспособления для юстировки лампы

в двух направлениях и фокусировки коллекторной линзы. В до­миках для ламп часто есть держатели для установки погло­щающих тепло или красный свет фильтров или отражающих фильтров. Вместо теплопоглощающих фильтров лучше исполь­зовать отражающие тепло или инфракрасный свет зеркала, поскольку последние реже бьются. Эти фильтры всегда долж­ны располагаться ближе к лампе, чем цветные светофильтры, чтобы предотвратить интенсивное поглощение тепла последни­ми. Для того чтобы получить правильное освещение, при их установке совершенно необходимо следовать инструкциям из­готовителя.

3.4. Фильтры

Очень важной частью флуоресцентного микроскопа являются фильтры. Их необходимо тщательно подбирать для каждой задачи. Выбор фильтров основывается на спектральных харак­теристиках и величине Q используемых флуорохромов, а также зависит от применяемого источника света. Фильтры нужны для того, чтобы выделить определенную часть спектра возбуждения или испускания. Характер их действия виден по кривой про­пускания.

Выпускаются фильтры разных типов: окрашенные стекла, интерференционные фильтры с полосой пропускания (ВР), ин­терференционные фильтры, пропускающие свет, длина волны которого меньше, чем указанная на фильтре, или наоборот больше (соответственно SP или LP), а также СДЗ (рис. 6.5).

Окрашенные стекла пропускают в большей или меньшей сте­пени свет, соответствующий их собственному цвету, и поглощают дополнительные цвета. Интерференционные фильтры представляют собой стеклянные подложки, на которые нане­сены тонкие слои солей металлов. Фильтры обозначаются знач­ками/буквами и цифрами. Значки и буквы обозначают тип фильтра в соответствии с его функциями или характеристика­ми, а цифры относятся к длине волны; в случае ВР-фильтров цифры обозначают длину волны, соответствующую максимуму пропускания; в случаях LP- или SP-фильтров — длину волны, где их пропускание составляет 50% от максимального. Кроме того, для некоторых фильтров ВР-типа указывается ширина полосы пропускания (в нм). Кроме того, фильтры могут обо­значаться в соответствии со своим положением в микроскопе (со стороны возбуждения или испускания), так что используе­мая различными фирмами-изготовителями терминология весьма запутана.

3.4.1. Возбуждающие фильтры

Полосные фильтры пропускают свет только определенной части (полосы) спектра. В качестве полосных все еще используются стеклянные фильтры марки BG (синее стекло) и марки UG (ультрафиолетовое стекло). Они имеют относительно широкие полосы пропускания. Полосные интерференционные фильтры являются более избирательными. Недостатком этих фильтров в прошлом было их небольшое светопропускание (30— 60%). Теперь проблема решена: в настоящее время фильтры ВG-типа имеют пропускание до 90% и очень узкую полосу, которая может использоваться для селективного возбуждения флуорохромов (линейные фильтры). Соответственно фильтры ВР-типа в основном используются в качестве возбуждающих, особенно когда в качестве источника света применяются дуго­вые ртутные лампы. В зависимости от качества фильтры раз­личаются по цене.

Фильтры SP-типа пропускают более короткие длины волн и эффективно отсекают более длинные волны [18—20]. Эти свойства делают их пригодными для использования в качестве возбуждающих фильтров, особенно в комбинации с фильтрами LP-типа. В таком сочетании они предпочтительнее стеклянных фильтров (например, марки BG), хотя, как правило, не предо­твращают проникновения нежелательного возбуждающего све­та. Фильтры SP-типа, как и все интерференционные фильтры, стоят дорого, но по сравнению с более старыми типами интер­ференционных ВР-фильтров они имеют очень большое свето­пропускание.

Стеклянные фильтры, используемые для возбуждения, име­ют сравнительно широкую полосу пропускания и идентифици­руются по цвету, который они пропускают.