
- •Аннотация
- •Введение
- •Модуль 1. Цитология как наука работа № 1
- •1.1. Правила по технике безопасности
- •1.2. Правила оформления работ
- •1.3. Правила работы с микроскопом
- •1.4. Меры безопасности при работе с микроскопом
- •1.5. Устройство микроскопа
- •1.6. Настройка освещения микроскопа
- •1.6.1. С вынесенным осветителем
- •1.6.2. С встроенным в основание осветителем
- •1.7. Приготовление постоянных и временных препаратов
- •Работа № 2.
- •2.1. Важнейшие характеристики микроскопа
- •2.2. Разрешающая способность
- •2.3. Числовая апертура
- •2.4. Общее увеличение микроскопа
- •2.5. Глубина резкости изображения
- •Задание 1. Определение зависимости т и d от длины волны
- •Модуль 2. Клетка работа № 3
- •3.1. Общий план строения растительной и животной клеток
- •Задание 1. Эндоцитоз
- •Задание 2. Клетки плоского эпителия полости рта человека
- •Задание 3. Межклеточные соединения
- •Задание 4. Плазмодесмы в оболочках клеток запасающей ткани семени хурмы (Diospyros Kaki Thunb.)
- •Задание 5. Гранулярный эндоплазматический ретикулум
- •Задание 6. Аппарат Гольджи
- •Задание 7. Лизосомы
- •Задание 8. Пероксисомы
- •Задание 9. Строение клеток развивающихся листьев элодеи канадской (Elodea canadensis Michx.)
- •Задание 10. Клетки кожицы листа валлиснерии (Vallisneria spiralis l.)
- •Задание 11. Плазмолиз в клетках кожицы чешуи луковицы репчатого лука (Аlliит сера l.)
- •Задание 12. Строение клеток сформированного листа элодеи
- •Работа № 4.
- •Задание 1. Ультраструктурная организация митохондрий
- •Задание 2. Ультраструктурная организация хлоропласта.
- •Задание 3. Обнаружение ассимиляционного крахмала в клетках листа элодеи (Elodea canadensis Mich.)
- •Задание 4. Ультраструктурная организация хромопласта.
- •Задание 5. Хромопласты в клетках околоплодников зрелых плодов и корнеплодах моркови.
- •Задание 6. Ультраструктурная организация лейкопласта.
- •Задание 7. Лейкопласты в клетках кожици листа традесканции вирджинской (Tradescantia virginiana l.)
- •Задание 8. Микрофотография амилопласта.
- •Задание 9. Микрофотография гранулярного эндоплазматического ретикулума
- •Задание 9. Микрофотографии молодой растительной клетки
- •Работа № 5.
- •Задание 5. Митоз в клетках корешка лука
- •Задание 6. Митоз в животной клетке
- •Задание 7. Амитоз эпителиальных клеток
- •Модуль 3. Основы гистологии работа № 6
- •Задание 1. Клетки плоского эпителия полости рта человека
- •Задание 2. Клетки призматического эпителия почечных канальцев
- •Задание 3. Клетки мерцательного эпителия мантии беззубки
- •Задание 4. Многорядный однослойный эпителий
- •Задание 5. Многослойный эпителий
- •Задание 6. Переходный эпителий мочевого пузыря
- •Задание 7. Обкладочные клетки фундальных желез желудка
- •Задание 8. Рыхлая соединительная ткань крысы
- •Задание 9. Жировая ткань
- •Задание 11. Пигментные клетки кожи головастика
- •Меланофоры встречаются в эпидермисе и соединительной ткани кожи, в сосудистых оболочках и сетчатке глаза, а так же в некоторых внутренних органах человека и животных.
- •Задание 1. Гиалиновый хрящ ребра кролика.
- •Задание 2. Волокнистый хрящ межпозвоночного диска
- •Задание 3. Эластическая связка. Продольный разрез
- •Задание 4. Плотная коллагеновая соединительная ткань. Сухожилие, продольный разрез
- •Задание 5. Плотная коллагеновая соединительная ткань. Сухожилие, поперечный разрез
- •Задание 6. Костная ткань. Клетки жаберной крышки
- •Задание 7. Берцовая кость человека в поперечном разрезе.
- •Задание 8. Развитие кости из соединительной ткани. Нижняя челюсть зародыша свиньи.
- •Задание 9. Развитие кости на месте хряща. Трубчатая кость зародыша свиньи
- •Задание 10. Эритроциты лягушки
- •Задание 11. Мазок крови человека
- •Работа № 8
- •Задание 1. Поперечнополосатая мышечная ткань
- •Задание 2. Гладкая мышечная ткань
- •Задание 3. Сердечная мышечная ткань
- •Задание 4. Нервные клетки сетчатки лошади
- •Задание 5. Двигательные нейроны. Спинной мозг
- •Задание 6. Тигроид в двигательных нейронах
- •Задание 7. Синапсы на нейронах мозжечка
- •Задание 8. Миелиновые нервные волокна
- •Список литературы
- •Заключение
1.6.2. С встроенным в основание осветителем
Порядок настройки микроскопа со встроенным осветителем.
1. Устанавливают матовое стекло в откидную рамку конденсора.
2. Вводят в ход лучей объектив меньшего увеличения (10х и менее).
3. Вводят в ход лучей матовое стекло и откидную линзу конденсора.
4. Поднимают рукояткой кронштейн с конденсором до упора и полностью раскрывают апертурную диафрагму конденсора.
5. Устанавливают патрон с лампой в шарнир до упора.
6. Устанавливают лампу таким образом, чтобы ее нить располагалась горизонтально.
7. Подключают источник питания к сети и включают лампу.
8. Фокусируют микроскоп на резкое изображение препарата, установленного на предметном столике.
9. Перемещая патрон с лампой за рукоятку вдоль оси и разворачивая его вместе с шарниром в горизонтальной плоскости, добиваются наиболее яркого и равномерного освещения поля зрения микроскопа.
10. При работе с другим объективом повторяют настройку освещения.
11.ВНИМАНИЕ! При работе с объективами с увеличением более 10х откидная линза конденсора должна быть выведена из хода лучей.
1.7. Приготовление постоянных и временных препаратов
Постоянные препараты являются прекрасным демонстрационным материалом и могут храниться долгие годы. На тонких срезах толщиной 10-22 микрона можно наблюдать проникновение пыльцевых трубок, подсчитывать число хромосом, изучать митоз и мейоз, развитие зародыша и так далее.
Техника приготовления окрашенных микропрепаратов включает в себя несколько этапов. Объекты претерпевают сложную обработку.
1. Подготовка материала к фиксации.
2. Фиксирование материала водным или спиртовым фиксатором ( 24 часа и до 12 часов соответственно).
3. Промывка зафиксированного материала.
4. Полное обезвоживание промытого материала.
5. Пропитывание материала растворителями парафина (хлороформом, ксилолом или бензолом).
6. Пропитывание материала парафином до полного испарения хлороформа (или ксилола).
7. Заливка материала в парафин (материал, залитый в парафин можно хранить очень долго).
8. Изготовление блоков из материала, пропитанного парафином.
9.Получение срезов при помощи микротома.
10. Наклейка срезов на предметные стекла.
11. Просушивание препаратов при температуре 40 - 45о С, стекла со срезами можно хранить долго, оберегая их от пыли и высокой температуры.
12. Удаление парафина из срезов ксилолом.
13. Удаление ксилола из срезов спиртом.
14. Удаление спирта из срезов дистиллированной водой.
15. Окрашивание препаратов (иногда протравливание и окрашивание) и дифференцировка.
16. Обезвоживание окрашенных срезов 96%-ным и 100%-ным спиртами.
17. Замещение спирта в срезах на ксилол (одновременно происходит просветление срезов ксилолом).
18. Заключение срезов в канадский бальзам.
19 Просушивание и подчистка, этикетирование препаратов.
20. Изучение препаратов под микроскопом.
Также широко распространены в микроскопической технике давленые препараты, для изготовления которых не требуется сложной процедуры обезвоживания, заключения в промежуточную жидкость, в парафин и получения микротомных срезов. Давленые препараты применяют при изучении митоза, кариотипов и при работе с животными объектами.
Наиболее часто для приготовления давленых препаратов применяют различные фиксаторы. Зафиксированный материал промывают в 70 %-ном спирте. В нем можно сохранять материал в течение длительного времени, но лучше хранить в холодильнике. При изготовлении давленых препаратов исключительное значение имеют способы мацерации тканей. Обычно для этого используют 45 %-ную уксусную кислоту, 40-45 %-ную пропионовую кислоту, 1 н. соляную кислоту, энзимы.
Окрашивают препараты ацетокармином, реактивом Шиффа, нигрозином и др.