Микроскопические методы анализа в лаборатории
И.А.Новикова
Микроскопы
Микроскоп (от греч. mikros — малый, skopeo — смотрю) — это прибор, позволяющий получать увеличенное
изображение объектов и структур, недоступных глазу человека.
В медицинских и биологических исследованиях применяют методы световой и электронной микроскопии.
Световая и электронная микроскопия
Световые микроскопы могут увеличивать объект размером от 0,5 мкм с разрешением элементов объекта до 0,1 мкм более чем в 1 800 раз. Для освещения используют естественный свет или искусственные источники света.
Электронная микроскопия делает возможным исследование объектов, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового
микроскопа (менее 0,2 мкм) и применяется для изучения вирусов, бактериофагов, тонкого строения микроорганизмов и других субмикроскопических объектов и макромолекулярных структур. Обеспечивает увеличение объекта в 20 000 раз.
Виды микроскопических приборов
1.Биологические микроскопы (проходящего света)
2.Инвертированные биологические микроскопы (инвертированные микроскопы проходящего света)
3.Люминесцентные микроскопы
4.Поляризационные микроскопы проходящего света
5.Стереоскоптические микроскопы
6.Анализаторы изображения.
По степени сложности каждую группу микроскопов делят на учебные; рутинные; рабочие; лабораторные; исследовательские. 
Составные части микроскопа
Основные функциональные части:
механическая
оптическая
осветительная система
Механическая часть микроскопа:
Штатив (основание и тубусодержатель)
Предметный столик. Закреплен на специальном кронштейне. Предметные столики могут быть подвижными и неподвижными. Неподвижные столики применяют в самых простейших моделях микроскопов. При оснащении микроскопов подвижными столиками возможно механическое перемещение или управление от электродвигателя (сканирующий).
Схема устройства микроскопа
Оптическая часть микроскопа
Обеспечивает его основную функцию, создавая увеличенное изображение объекта.
Основные оптические элементы микроскопа -
объектив, окуляр, конденсор.
Вспомогательные оптические элементы –
осветительная система, дополнительные насадки. По количеству объективов микроскопы могут быть
монокулярные
бинокулярные
тринокулярные и т.д.
Если непосредственно под микроскопом требуется выполнение каких-либо работ, используются объективы с большим рабочим расстоянием (свободное расстояние между объективом и объектом).
Иммерсионные объективы
Необходимое требование – использование иммерсионной жидкости:
для повышения разрешающей способности микроскопа
в соответствии с технологией микроскопирования
для повышения видимости за счет увеличения разности показателя преломления среды и объекта
для увеличения глубины просматриваемого слоя, (зависит от показателя преломления среды).
Типы иммерсионных жидкостей:
масляная (МИ/Oil),
водная (ВИ/W)
глицериновая (ГИ/Glyc) (в основном применяют в ультрафиолетовой микроскопии).
Окуляры
Окуляр — обращенная к глазу часть оптического прибора, предназначенная для рассматривания с некоторым увеличением изображения, созданного объективом прибора. Служит для построения микроскопического изображения на сетчатке глаза наблюдателя. Играет роль лупы, дополнительно увеличивающей изображение, созданное объективом. В общем виде окуляры состоят из двух групп линз: глазной и полевой (ближайшей к плоскости изображения).
При необходимости микроскопических исследований, требующих проведения точных измерений, внутри окуляров располагают шкалы и сетки.
Осветительная система микроскопа
Осветительная система — это система линз, диафрагм и зеркал (при необходимости), обеспечивающая равномерное освещение объекта и полное заполнение апертуры объектива.
Включает:
источник света (естественный или искусственный);
коллектор — оптическая система, проецирующая нить лампы в плоскость апертурной диафрагмы конденсора. Вблизи коллектора расположена полевая диафрагма микроскопа.
конденсор — оптическая система, которая проецирует полевую диафрагму коллектора в плоскость предмета, предназначена для увеличения количества света, поступающего в микроскоп. 