Пигментный

обмен

И.А. Новикова

Пигментный обмен

Пигментный обмен – совокупность сложных превращений различных окрашенных веществ веществ в организме.

Гематогенные (гемохромогенные) пигменты образуются в организме преимущественно при распаде и синтезе гемоглобина, в значительно меньшей степени - миоглобина, цитохромов и др.

Билирубин

Постоянный компонент плазмы крови.

Имеет 4 изомера: α, β, γ, δ. У взрослых: 94% билирубина - α –изомер, 6% - остальные. У новорожденных 80% билирубина - α –изомер, 20% - остальные.

α –билирубин нерастворим в воде.

Свойства свободного БР

Высокая токсичность → вызывает разрушение мембран клеток.

Липофильность → легко проникает внутрь митохондрий, вызывая разобщение окисления и фосфорилирования → при проникновении в клетки ганглиев головного мозга нарушает функции ЦНС (патогенез ядерной желтухи).

Образует комплексы с альбумином и другими белками → резкое снижение биологической активности.

Может вытесняться с молекулы альбумина лекарственными веществами, свободными жирными кислотами или др. → токсическое действие БР возрастает

NB! Не всегда имеется прямая связь между выраженностью желтухи и содержанием БР в крови. На проявления желтухи влияют особенности липидного, белкового обмена и другие факторы.

Свойства связанного билирубина

Это БР, конъюгированный с глюкуроновой кислотой.

Не способен растворяться в липидном слое мембран

Не проникает внутрь клеток и митохондрий

Не токсичен

Растворим в воде, легко выделяется с мочой

Определение уровня билирубина

В клинической практике определение БР в сыворотке применяют для решения следующих задач:

1.Выявление увеличенного содержания БР в тех случаях, когда при осмотре больного желтуха не выявляется или ее наличие вызывает сомнение.

2.Объективная оценка степени билирубинемии.

3.Дифференциальная диагностика различных видов желтух.

4.Оценка течения заболевания путем повторных исследований.

Определение билирубина – преданалитический этап

Липемия и гемолиз сыворотки искажают материалы исследования. Липемия приводит к ошибочно завышенному результату. Гемолиз сыворотки – ошибочно заниженные результаты.

Материал нельзя держать на свету. Воздействие прямого солнечного света уже к исходу первого часа может снижать на 50% уровень БР(на этом основано фотолечение новорожденных).

Проба должна анализироваться в течение 2 часов с момента взятия при хранении при комнатной температуре в темноте, или в течение 12 часов при хранении в холодильнике в темноте.

Выражена интерференция лекарств - на общий БР- левомицетин, тетрациклин, аспирин, акрихина (за счет гемолиза), на конъюгированный БР - препараты, вызывающие холестаз: никотиновая кислота, а также пенициллин, эритромицин, СА, пероральные контрацептивы, эстрогены, андрогены, инсулин и др.

Общий БР в сыворотке крови

Норма -3-20,5 мкмоль/л.

Метод Индрашика – цветная реакция с диазофенилсульфоновой кислотой (диазореактивом).

Прямые спектрофотометрические методы (λ=450нм) применяются как экспресс-методы для диагностики гипербилирубинемий новорожденных (у взрослых -интерференция небилирубиновых пигментов сыворотки (каротиноидов).

Неконъюгированный БР (гидрофобное вещество) дает трудную – непрямую реакцию с диазореагентом. Поэтому его называют непрямой. Конъюгированный БР (хорошо растворим в воде) дает быструю прямую реакцию с диазореактивом и называется прямой билирубин.

N.B! Неконъюгированный БР = непрямой БР Конъюгированный БР = прямой БР

Зависимость выраженности желтухи от концентрации БР

Конъюгированный и неконъюгированный БР обладают интенсивно красящей способностью. Появление желтухи отмечается при уровне БР 34 мкмоль/л и более. При концентрации общего БР до 85 мкмоль/л – легкая желтушность, 86-169 – средне-тяжелая, 170 и более – тяжелая.

Определение конъюгированного и неконъюгированного БР

Прямой (конъюгированный) БР в сыворотке –норма – 0- 3,4 мкмоль/л – определяют в прямой реакции с диазореактивом (розово-фиолетовое окрашивание). Позволяет проводить дифдиагностику желтух. Повышается при паренхиматозной и механической желтухе (одновременно несколько повышается и неконъюгированный). При гемолитической – не изменяется.

Непрямой (неконъюгированный) БР определяют расчетным путем - общий минус прямой. Норма – 3,4- 16 мкмоль/л (составляет 75% от общего). Играет важную роль в диагностике гемолитических анемий.