Определение мертвых и живых

сперматозоидов по Блуму

Принцип: эозин (или смесь эозина с нигрозином) проходит через мембрану мертвых клеток, окрашивая их, живые не

окрашиваются.

Приготовление препарата: капля спермы+краситель→ мазок, высушивание, окрашивание, микроскопия (иммерсия). Подсчет не менее 200 клеток. Мертвые –

краснофиолетовые, живые – бесцветные. Норма: 90-95% живых клеток.

Оценка морфологии сперматозоидов

Оценивают форму и строение сперматозоидов.

Приготовление препарата: каплю свежей спермы на предметное стекло, высушить, фиксировать (этанол+эфир), окрасить по Романовскому, микроскопировать. Подсчет

не менее 200 клеток.

Норма: аномальных форм (микроголовка, макроголовка, расщепление головки, нет акросомы, аномалии шейки и т.д.) не более

15%.

Тератоспермия – увеличение аномальных форм сперматозоидов.

Клетки сперматогенеза в эякуляте

Обнаруживаются при микроскопии окрашенных мазков.

Норма: 0,5-2%, чаще всего сперматиды, сперматоциты.

Увеличение – при форсированном сперматогенезе.

Азоспермия – нарушение созревания сперматозоидов – увеличивается содержание молодых форм при отсутствии зрелых.

Аспермия – не обнаруживаются ни клетки сперматогенеза, ни сперматозоиды (атрофия гонад, закупорка семявыносящих протоков).

Другие клеточные элементы

в эякуляте

Лейкоциты – в норме до 5-6 в поле зрения. Если больше - пиоспермия, сопровождает ряд воспалительных

процессов мужских половых органов.

Эритроциты - в норме нет, могут появляться при воспалительных процессах, варикозном расширении

вен, при опухолях, камнях.

Биохимические показатели

спермы - фруктоза

Фруктоза – основной углевод, содержащийся в сперме. Определяют

колориметрическим методом.

Норма – не менее 1,3 мкмоль/эякулят.

Клиническое значение – уменьшение уровня фруктозы в сперме наблюдается при недостаточности тестостерона, нарушениях функции семенных пузырьков.

Биохимические показатели спермы

– лимонная кислота

Служит показателем функционального состояния предстательной железы, при простатитах значительно снижается.

Определение: эякулят центрифугируют для получения плазмы, осаждают белки (ТХУ), определяют содержание лимонной кислоты с помощью тест-системы.

Норма: более 52 мкмоль (10 мг)/эякулят.

Биохимические показатели

спермы – цинк

Является показателем секреторной способности предстательной железы.

Определение: эякулят центрифугируют

для получения плазмы, разводят дистиллированной водой, определяют содержание цинка с помощью тест- системы (подготовленные пробы можно сохранять замороженными).

Норма: более 2,4 мкмоль /эякулят

Тесты для выявления

антиспермальных антител

АТ в семенной плазме чаще IgA и IgG.

Смешанный антиглобулиновый тест

На предметное стекло наносят:

1 кп свежей спермы;

1 кп латексных частичек с покрытием IgG1 кп антисыворотки к человеческому IgG.

Смесь накрывают покровным стеклом, микроскопируют (400х ).

Высчитывают процент сперматозоидов, к которым прикреплены латексные частицы, покрытые IgG.

Схема смешанного антиглобулинового теста

1)

2)

Нормальные значения показателей спермы