Международные требования к аналитическим методам и референтным

материалам (Olesen, 1984)

Уровень аккредитации лаборатории	Тип метода	Требования к материалу	Уровень аккредитации референтного материала	Требуемая точность	Результат «истинное значение»
Междунаро дные и национальные лаборатории стандартизации	дефинитивный	чистый	первичный стандарт -первичный калибратор	± 0,2 - 0,5 %	дефинитивное значение
Профессион альные научные лаборатории и лаборатории стандартиза ции	референтный I типа	Матрикс определен дефинитивным методом	вторичный стандарт -вторичный калибратор	+ 1 %	референтное значение
			вторичный стандарт -калибратор (preciset)
	Референ-тный II типа	Матрикс определен референтным методом I типа
Исследовательские и референтные лаборатории, аккредитующие коммерческие приборы и диагностические наборы	Обычные рутинные методы с известной систематической ошибкой	Аттестованные контрольные материалы	контрольный материал	+ 3 - 5 %	установленное значение
	Обычные рутинные методы с неизвестной систематической ошибкой	Неттестованные контрольные материалы

3. Виды контрольных материалов. Основные требования к контрольному материалу. Принципы применения контрольных материалов– 13 мин

Виды контрольных материалов.

1. Контрольные сыворотки с известным содержанием компонентов, указанном в инструкции, используются для контроля правильности лабораторных исследований. Это сыворотки типа Сероконт-П (РОССИЯ), а так же, как правило, контрольный материал всех инофирм, производящих реагенты.

2. Контрольные сыворотки с неизвестным содержанием компонентов применяются для контроля воспроизводимости лабораторных исследований. Это сыворотки типа Сероконт-В (РОССИЯ).

3. Контрольные образцы крови для контроля качества исследований на автоматических счетчиках частиц крови.

4. Контрольные образцы крови для определения концентрации гемоглобина.

5. Контрольные образцы мочи.

6. Контрольные мазки крови.

7. Стандарты жидкие для исследуемых компонентов крови.

8. Стандартный тромбопластин для коагулологических исследований.

9. Контрольная человеческая плазма с известным временем активности тромбопластина.

10. Контрольная человеческая плазма с известным временем частично активированного тромбопластина (АЧТВ).

11. Контрольная человеческая сыворотка с дефицитом определенных факторов свертывания крови (VIII,IХ, ХI и др.).

Требования, предъявляемые к контрольным материалам следующие:

1. контрольный материал должен быть идентичен по своим физико-химическим свойствам анализируемому образцу;

2. стабилен при длительном хранении и транспортировке;

3. должен иметь минимальную вариабельность внутри серии;

4. давать возможность контролировать весь аналитический процесс;

5. быть пригодным для контроля точности и правильности, то есть, выявлять систематические и случайные ошибки. Водные растворы, не смотря на простоту изготовления, не совпадают с биологической природой исследуемой среды.

Контрольный материал включается в серию однотипных исследований и производится тем же персоналом, с использованием той же аппаратуры, методов, реактивов, пипеток, дозаторов и т. д. Применение контрольных материалов с известным содержанием компонентов определяет правильность выдаваемых результатов. Результат исследования контрольного материала с известным содержанием компонентов должен укладываться в пределы допустимых отклонений, указанных в инструкции (паспорте) к контрольному материалу. Если результат выходит за пределы допустимого отклонения, то показатели исследований сывороток пациентов являются неправильными, необходимо установить и устранить причину полученной ошибки. Например, в контрольной сыворотке содержание глюкозы составляет 7,6-8,4 ммоль/л. В лаборатории получен результат 6,11 ммоль/л. Следовательно, в этот день допущена ошибка, т.е. результаты глюкозы занижены.

Наиболее подходящими для контроля являются нормальные и патологические контрольные сыворотки, изготовленные промышленным путем. При отсутствии промышленных сывороток можно приготовить в лаборатории слитую сыворотку(остатки сывороток после исследования сливают в одну емкость, исключая желтушные, липемические, мутные, инфицированные сыворотки, замораживают. Собирают не менее 1 литра, затем размораживают, фильтруют, разливают в стерильные флаконы и запаивают). Такие сыворотки используют для контроля воспроизводимости основных биохимических показателей - общего белка, глюкозы, холестерина, мочевины и др.

Для проведения контроля правильности исследуют три контрольных кона:

• с нормальными величинами;

• с низкими значениями;

• с высокой концентрацией вещества.

Контрольные материалы не могут применяться в роли калибраторов. Ка-либратор всегда имеет точно определенную величину, установленную производителем или потребителем референтного метода. Эту величину надо воспринимать как надежную. Калибратор применяется для стандартизации метода или приборов.

4. Внутренний контроль качества – 18 мин.

Контроль воспроизводимости результатов анализа в КДЛ подразделяется на 4 этапа:

1. Определение концентрации вещества в сыворотке типа Сероконт-В и установление расчетных параметров для дальнейшего контроля качества (предпериод контроля).

2. Статистическая обработка полученных результатов.

3. Построение контрольных карт.

4. Оценка контрольных карт по предупредительным и контрольным критериям.

Первый этап-это система накопления результатов исследований контрольной сыворотки на воспроизводимость. Так как в сыворотке концентрация вещества неизвестна и не исследована, то необходимо иметь запас сыворотки одной серии, чтобы хватило ее для работы на 1 год или хотя бы на 6 месяцев.

Набор результатов контрольного материала на воспроизводимость проводится в течение 23 -25 дней. Ежедневно или один раз в 2 дня растворяют сыворотку, если она сухая, и исследуют показатели, указанные в инструкции к определению тестов (глюкоза, холестерин, общий белок, мочевина и т.п.). Наряду с опытными пробами обрабатывают контрольную сыворотку в двух параллельных пробах, причем результаты измеряют на тех же приборах, что и опытные образцы. Растворенную сыворотку можно хранить 2 суток при температуре +4-6°С или в замороженном состоянии 1 месяц. Из двух параллельных проб контрольной сыворотки вычисляют среднюю величину каждого параметра, записывают в виде столбика (см. табл.), и, таким образом, получают ряд чисел. Каждая величина одного дня обозначается статистическим знаком X.

После набора материала переходят к следующему этапу - статистической обработкеданных.Все результаты за 23-25 дней по отдельным видам исследований оценивают (сравнивают между собой). Если какая либо величина (одна или больше) Х выходит далеко за пределы ряда показателей, то она отбрасывается и число дней исследований (п) уменьшается. Затем рассчитывают средний показатель (X), для чего все результаты суммируют: X₁+ Х₂X₃+ Х₄+.. X_n= ∑X , где Х - средняя одного дня (из двух параллельных проб),n-число дней исследования, ∑X - сумма результатов всех дней исследований. Среднюю величину вычисляют по формуле:. Затем определяется отклонение от средней величины результатов каждого дня исследования без учета знака (плюс или минус), т.е. вычисляют X-X₁X-X₂; Х-Х₃, и т.д. Все отклонения от средней величины суммируют ∑ (X-X)²и находят среднее квадратическое отклонение (S) по формуле: