Ручные микроскопические методы

Исследуют под микроскопом окрашенных мазок периферической крови. Основное условие – правильно подготовленный мазок.

Критерии правильности окраски мазка при использовании любого метода окрашивания: эозинофильные гранулы розово-оранжевого цвета, эритроциты светло-розоваые, нейтрофильная зернистость мелкая фиолетовая.

Подсчет лейкоцитарной формулы производят с помощью иммерсионной системы (90х7). Лейкоциты располагаются в мазке неравномерно: более крупные клетки – моноциты, эозинофилы, нейтрофилы- встречаются чаще по краю мазка, более мелкие лимфоциты – в середине. Поэтому посчете следует производить как по краю, так и по середение – по зигзагообразной линии- линии Меандра. Если количество лейкоцитов у обследуемого в пределах нормы и при подсчете первых 100 лейкоцитов не обнаружено никаких откклонений ни в составе формулы. Ни в морфологии эритроцитов. То на этом подсчет завершают. Если были выявлены какие-либо отклонения от нормы. Необходим подсчет не менее 200 лейкоцитов. При лейкопении подсчитывают 100 клеток по всему мазку, при необходимости используют 2 мазка. Подсчитывают только целые неразрушенные клетки.

В нормальной крови выявляются: нейтрофилы п/я – 1-6%, с/я – 47-72%, эозинофилы – 0,5-5%, базофилы – 0-1%, моноциты – 3-11%, лимфоциты – 19-37%.

При обнаружении в мазке крови незрелых форм гранулоцитов, плазматических клеток, их включают в формулу. Обращают внимание на дегенеративные изменения в лейкоцитах, о чем обязательно делают запись в анализе. Это: токсогенная зернистость, пельгеризация и /или гиперсигментация ядер, пикноз ядер, вакуолизация ядер и цитоплазмы. Описывают также дегенеративные изменения в других клетках. Одновременно оценивают морфологию эритроцитов. Если при подсчете лейкоцитарной формулы встречаются нормобласты, подсчитывают их число на 100 сосчитанных лейкоцитов. При значительном количестве нормобластов (более 15-20 на 100 лейкоцитов) необходим перерасчет количества лейкоцитов, так как при их подсчете в камере Горяева или автоматическим анализатором одновременно с ними считают и нормобласты.

Клинико-диагностическое значение:

Нейтрофилез – наиболее частое изменение в лейкограмме и является причиной лейкоцитоз. Наблюдается чаще при острых инфекциях бактериальных, интоксикациях. После кровопотери, гемолитического криза, лейкозе и тд.

Нейтропения сопровождает подавляющее большинство лейкопенических состояний. При тяжелых интоксикациях – признаки дегенерации.

Увеличение эозинофилов – при аллрегических реакциях, глистных инвазиях, опухолях, аутоиммунных заболеваниях,лейкозах. Анэозинофилия – отсутствие эозинофилов – при острых воспалительных процессах. Интоксикациях.

Увеличение базофилов – при аллергических реакциях, ХЛЛ. В период приступа аллергической реакции – эозинофилы и базофилы могут снидаться.

Моноцитоз абсолютный - при хронических инфекциях (туберкулез. Затяжной септический эндокардит, хрониосепсис), малярии, злокачественных опухолях. Моноцитопения – при острых инфекциях. Тяжелых септических состояниях.

Лимфоцитоз абсолютный – ХЛЛ, некоторых инфекционных заболеванихя (инфекционный лимфоцитоз, коклюш, краснуха и др. вирусные). Абсолютная лимфопения – при лучевой болезни, ЛГМ, приеме иммунодепрессантов, иммунодефицитных состояниях.

Клетки, не встречающиеся в норме: плазматические, незрелые гранулоциты, молодые лимфоциты, эритрокариоциты, бласты.

Плазматические могут в небольшом количестве (0,5-3%) появляться при любом инфекционном и воспалительном процессе, опухолях, после вакцинации, при сывороточной болезни. При миеломе количество их незначительно. Резко возрастает только при лейкемизации.

Незрелые гранулоциты – в небольшом количестве появляются при тяжелых инфекциях, интоксикациях. Значительное количество – 10-20% характерно для ХМЛ.

Молодые лимфоидные клетки (пролимфоциты, широкоцитоплазменные) в единичном количестве появляются при ХЛЛ, лейкемоидных реакциях лимфоидного типа, инфекциях, особенно у детей. Большое количество (до 10-15%) широкоцитоплазменных – инфекционный мононуклеоз.

Эритрокариоциты (нормобласты, мегалобласты) – при тяжелых анемиях, лейкозах, злокачественных опухолях.