Исследование желудочного содержимого
Желудочное содержимое подвергают макроскопическому, химическому и, при необходимости, микроскопическому исследованию.
При макроскопическом исследовании определяют объем полученного содержимого, его цвет, запах, наличие примесей. Количество содержимого определяется в каждой полученной порции с помощью мерного цилиндра. Увеличение объема содержимого желудка свидетельствует о гиперсекреции или о нарушении опорожнения желудка. Цвет желудочного содержимого обычно беловатый, опалесцирующий. Примесь желчи изменяет окраску на зеленую, а крови - на красноватую, бурую или коричневую в зависимости от количества крови и кислотности содержимого. Запах желудочного содержимого слегка кислый. При нарушении опорожнения желудка запах становится затхлым, при уремии появляется запах аммиака. Из примесей чаще всего встречаются слизь, кровь и желчь.
Химическое исследование желудочного сока в основном включает определение кислотности и активности пепсина. Кислотность желудочного сока определяется методом титрования. Титрование рекомендуется проводить непосредственно после получения и фильтрования содержимого, так как при хранении желудочного сока его кислотность изменяется.
Для оценки кислотообразующей функции желудка определяют общую кислотность, свободную, связанную кислоту, а также кислотный остаток (органические кислоты и кислореагирующие соли). Кислотность выражают в ммоль/л (мэкв/л). Общая кислотность желудочного сока равна количеству 0,1 н раствора едкого натра (гидроксида натрия), пошедшего на титрование 100 мл желудочного сока. Она складывается из свободной соляной кислоты, связанной и кислотного остатка.
Для определения кислотности пользуются методами Тепфера и Михаэлиса. Наиболее удобным является метод Михаэлиса. К 5 мл профильтрованного желудочного содержимого приливают 2 капли 1% спиртового раствора фенолфталеина (в кислой среде он остается бесцветным). Затем добавляют 2 капли 0,5% спиртового раствора диметиламидоазобензола (в присутствии свободной соляной кислоты желудочное содержимое при этом окрашивается в ярко-красный цвет). После введения индикаторов желудочное содержимое титруют 0,1н раствором NaOH, отмечая количество израсходованной щелочи в следующие моменты: 1) изменение ярко-красной окраски на оранжево-красную (цвет «семги») — оттитрована свободная соляная кислота; 2) изменение цвета «семги» на лимонно-желтый (в начале его появления); 3) переход лимонно-желтого цвета в стойкий розовый — оттитрована «общая кислотность».
Для выражения результата в единицах СИ расчет ведется по следующим формулам:
;
;
.
,где Ссвоб.- содержание свободной соляной кислоты в ммоль/л;
Собщ. — общая кислотность в ммоль/л; Ссвяз — содержание связанной соляной кислоты в ммоль/л; V1, — объем 0,1н раствора NaOH, пошедшего на изменение ярко-красной окраски на оранжево-красную, мл; V2; - объем 0,1 н. раствора NaOH, пошедшего на изменение оранжево-красной окраски на лимонно-желтую, мл; V3 — объем 0,1н раствора NaOH, пошедшего на изменение лимонно-желтой окраски на стойкую розовую, мл; Vпр — объем желудочного содержимого, взятого на анализ, мл.
Если после прибавления индикаторов желудочное содержимое сразу окрашивается в желтый цвет, то свободную и связанную соляную кислоту не определяют, а устанавливают лишь общую кислотность. Появление цвета «семги» сразу после добавления индикаторов свидетельствует об отсутствии свободной соляной кислоты. В этом случае определяют только связанную соляную кислоту и общую кислотность.
Если во всех порциях желудочного содержимого отсутствует свободная соляная кислота, то определяют ее дефицит. Для этого к 5 мл профильтрованного желудочного сока прибавляют 2 капли 0,5 % раствора димети-ламидоазобензола и титруют 0,1н раствором соляной кислоты до появления стойкого красного окрашивания. Расчет производят по формуле:
,
где d — дефицит соляной кислоты в ммоль/л,
Vк — количество 0,1н раствора
соляной кислоты, пошедшей на титрование,
мл; Vp — объем пробы, взятой для титрования,
мл.
Кислотность желудочного содержимого определяют отдельно в каждой порции. Затем вычисляют дебит соляной кислоты, т.е. общее количество выщеленной соляной кислоты за определенный промежуток времени (чаще за 1 час).
Дебит соляной кислоты рассчитывается по формуле: D = V1 С1 + V2 С2 + Vз Сз + V4 С4, где D — дебит соляной кислоты в ммоль/ч, V1-4 — объем каждой из четырех 15-минутных порций желудочного содержимого в л, С1-4 — содержание кислоты в каждой из порций в ммоль/л. Дебит можно рассчитать для свободной, связанной и общей соляной кислоты в фазу базальной и стимулированной секреции.
Активность пепсина изучают косвенным методом, путем определения его способности переваривать белковые субстраты. В настоящее время наиболее широкое распространение получил метод Туголукова. В его основе лежит определение способности протеолитических ферментов переваривать белки плазмы. По количеству переваренного белка судят о количестве пепсина его активности.