Министерство здравоохранения Республики Беларусь Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет»

Кафедра клинической лабораторной диагностики

Обсуждено на заседании кафедры

протокол № _________

«___» ______________200_ г.

Лекция

по клинической лабораторной диагностике

для студентов __3_ курса ____медико-диагностического ____ факультета

Тема: Антигены клеток крови

Время ___ 2 часа____

Учебные и воспитательные цели:

1. Дать современные представления об антигенах эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов.

2. Рассмотреть клиническое значение наличия антигенов АВО, резус на эритроцитах.

3. Ознакомить студентов с современными методами выявления антигенов крови и использовании этих реакций в практической медицине.

ЛИТЕРАТУРА

1. Исследование системы крови в клинической практике (под ред. Г.И. Козинца и В.А. Макарова). – М.: Триада – Х, 1997 г. – 480 с.Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии. – СПб.: Интер-Медика, 1999, в 2-х томах.

2. Клиническая лабораторная аналитика (под ред. В.В.Меньшикова) – М.: Лабинформ – РАМЛД, 1999 г. – 2 т.

3. Методы клинических лабораторных исследований / Под редакцией В.С. Камышникова. - Мн.: Белорусская наука, 2002. – 695 с.

4. Фред Дж. Шиффман Патофизиология крови – М. – СПб.: «Издательство БИНОМ» – «Невский Диалект», 2000 г.-448 с.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ

Мультимедийная презентация

РАСЧЕТ УЧЕБНОГО ВРЕМЕНИ

№ п/п	Перечень учебных вопросов	Время в минутах
	Вступление	3 мин
1.	Антигены системы АВО. Формирование в онтогенезе, антигенность, разновидности. Антитела системы АВО. Иммунные антитела против антигенов АВО и причины появления. Клиническое значение системы АВО.	22 мин
2.	Принципы определения антигенов системы АВО.	10 мин
3.	Система антигенов резус, формирование, антигенность, иммуногенность, разновидности. Патофизиологические механизмы формирования конфликта по резус-антигенам. Профилактика резус-конфликта.	22 мин
4.	Принципы определения резус-принадлежности крови. Трактовка результатов.	10 мин
5.	Система антигенов Kel, формирование, антигенность, иммуногенность, разновидности. Антитела анти-KEL, роль в патологии.	5 мин
6..	Антигены гистосовместимости I и II классов. Биохимические свойства. Экспрессия на клетках. Наследование. Биологическое значение антигенов гистосовместимости. Роль HLA в посттрансфузионных реакциях.	15 мин
	Заключение. Ответы на вопросы.	3 мин
Всего		90 минут

С О Д Е Р Ж А Н И Е

Вступление – 3 мин

На поверхности клеток крови человека имеется большое число структур (факторов), которые могут играть роль антигенов, т.е. при попадании в организм другого человека они стимулируют иммунный ответ: выработку антител и сенсибилизированных к ним лимфоцитов. Их также называют изоантигенами («изо» - равный), так как они встречаются у представителей одного вида, в отличие от гетероантигенов, которые имеются у других видов млекопитающих. Такие антигены делят людей как биологический вид на группы. Наука, изучающая изоантигены и изиоантитела, называется изосерологией. Основатель науки о группах крови – Карл Ландштейнер, который в 1901 г. описал различия в крови людей, впоследствии обозначенных как группы крови АВО.

1. Антигены системы АВО. Формирование в онтогенезе, антигенность, разновидности. Антитела системы АВО. Иммунные антитела против антигенов АВО и причины появления. Клиническое значение системы АВО - 22 мин

Антигены системы АВО формируются на 3-ем месяце внутриутробного развития под влиянием 3-х аллельных генов – А,В,О, расположенных на 9 хромосоме. АГ системы АВО присутствуют не только на эритроцитах, но и практически во всех тканях и секретах организма. К моменту рождения их формирование не закончено.

Максимальная антигенность к 3 годам. Наследование происходит кодоминантно, то есть ребенок наследует по 1 гену группы крови. Поэтому возможны 6 генотипов групп крови: ОО, АА. АО, ВВ, ВО, АВ. У гетерозигот (АО,ВО) гены А и В доминантны, а ген О рецессивен. Поэтому гетерозигота АО и гомозигота АА фенотипически проявляется одинаково. Таким образом, фенотипически различают 4 группы крови. Первая группа всегда гомозиготна и содержит только антиген О, в противоположность IV группе, которая содержит 2 антигена - А и В. Наличие гетерозиготных особей в 2 и 3 группах крови обусловливает рождение лиц с 1 группой от родителей с одинаковой 2 или с одинаковой 3 группой. По данным литературы среди нашего населения группа 0(1) встречается в 33,5%, А(II) – в 37,8%, В(III) – в 20,6 %, АВ(IV) – в 8,1%. (Дранник дает 45, 42, 10 и 3% соответственно).

Существует несколько разновидностей антигенов А. У 85% лиц группы А и АВ в эритроцитах имеются антиген А в сильной форме (его называют А1). Он дает резко положительную реакцию агглютинации с эритроцитами. Приблизительно у 12% лиц группы А(II) и АВ (IV) антиген А имеет слабые антигенные свойства (его обозначают как А2. Существуют и более слабые разновидности антигена А (А3, А4 и т.д.). Наличие слабых антигенов А осложняет определение групп крови, так как приводит слабо выраженной агглютинации и является самой частой причиной ошибок.

Варианты со слабой выраженностью антигена В встречаются очень редко (казуистические случаи).

Изредка может наблюдаться химеризм по АВО – присутствие в одном организме эритроцитов, принадлежащих к двум фенотипам. Такое явление чаще всего наблюдается после массивного переливания эритроцитов 1 группы пациенту другой группы, при трансплантации аллогенного костного мозга на фоне интенсивной иммунодепрессии. В естественных условиях такое явление может наблюдаться у разнояйцевых близнецов.

Группа крови остается неизменной на протяжении всей жизни. Однако экспрессия групповых антигенов на эритроцитах может изменяться при различных состояниях. Так, отмечено снижение при мегалобластной, сидеробластной анемии, приобретенном дефиците ферментов, в частности, пируваткиназы эритроцитов, при пароксизмальной ночной гемоглоблинурии (одновременно с резусантигенами). Отмечено, что при тяжелых интоксикациях экспрессия антигенов может изменяться, как бы маскироваться, или появляться дополнительные В-антигены на эритроцитах.

Антитела системы АВО – двух типов –α и β. Они являются нормальным компонентом плазмы крови. Это т.н. естественные антитела. Интересно, что их синтез индуцируется к несуществующим в организме антигенам. Причем всегда существует определенное сочетание АГ эритроцитов и антител в сыворотке. Этот феномен долго не поддавался объяснению. А затем было установлено, что синтез этих антител индуцируется у 2-3-месячного плода в связи с заселением кишечника мирофлорой, то есть он является результатом бактериальной иммунизации. Так, показано, что Е.coli содержит антиген подобный В-антигену эритроцитов. Отсюда понятно, почему не образуются антитела против собственного антигена, а только против другого.

Естественные антитела к А- и В-антигенам относятся обычно к классу ИгМ. Они хорошо агглютинируют эритроциты в реакциях ин витро, т.к. имеют 2 антигенсвязывающих центра – полные гемагглютинины. У новорожденных их нет. Появляются к концу 3-6 месяца жизни. Полного развития эти антитела достигают к 18 годам. У взрослого титр α – 1:32, 1:64, β – 1:8 – 1:16. Уровень естественных антител снижается при возрастных и обусловленных патологией иммунодефицитных состояниях. В частности, при иммунодефицитах гуморального типа (болезнь Брутона), гипогаммаглобулинемиях, заболеваниях крови (макроглобулинемия Вальденстрема, лимфосаркоме, множественной миеломе), в старческом возрасте.

Иммунные антитела в отличие от естественных называют анти-А и анти-В. Причиной их появления являются:

беременности, несовместимые по АВО.

переливание несовместимой крови

введение иммунных препаратов (вакцин, анатоксинов, загрязненных антигенами А и В).

Иммунные антитела обычно относятся к классу G.

Клиническое значение системы АВО:

1. Система АВО является основной, определяющей совместимость или несовместимость переливаемой крови. При переливаниях несовместимой крови развивается острая посттрансфузионная реакция гемолитического типа (внутрисосудистый гемолиз).

2. При беременностях, несовместимых по АВО развивается гемолитическая болезнь. Чаще всего развивается, если мать – 1 гр, а ребенок – 2, т.к. антиген а является наиболее иммуногенным. Другие виды несовместимости по системе АВО практического значения не имеют, так как антиген в не является иммуногеннмы, а кроме того группы крови 3 и 4 встречаются гораздо реже.

Бывает редко: приблизительно в 1 случае из 25 несовместимостей (менее, чем в 10% от общего числа родов). Это обусловлено рядом причин:

низкая экспрессия антигенов на клетках плода (считается, что с 9 недели внутриутробного развития эритроциты плода могут попадать в кровоток матери в связи с возможным смешиванием крови в лакунах формирующегося трофобласта).

из нескольких известных аллотипов А. иммуногенным является только аллотип А1 (причем наиболее подвержены влиянию цитотоксических ИгG гомозиготные А1А1 эмбрионы).

Межгрупповой конфликт наблюдается после 8-10 недель беременности. Когда на эритроцитах плода начинают появляться групповые антигены системы АВО, и клинически проявляется угрозой прерывания ьеременности или выкидышем. Прибегают к вливанию матери различных растворов (гемодез, полиглюкин, реополиглюкин) с целью снижения титра альфа АТ, учитываются титры выше 1:10.

Интересно, что только 1 беременность при такого рода несовместимости угрожает эмбриону. Предполагается, что развивается защитный механизм при повторной иммунизации матери (по принципу антиидиотипических или блокирующих АТ?), не повреждающих плод.

2. Принципы определения антигенов системы АВО – 10 мин

Определение антигенов системы АВО осуществляется 3 основными методами:

1. При помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток – в крови устанавливают наличие или отсутствие антигенов А, В и делают вывод о групповой принадлежности.

2. Перекрестным способом – одновременно с помощью стандартных сывороток и стандартных эритроцитов. При этом устанавливают наличие агглютиногенов и агглютининов.

3. Использование моноклональных антител – ЦОЛИКЛОНов.