Министерство здравоохранения Республики Беларусь

Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет»

Кафедра клинической лабораторной диагностики

Обсуждено на заседании кафедры

протокол № _________

«___» ______________200_ г.

Лекция

по клинической лабораторной диагностике

для студентов __3_ курса ____медико-диагностического ____ факультета

Тема: Оптические методы количественного анализа в лабораторной диагностике

Время ___ 2 часа____

Учебные и воспитательные цели:

1. Сформировать представление об общих принципах оптических методов анализа.

2. Ознакомить с основными современными методами оптического анализа.

3. Дать представление о методических основах использования оптического анализа в лаборатории, аналитических характеристиках.

ЛИТЕРАТУРА

1. Камышников В.С. Техника лабораторных работ. – Мн., ”Белорусская наука”, 2001 г., с. 249-251.

2. Камышников В.С. Методы клинических лабораторных исследований. – Мн., “Белорусская наука”, 2001 г., с. 423-426.

3. Руководство по клинической лабораторной диагностике / Под ред. В.В. Меньшикова. –М.: Медицина, 1982 г., с. 17-27.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ

Мультимедийная презентация

РАСЧЕТ УЧЕБНОГО ВРЕМЕНИ

№ п/п	Перечень учебных вопросов	Время в минутах
	Вступление	3 мин
1.	Классификация оптических методов количественного анализа.	8 мин
2.	Принципы и аналитические основы фотометрии, рефрактометрии, поляриметрии. Приборы, классификация и основные типы.	9 мин
3.	Абсорбционная фотометрия. Закон Ламберта-Бера.	10 мин
4.	Спектрофотометрия, нефелометрия, атомно-абсорбционная фотометрия, принципы методов.	20 мин
5.	Эмиссионная фотометрия: спектрофлуориметрия, пламенная фотометрия.	12 мин
6.	Основные условия измерения при работе с фотометрической аппаратурой. Источники ошибок и подходы и их предупреждению.	15 мин
7.	Правила эксплуатации фотометрической аппаратуры.	8 мин
	Заключение. Ответы на вопросы.	5 мин
Всего		90 минут

С О Д Е Р Ж А Н И Е

Вступление – 3 минут

Пo способу использования все лабораторное оборудование делится на измерительные приборы, которые выдают количественные результаты и поэтому подлежат метрологическому контролю, и прочую, иногда очень сложную, аппаратуру, которая метрологический контроль не проходит, например микроскопы.

В клинической лабораторной диагностике чаще всего используются оптические измерительные приборы. К ним относятся приборы для измерения светопоглощения — фотометры и спектрофотометры; для измерения окраски и светопропускания пленок — денситометры; для измерения флюоресценции — флюорометры, спектрофлюорометры, поляризационные флюорометры; для измерения интенсивности светоизлучения (окраски пламени, эмиссии) — пламенные фотометры; для измерения количества излученного света — люминометры; для измерения поглощения света раскаленными газами — атомные абсорбциометры; для измерения светорассеивания — нефелометры.

1. Классификация оптических методов количественного анализа.– 8 мин

Оптический количественный анализ основывается на регистрации изменений, происходящих с лучом света при прохождении его через исследуемый раствор, а именно: интенсивности поглощения — абсорбционная фотометрия; свечения молекул и атомов вещества — флюориметрия, пламенная фотометрия; величины отклонения монохроматического светового потока от первоначального направления его распространения — рефрактометрия, изменения угла вращения плоскополяризованного света — поляриметрия.

2. Принципы и аналитические основы фотометрии, рефрактометрии, поляриметрии. Приборы, классификация и основные типы. – 9 мин

Оптические методы количественного анализа подразделяются на:

1. рефрактометрию,

2. поляриметрию,

3. фотометрию:

а) абсорбционную:

• спектрофотометрию,

• нефелометрию (собственно нефелометрию и турбидиметрию, в частности,

все более широкоиспользуемую в настоящее время иммунотурбидиметрию),

• атомно-абсорбционную фотометрию,

б) эмиссионную:

• флюориметрию,

• пламенную фотометрию,

• атомно-эмиссионный спектральный анализ.

Рефрактометрия базируется на измерении показателя преломления света при прохождении его через оптически неоднородные среды. Ранее метод рефрактометрии применялся в основном для определения содержания общего белка в плазме (сыворотке) крови. Поскольку преломляющая способность сыворотки зависит от уровня не только белков, но и небелковых компонентов, рефрактометрический анализ давал ложнозавышенные результаты.

В основе полярнметрии лежит свойство прозрачных веществ вращать плоскость поляризованного луча света. Известно, что естественный, неполяризованный луч представляет собой совокупность волн, колебательные движения которых равномерно распределены вдоль множества плоскостей, проходящих через линию распространения луча. Если луч сложного (белого) света пропустить через, пластинку поляроида или призму николя (кальцит), то каждая волна этого пучка разложится на составляющие, направленные по взаимно перпендикулярным осям поляроида (николя). Так как поляризующий материал обладает способностью поглощать одну из этих составляющих, электромагнитные колебания в выходящем пучке света происходят только в одной плоскости, в связи с чем такой луч света называют плоскополяризованным. Если на его пути поместить второй поляроид, то через него подобным же образом пройдет только та составляющая луча, плоскость колебаний которой будет параллельна оси поляроида. Поскольку же в пучке поляризованного света колебания совершаются только в одном направлении, при повороте второго поляроида (анализатора) на 90 градусов мощность светового пучка падает до нуля. Очевидно, поляризованный луч света будет проходить через призмы николя только в том случае, если их оси находятся в одной плоскости.