Определение содержания фибриногена в плазме крови по методу Рутберг.

Принцип. Образовавшийся в результате свертывания плазмы крови фибрин быстро высушивают и взвешивают. По его массе судят о количественном содержании фибриногена. Количество образовавшегося фибрина эквивалентно содержанию фибриногена в плазме.

Ход определения. К 1,0 мл плазмы добавляют 0,1 мл 0,45 моль/л раствора хлорида кальция. Ставят в ТПС при 37 °С на 10 мин. За этот период происходит образование сгустка. Далее сгусток переносят на обеззоленный бумажный фильтр и просушивают другим фильтром до сухого состояния, т. е. до тех пор, пока на фильтре не останется влажного пятна. Сгусток высушенного фибрина немедленно взвешивают на торсионных весах.

Норма. Масса сгустка составляет 9—15 мг.

Расчет. Для определения концентрации фибриногена, выраженной в г/л, массу сгустка фибрина умножают на экспериментально установленный коэффициент 0,222.

Примечание. Для ускорения превращения фибриногена в фибрин и более полного образования сгустка в реакционную смесь вносят 0,2 мл раствора тромбопластина, который используется в методике определения протромбинового времени.

Клинико-диагностическое значение. Гиперфибриногенемия (повышенное содержание фибриногена) отмечается при острых воспалительных и некробиотических процессах (перитоните, сепсисе, гломерулонефрите, пневмонии, туберкулезе легких, ревматизме, злокачественных опухолях, инфаркте миокарда, наклонности крови к гиперкоагуляции и тромбозам). Гипофибриногенемия (сниженное содержание фибриногена) наблюдается при врожденных афибриногенемиях, гипофибри-ногенемиях, приобретенных нарушениях синтеза фибриногена (хронический гепатит, цирроз печени, эритремия, ДВС-син-дром), усиленном фибринолизе и фибриногенолизе. Снижение уровня фибриногена может наблюдаться при оперативных вмешательствах на легких, поджелудочной и щитовидной железах, матке, преждевременной отслойке плаценты, при шоковых состояниях. Уменьшение содержания фибриногена плазмы ниже 1 г/л вызывает кровоточивость. Гипофибриногенемию могут вызвать препараты, используемые для активации фибринолиза (стрептаза, урокиназа и др.).

Определение естественного (спонтанного) лизиса и ретракции фибринового сгустка.

Принцип. При сокращении (ретракции, Р) и растворении фибринового сгустка (спонтанного фибринолиза, СФ) выделяется сыворотка, а форменные элементы выпадают в осадок. Зная гематокрит (соотношение объема эритроцитов и плазмы крови) исследуемой крови и количество форменных элементов, выпавших из сгустка, рассчитывают СФ и Р в процентах.

Ход определения. В сухую центрифужную градуированную пробирку набирают 2 мл крови из вены и немедленно погружают в нее якорь (крючок из нержавеющей стали либо специальная стеклянная палочка). Пробирку помещают в термостат при 37 °С на 2 ч, затем вынимают из термостата, осторожно удаляют прикрепившийся к якорьку сгусток а пробирку центрифугируют 15 мин при 1500 об/мин для осаждения форменных элементов крови, выпавших в результате лизиса сгустка. Определяют, какой объем (мл) в пробирке занимают сыворотка (F ₂) и эритроциты (F ₃). Спонтанный фибринолиз и ретракцию рассчитывают по следующим формулам:

Р(%) = F ₂ х50

Vпл

где: F ₂ - объем сыворотки (мл) в 2 мл взятой крови; Vпл — объем плазмы, высчитанный по гематокриту (Vпл = 1 - гематокрит); 50 — расчет на 100 мл плазмы. Норма составляет 60—80%.

СФ(%) = F ₃ х50

Гематокрит

где: F ₃ - объем форменных элементов (мл) в 2 мл крови; гематокрит — объем эритроцитов; 50 — расчет на 100 мл плазмы. Норма. 10—20%.

Клинико-диагностическое значение. Степень ретракции кровяного сгустка является показателем количества и функционального состояния тромбоцитов. Недостаточная ретракция наблюдается при выраженных тромбоцитопениях, некоторых видах качественной неполноценности тромбоцитов, избытке эритроцитов (эритроцитозы). Ложно завышенная ретракция наблюдается при анемиях и снижении гематокрита, а также при гипофибриногенемиях. Увеличение процесса лизиса фибринового сгустка свидетельствует об активности, а уменьшение о торможении фибринолитической (плазминовой) системы крови. Активация ФАК наблюдается у больных в послеоперационном периоде, особенно при операциях на матке, легких, поджелудочной железе, предстательной железе, ожогах, шоковых состояниях, циррозах печени, злокачественных опухолях, действии ионизирующего излучения и др. Торможение ФАК является показателем риска тромбообразования. Снижается фибринолиз при атеросклерозе, гипертонической болезни, инфаркте миокарда, тромбоэмболических осложнениях и др.