Добавил:
ilirea@mail.ru Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Кузнецова Т.Г. Основы цитофизиологии

.pdf
Скачиваний:
27
Добавлен:
22.08.2018
Размер:
998.05 Кб
Скачать

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ «ГОМЕЛЬСКИЙГОСУДАРСТВЕННЫЙМЕДИЦИНСКИЙУНИВЕРСИТЕТ»

Кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии

Т. Г. КУЗНЕЦОВА, Е. К. СОЛОДОВА

ОСНОВЫ ЦИТОФИЗИОЛОГИИ

Рабочая тетрадь для студентов 1 курса лечебного, медико-диагностического

и медико-профилактического факультетов

Гомель 2008

УДК 611 018.1 + 612 ББК 28. 86 + 28.073

К 89

Авторы:

Т. Г. Кузнецова, Е. К. Солодова

Рецензент:

доцент кафедры физиологии человека и животных биологического факультета Гомельского государственного университета

им. Ф. Скорины, кандидат медицинских наук Э. В. Туманов

Кузнецова, Т. Г.

К 89 Основы цитофизиологии: рабочая тетрадь для студентов 1 курса лечебного, медико-диагностического и медико-профилактического факультетов / Т. Г. Кузнецова, Е. К. Солодова. — Гомель: Учреждение образования «Гомельский государственныймедицинскийуниверситет», 2008. — 20 с.

ISBN 978-985-6779-95-7

Содержит справочный и графический материал (рисунки и схемы), перечень контрольных вопросов по курсу общей цитологии, объектам и методам гистологических исследований. Предлагается описание цитологических и гистологических препаратов, изучаемых на практических занятиях, даны указания по их зарисовке.

Предназначена для студентов1 курса лечебного, медико-диагностического и медико-профи- лактического факультетов.

Утверждено и рекомендовано к изданию Центральным учебным научно-методическим советом учреждения образования «Гомельский государственный медицинскийуниверситет» 6 декабря 2007 г., протокол № 8.

 

УДК 611

018.1 + 612

 

ББК 28.

86 + 28.073

ISBN 978-985-6779-95-7

© Учреждение образования

 

«Гомельский государственный

 

медицинский университет», 2008

ТЕМА 1. ВВЕДЕНИЕ. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ПРАВИЛА РАБОТЫ С МИКРОСКОПОМ

1.Установить микроскоп у края стола и повернуть зеркало вогнутой стороной к источнику света.

2.Привести микроскоп в рабочее состояние:

а) установить объектив малого увеличения на расстоянии 1–1,5 см от предметного столика;

б) поднять конденсор; в) глядя в окуляр одним глазом, равномерно и интенсивно осветить зеркалом

поле зрения.

3.Поместить препарат на предметный столик покровным стеклом кверху. Найти нужное место, передвигая препарат (стекло держат за ребра большим и указательным пальцами).

4.Опустить конденсор до положения, которое обеспечивает наилучшее освещение препарата при малом увеличении.

5.Изучить препарат при малом увеличении и перейти на большое:

а) сменить объектив, повернув револьвер по часовой стрелке до защелкивания засечки;

б) глядя в окуляр и осторожно вращая на себя макрометрический винт, до-

биться появления объекта в поле зрения; в) используя микрометрический винт (поворачивая не более, чем на 5 делений)

получить четкое изображение деталей.

6.Левая рука должна постоянно находиться на микрометрическом винте (его слегка поворачивают в обе стороны для просматривания деталей объекта, лежащих на разной глубине от поверхности среза).

7.Нельзя вынимать препарат из под объектива большого увеличения, не подняв тубус кверху.

8.После изучения препарата поставить объектив малого увеличения.

9.Запрещается развинчивать какие-либо части микроскопа. В случае неисправности обращаться к преподавателю.

Задание 1

УСТРОЙСТВО СВЕТОВОГО МИКРОСКОПА

1.Основание микроскопа

2.Тубусодержатель

3.Тубус

4.Револьвер

5.Столик

6.Макрометрический винт

7.Микрометрический винт

8.Винт конденсора

9.Окуляр

10.Объективы

11.Конденсор с ирисовой диафрагмой

12.Зеркало

Задание 2.

 

Задание 3.

РАССЧИТАЙТЕ РАЗРЕШАЮЩУЮ СПО-

 

ЕДИНИЦЫДЛИНЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ

СОБНОСТЬ ВАШЕГО МИКРОСКОПА, ИС-

ПРИ МИКРОСКОПИРОВАНИИ:

ПОЛЬЗУЯ СЛЕДУЮЩУЮ ФОРМУЛУ:

 

 

λ /нм/

1

мкм =

d = 2A ,

 

 

где λ — длина волныкванта света (420 нм);

1

нм =

 

 

А— апертураобъектива(указананаобъективе).

1

А =

 

 

 

Задание 4.

ЭТАПЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ

 

ЭТАП

ЦЕЛЬ

ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ

 

 

 

 

1.

Фиксация(формалинидругиехимии-

 

Около 12 часов

ческие фиксаторы, замораживание)

 

 

 

 

 

 

 

2.

Дегидратация спиртами возраста-

 

От 6 до 12 часов

ющей концентрации (от 70 до 100%)

 

 

 

 

 

 

 

3.

Пропитывание парафином

 

От 6 до 12 часов

 

 

 

 

4.

Изготовление срезовтканина микро-

 

 

томе толщиной 4–6 мкм

 

 

 

 

 

 

5.

Окрашивание срезов

 

 

 

 

 

 

6.

Заключение в бальзам

 

 

 

 

 

 

НЕКОТОРЫЕ ОСНОВНЫЕ И КИСЛЫЕ КРАСИТЕЛИ

Основные красители

Цвет

Кислые красители

Цвет

 

 

 

 

Толуидиновый синий

Синий

Оранж G

Оранжевый

 

 

 

 

Метиленовый синий

Синий

Кислый фуксин

Красный

 

 

 

 

Метиловый зеленый

Зеленый

Эозин

Розовый

 

 

 

 

Пиронин G

Красный

Анилиновый синий

Синий

 

 

 

 

Задание 5.

ОКРАСИТЬ ПАРАФИНОВЫЙ СРЕЗ ГЕМАТОКСИЛИН-ЭОЗИНОМ

Методика окрашивания:

1.Удалить парафин из срезов в трех порциях ксилола (по 4–5 мин. в каждой).

2.Удалить из срезов ксилол в абсолютном спирте (2–3 мин.).

3.Гидратировать срезы, проведя их через спирты нисходящей концентрации и дистиллированную воду (по 2–3 мин.).

4.Окрасить в водном растворе гематоксилина (2–3 мин.).

5.Промыть сначала в водопроводной, а затем — в дистиллированной воде (по 2–5 мин.).

6.Окрасить в водном растворе эозина (1 мин.).

7.Промыть в дистиллированной воде (1 мин.).

8.Дегидратировать в спиртах восходящей кон;центрации (по 1–2 мин.)

9.Просветлить в ксилоле (2–3 мин.).

10.Заключить окрашенные срезы в бальзам.

Задание 6.

ЗАПОЛНИТЕ ТАБЛИЦУ, ИСПОЛЬЗУЯ РЕЗУЛЬТАТЫ ОКРАСКИ

Краситель

Химическая природа

Цвет окраски

Сходство к этому

Какие компоненты клетки

красителю

окрашиваются

 

 

 

Гематоксилин

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Эозин

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Задание 7.

 

 

 

ОСНОВНЫЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

 

1. .............................................................................................................

 

4. ..............................................................................................................

 

 

2. .............................................................................................................

 

5. ..............................................................................................................

 

 

3. .............................................................................................................

 

 

 

 

Задание 8.

Задание 9.

Задание 10.

СПИНАЛЬНЫЙ ГАНГЛИЙ

ДИССОЦИИРОВАННЫЕ МЫШЕЧНЫЕ

МАЗОК КРОВИ

Окраска: гематоксилин-эозин

ВОЛОКНА

Окраска: Романовского-Гимза

 

Окраска: галлоцианин

(азур, эозин)

1.

нейрон

1.

мышечные волокна

1.

эритроциты

2.

цитоплазма

2.

ядра

2.

нейтрофилы

3.плазмолемма

4.ядро

5. ядрышко

Подпись преподавателя

 

_____________________

 

«__» ____________ 200_

Описание микропрепаратов по теме «ВВЕДЕНИЕ. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ»

Препарат № 1. Спинальный ганглий. Окраска: гематоксилин-эозин.

При малом увеличении микроскопа найти крупные округлой формы нервные клетки, которые образуют скопления на периферии ганглия. Это одни из наиболее крупных клеток организма человека. Они выглядят округлыми, поскольку их тонкие отростки не видны. В большинстве клеток есть крупные пузырчатые ядра, в которых видны ядрышки.

При большом увеличении зарисовать одну нервную клетку спинномозгового узла. На рисунке обозначить: 1) нейрон, 2) ядро, 3) ядрышко, 4) клеточную оболочку, 5) цитоплазму.

Препарат № 2. Диссоциированные мышечные волокна. Окраска: галлоцианин.

При малом увеличении микроскопа четко видны длинные, расположенные параллельными пучками тяжи. Это волокна поперечнополосатой мышечной ткани. При большом увеличении микроскопа в каждом мышечном волокне обнаруживается поперечная исчерченность и несколько продолговатых темных ядер, расположенных сразу под мембраной волокна.

При большом увеличении зарисовать 1–2 мышечных волокна (симпласта). На рисунке обозначить: 1) мышечные волокна, 2) ядра.

Препарат № 3. Мазок крови.

Окраска: Романовского-Гимза (азур, эозин).

При малом увеличении микроскопа видны очень мелкие округлые оксифильно окрашенные клетки без ядра — эритроциты. Между ними встречаются светлые клетки с темными ядрами округлой (лимфоциты) или сегментированной формы (гранулоциты).

При большом увеличении микроскопа в эритроцитах видна более светлая центральная область. Среди ядросодержащих клеток преобладают нейтрофильные гранулоциты, ядро которых состоит из 3–5 сегментов.

ТЕМА 2. ОСНОВЫ ЦИТОФИЗИОЛОГИИ

Дать определение:

Клетка — .......................................................................................................................

Задание 1.

СХЕМА СТРОЕНИЯ КЛЕТКИ

1.Цитолемма.

2.Гранулярная эндоплазматическая сеть.

3.Агранулярная эндоплазматическая сеть.

4.Комплекс Гольджи.

5.Лизосомы.

6.Рибосомы.

7.Ядро.

8.Ядрышко.

9.Поры ядерной оболочки.

10.Центросома (клеточный центр).

11.Митохондрии.

12.Митохондрия с везикулярными кристами.

13.Пиноцитозные пузырьки (эндосомы).

14.Микроворсинки.

Задание 2. ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ КЛЕТКИ

КЛЕТКА

Поверхностный аппарат

Ядро

Цитоплазма

1. .............................................

1. ..............................................

1. .................................................

2. .............................................

2. ..............................................

2. .................................................

3. .............................................

3. ..............................................

3. .................................................

 

4. ................................................

 

Задание 3.

СТРОЕНИЕ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ

 

1.

Молекулы фосфолопидов.

 

2.

Интегральный белок.

 

3.

Полуинтегральный белок.

 

4.

Периферические белки.

 

5.

Углеводный компонент гликокаликса.

Перечислить

 

Перечислить

функциональные группы мембранных

 

функции гликокаликса:

белков:

 

 

1. .......................................................................

 

1. ......................................................................

2. .......................................................................

 

2. ......................................................................

3. .......................................................................

 

3. ......................................................................

4. .......................................................................

 

4. ......................................................................

5. .......................................................................

 

 

Задание 4. КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ

Дать определения:

Клеточный рецептор ....................................................................................................................................

.............................................................................................................................................................................................................

Лиганд .......................................................................................................................................................................

КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ

Поверхностные мембранные

Ядерные

Цитоплазматические

рецепторы

рецепторы

рецепторы

(лиганды — гидрофильные

(лиганды — гидрофобные

(расположены в мембранах

молекулы)

молекулы)

органелл)