- •Методическая разработка
- •I курса медико-диагностического факультета в I семестре
- •Изучение набухания и растворения вмс
- •Набухание каучука
- •Набухание желатина в зависимости от значения рН
- •Лабораторная работа № 2
- •Определение изоэлектрической точки белка
- •Реакции полимеризации
- •Реакции поликонденсации
- •Классификация вмс
- •Сравнительная характеристика свойств растворов вмс и золей
- •Изоэлектрические точки некоторых белков
- •Методы экспериментального определения иэт белков
- •И других полиамфолитов
- •Золотые числа некоторых полимеров (мг)
Сравнительная характеристика свойств растворов вмс и золей
|
Растворы ВМС |
Золи |
|
Устойчивы, образуются самопроизвольно |
Не устойчивы, образуются не самопроизвольно |
|
Гомогенные |
Микрогетерогенные |
|
Концентрация 10-15 % |
Концентрация менее 1% |
|
Устойчивость обусловлена эффектом сольватации |
Устойчивость обусловлена наличием ДЭС |
|
Набухают и могут растворяться |
Не набухают и не растворяются |
|
При боковом освещении дают размытый конус Тиндаля |
Образуют четкий конус Тиндаля |
Полиэлектролиты — это ВМС, содержащие ионогенные группы. По характеру ионогенных групп полимеры делятся на три вида.
1. Полиэлектролиты кислотного типа содержат кислотные ионогенные группы, являющиеся донорами протонов. К ним относятся карбоксильные и сульфогруппы:
–СООН
– СOO‾
+ H+
–SO3Н
–SO3‾
+ H+
Примерами полиэлектролитов данного типа являются растворимый крахмал и гуммиарабик.
2. Полиэлектролиты основного типа содержат основные ионогенные группы, являющиеся акцепторами протонов. К ним относятся аминогруппа, присоединяющая протон и превращающаяся в катион аммония:
–NH2
+ H+
–NH3+
3. Амфотерные полиэлектролиты (полиамфолиты) — это ВМС, содержащие и кислотные, и основные группы. Важнейшими из них являются белки. Кислотно-основное равновесие в растворах белков можно представить схемой:

Особым состоянием белка является его изоэлектрическое состояние, в котором суммарный заряд белковой молекулы равен нулю. Упрощенно можно считать, что в изоэлектрическом состоянии белок существует в виде биполярного иона:
+H3N – R – COO‾
Изоэлектрическая точка (ИЭТ или pI) — это значение рН раствора, при котором полиамфолит находится в изоэлектрическом состоянии. Для большинства белков рI изменяется в диапазоне 4,5-6,0 (таблица 5).
Таблица 5.
Изоэлектрические точки некоторых белков
|
Белок |
ИЭТ |
|
Сывороточный альбумин Гемоглобин Рибонуклеаза Цитохромы С |
4,9 6,7 9,5 10,7 |
В ИЭТ белки имеют специфические свойства, что объясняется особой конфигурацией их молекул. Возможные конфигурации белковой молекулы представлены на следующей схеме:

В изоэлектрическом состоянии белковая молекула имеет конфигурацию α-спирали, что соответствует ее состоянию при физиологических значениях рН. При увеличении кислотности среды (рН < ИЭТ) молекула приобретает линейную конфигурацию вследствие отталкивания положительно заряженных катионов аммония. При увеличении щелочности среды (рН > ИЭТ) молекула также становится линейной в результате отталкивания отрицательно заряженных карбоксилат-ионов.
Методы экспериментального определения иэт белков
1) Путем измерения степени набухания белков в растворах с различной кислотностью. В ИЭТ степень набухания белка минимальна (рисунок 3).

Рисунок 3. Влияние кислотности среды на степень
набухания полиамфолита
2) Путем измерения степени коагуляции белка в растворах с различной кислотностью. В ИЭТ степень коагуляции максимальна (рисунок 4).

Рисунок 4. Влияние кислотности среды на степень
Важнейшими факторами, вызывающими коагуляцию белка и других ВМС являются:
добавление электролитов (высаливание),
добавление нерастворителей — жидкостей, в которых полимер практически не растворим.
Коагулирующее действие, как электролитов, так и нерастворителей обусловлено их десольватирующем действием; они связывают молекулы растворителя, уменьшая тем самым плотность сольватной оболочки вокруг молекул ВМС.
3) Путем измерения электрофоретической подвижности белков (u) в растворах с различной кислотностью. В ИЭТ электрофоретическая подвижность белков равна нулю, так как их молекулы электронейтральны (рисунок 5).

Рисунок 5. Кривая электрофоретической подвижности белков
