3 курс / Микробиология / Лекции / 28_Virusy_poliomielita

ТЕМА № 28 "ВИРУСЫ ПОЛИОМИЕЛИТА, КОКСАКИ, ЕСНО. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА"

Диагностика полиомиелита

     Возбудитель полиомиелита входит в семейство Picornaviridae, род Enterovirus.

     Исследуемый материал: испражнения (вирусы полиомиелита присутствуют длительное время и в больших концентрациях), в первые дни заболевания материалом для исследования могут служить смывы из носоглотки. Кроме того, могут исследоваться кровь, спинномозговая жидкость, моча. В случае летального исхода – секционный материал: кусочки ткани головного и спинного мозга, миокарда, печени, поджелудочной железы, селезёнки, легких, лимфатических узлов.

     Используют методы диагностики: вирусологический, серологический.

     Вирусологический метод. Предполагает обнаружение вируса в исследуемом материале и последующую его идентификацию. После приготовления проб, обработки антибиотиками, ими обрабатывают перевиваемые культуры клеток, например, Helia, Hep-2 и др. индикацию осуществляют по цитопатическому действию (ЦПД) и цветной пробе (ЦП). Идентифицируют с помощью типоспецифических стандартных сывороток к трем типам полиовируса, в РН ЦПД, РН ЦП, реакции преципитации.

     Серологический метод. Проводится путем исследования парных сывороток крови обследуемого в реакции нейтрализации ЦПД, в реакции нейтрализации ЦП, в реакции связывания комплемента со стандартными штаммами трех типов вирусов полиомиелита (антигенами трех типов). Диагностическое значение имеет лишь четырехкратное и более нарастание титра антител во второй сыворотке, взятой через 2-3 недели от начала заболевания.

Диагностика инфекции, вызванной вирусами Коксаки

     Вирусы выделены в местечке Коксаки (штат Нью-Йорк). Входят в семейство Picornaviridae, род Enterovirus.

     Исследуемый материал. В первые дни болезни вирусы Коксаки можно обнаружить в крови, в смывах из зева, испражнениях, спинномозговой жидкости. Последний материал особенно удобный, т.к. спинномозговая жидкость стерильна и её можно вводить мышам-сосункам или в культуру клеток без предварительной обработки антибиотиками.

     Используют методы диагностики: вирусологический, серологический.

     Вирусологический метод. Индикацию вирусов Коксаки осуществляют путем введения исследуемого материала в культуру клеток или в организм новорожденных мышей-сосунков (1-3 дневных). Клинические проявления, обусловленные вирусом Коксаки А, возникают на 2-5 день и характеризуются появлением парезов и вялых параличей мышц спины и конечностей. Клинические проявления, обусловленные вирусом Коксаки В, возникают на 4-9 день и характеризуются появлением спастических параличей. Идентификация обнаруженных вирусов осуществляется в реакции нейтрализации на животных со специфическими диагностическими сыворотками.

     В культуре клеток вирусы обнаруживают по ЦПД, ЦП. Идентифицируют в реакции нейтрализации ЦПД, ЦП со специфическими диагностическими сыворотками.

     Полимеразная цепная реакция. Применяется в диагностике Коксаки – вирусных инфекций при выделении штаммов, которые не культивируются в клеточных культурах.

     Серологический метод. Выявляют специфические антитела к вирусам Коксаки в парных сыворотках крови больных в реакции нейтрализации ЦПД, ЦП и РСК.

Диагностика инфекции, вызванной вирусами ЕСНО 

     Вирусы ЕСНО входят в семейство Picornaviridae, род Enterovirus.

     Исследуемый материал: слизь из носоглотки, испражнения, кровь, спинномозговая жидкость.

     Используют методы диагностики: вирусологический, серологический, молекулярно-генетический.

     Вирусологический метод. Обнаруживают вирус только в культурах клеток Животные не чувствительны. Одной суспензией исследуемого материала, после выдерживания с антибиотиками, обрабатывают 2-3 культуры клеток (первично-трипсинизированные или перевиваемые). Индикация вируса осуществляется по ЦПД, ЦП, т.к. в культурах клеток идёт активная репродукция вируса с проявлением типичного для энтеровирусов цитопатического эффекта.

     Идентификация проводится в реакции нейтрализации ЦПД, реакции нейтрализации ЦП, РТГА с диагностическими типовыми иммунными сыворотками.

     Серологический метод. Выявляют нарастание титров антител, как правило, вируснейтрализующих в парных сыворотках крови, взятой у обследуемого. Диагностическое значение имеет 4-х кратное нарастание. Используют реакцию нейтрализации ЦПД, ЦП. Можно применять РСК и РТГА.

     Молекулярно-генетический метод. Используют полимеразную цепную реакцию, молекулярную гибридизацию. 

2