Вся микробиология

Среды для культивирования: сахарный МПБ, сахарный МПА, кровяной МПА, сывороточный МПА и сывороточный МПБ. На жидких питательных средах дают придонный или пристеночный рост; на кровяном МПА — мелкие, непигментированные колонии с зоной полного гемолиза (β-гемолиз у S. pyogenes); на 10% ЖСА роста не дают (отличие от стафилококка).

Биохимические свойства

Каталазоотрицательны. Оксидазоотрицательны. Ферментируют углеводы короткого пестрого ряда Гисса до кислоты; глюкозу и маннит ― только в анаэробных условиях (отличие от стафилококка); не ферментируют инулин (отличие от пневмококка).

Антигены

Классификация стрептококков по антигенной структуре разработана Р. Лэнсфилд. Пo полисахариду клеточной стенки (субстанция S) стрептококки разделяют на 20 серологических групп, обозначаемых заглавными буквами латинского алфавита от А до V. Внутри серогрупп по специфичности белковых антигенов М, Р и Т выделяют серовары. Серовары обозначают цифрами.

•пирогенный токсин. II. Ферменты:

•гиалуронидаза;

•стрептокиназа (фибринолизин);

•ДНКаза;

•протеиназа.

III.Структурные компоненты:

•капсула (стрептококки групп А и В);

•липотейхоевые кислоты, белки клеточной стенки;

•М-белок.

IV. Перекрестно реагирующие антигены (ПРА). Примеры:

•гиалуроновая кислота стрептококков сходна с тканью канальцев почек Æ гломерулонефриты;

•М-белок стрептококков аналогичен по антигенным свойствам миозину миокарда Æ миокардиты;

•полисахарид стрептококков перекрестно реагирует с гликопротеинами сердечных клапанов Æ эндокардиты.

Эпидемиология патогенез и клиника заболевания (особенности)

Стрептококки являются представителями микрофлоры кожи, слизистой полости рта, верхних дыхательных путей, кишечника (энтерококки), половых путей (S. agalactiae) человека.

Многие из них являются условно-патогенными микроорганизмами и вызывают различные патологические процессы лишь при ослаблении иммунной защиты.

Источник инфекции: больной человек или носитель. Механизмы и пути передачи: воздушно-капельный и контактный.

Вызываемые заболевания: 1) гнойно-септические инфекции; 2) тонзиллит (ангина); 3) скарлатина; 4) рожа; 5) ревматизм; 6) гломерулонефрит; 7) носительство.

Микробиологическая диагностика

Исследуемый материал: гной, слизь, мокрота, кровь, моча, ликвор и др. I. Бактериоскопический метод.

Микроскопии мазков, окрашенных по Граму — грамположительные кокки, расположенные в виде цепочек.

II. Бактериологический метод. Этапы метода:

1.Посев на сахарный МПБ (среда накопления) — придонный или пристеночный рост.

2.Посев на кровяной МПА — мелкие непигментированные колонии с зоной полного гемолиза (β-гемолиз у S. pyogenes).

3.Откол подозрительных колоний на косячок сывороточного или сахарного МПА с целью накопления чистой культуры.

4.Проверка чистоты выделенной культуры — микроскопия мазков, окрашенных по Граму (однородная популяция грамположительных кокков, расположенных короткими или длинными цепями).

5.Постановка диагностических тестов на отличие семейств

Streptococcaceae от Micrococcaceae: оксидаза (-), каталаза (-), коагулаза (-),

лецитиназа (-), анаэробное сбраживание глюкозы и маннита.

6.Дифференцировка видов

7.Внутривидовая дифференцировка (табл. «Тесты отличия S. pyogenes от

S. pneumoniae»).

Определение серогруппы в реакции преципитации. Определение антибиотикограммы.

III. Серологический метод. Постановка иммунологических реакций (РСК) для определения антител — антистрептолизина; антистрептодерназы и др.

Иммунитет

Антимикробный и антитоксический. После перенесенной скарлатины, в отличие от других стрептококковых инфекций, остается прочный антитоксический иммунитет. Его напряженность проверяется постановкой внутрикожной пробы с эритрогенным токсином (проба Дика).

При отсутствии иммунитета проба Дика положительная; при наличии антитоксина — отрицательная.

Профилактика и лечение

Специфическая профилактика стрептококковых инфекций не разработана. Для предупреждения хронических инфекций могут быть использованы аутовакцины. Для лечения используют антибиотики пенициллинового ряда, сульфаниламидные препараты.

Пневмококки имеют три основных антигенных комплекса:

1 — полисахаридный антиген клеточной стенки (субстанция S);

2— капсульный антиген (полисахарид);

3— М-белок.

По капсульному полисахаридному антигену пневмококки разделяют на 83 сероварианта, 56 из них разбиты на 19 групп, 27 представлены самостоятельно.

Факторы патогенности

I.Структурные:

•капсула — обладает антифагоцитарной и антикомплементарной активностью;

•М-белок клеточной стенки — фактор адгезии.

II.Ферменты агрессии:

•гиалуронидаза;

•экзопротеиназа;

•нейраминидаза. III. Токсины:

•пневмолизин — мембранотоксин, идентичен О-стрептолизину S. pyogenes;

•лейкоцидин.

Экология и распространение

Пневмококки являются условно-патогенными микроорганизмами и входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей человека. При наличии предрасполагающих факторов (переохлаждение, снижение активности секреторного IgA, макрофагов) может возникнуть эндогенная пневмококковая инфекция. Выделение пневмококка от больного или носителя в окружающую среду приводит к развитию экзогенной инфекции: острых и хронических заболеваний дыхательного тракта, менингита, сепсиса, ползучей язвы роговицы, отита и других гнойновоспалительных заболеваний.

Микробиологическая диагностика.

Исследуемый материал: слизь, мокрота, гной, ликвор, кровь (в зависимости от формы пневмококковой инфекции).

I. Бактериоскопический метод.

Микроскопия мазков окрашенных по Леффлеру, Граму и Бурри-Гинсу (на капсулу).

II. Бактериологический метод. Этапы метода:

1.Посев (не позднее 1−2 часов с момента забора) на 5% кровяной МПА.

2.Культивированиев капнофильныхусловиях 24 часа при температуре 37°С:

•учет культуральных свойств (колонии с α-гемолизом);

•микроскопия мазков из колоний с α-гемолизом (окраска по Граму и на капсулу);

•откол подозрительных колоний на сывороточный МПА (МПБ);

•подсчет колоний с α-гемолизом.

3.Определение чистоты культуры.

4.Постановка диагностических тестов: каталаза (-); коагулаза (-); среда с оптохином (-); среда с желчью (лизис); ферментация инулина (+).

5.Серотипирование с противопневмококковыми сыворотками.

6.Определение антибиотикограммы.

III. Экспресс-методы.

1.Определение антигена капсулы в реакции «набухание капсулы». Учет с помощью фазово-контрастного микроскопа.

2.Обнаружение антигена в сыворотке или ликворе (РСК, латексагглютинация, встречный иммуноэлектрофорез).

Иммунитет. Типоспецифический, нестойкий, высокий удельный вес хронических заболеваний.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики пневкокковых инфекций используются вакцины, приготовленные из высокоочищенных капсульных полисахаридов сероваров, пнемококков, чаще других вызывающих заболевания(1, 2, 3, 4, 6А, 7, 8, 9, 12, 14, 18С, 19, 25).

Лекция 15

Энтеробактерии — характеристика семейства. Эшерихии. Шигеллы. Сальмонеллы. Иерсинии.

•единство морфологии — короткие, не образующие спор палочки с закругленными концами, имеют размеры 0,3−1,0 x 1,0−6,0 мкм, подвижны (перитрихи) или неподвижны;

•отрицательная окраска по Граму;

•факультативные анаэробы или аэробы;

•хемоорганотрофы;

•хорошо растут на простых питательных средах;

•оксидазоотрицательны;

•каталазоположительны;

•ферментация глюкозы (и ряда других углеводов) с образованием кислоты и газа, или только кислоты;

•отсутствие протеолитических свойств;

•восстанавливают нитраты в нитриты;

•место обитания — кишечный тракт и дыхательные пути.