Вся микробиология

Лекция 20

Изогнутые бактерии. Спирохеты и другие спиральные бактерии. Микробиологическая диагностика возвратного тифа, возвратной клещевой лихорадки, лайм-боррелиоза и лептоспироза. Методы лабораторной диагностики сифилиса.

Borrelia recurrentis — возбудитель эпидемического возвратного тифа. Borrelia duttoni, Borrelia caucasica, Borrelia persica, Borrelia hispanica, Borrelia parkeri — возбудители эндемического возвратного тифа.

Borrelia burgdorferi — возбудитель лайм-боррелиоза.

Морфология боррелий

Крупные спиралевидные микроорганизмы, имеющие 3−8 неравномерных крупных завитков, не образуют спор, капсул. Очень подвижны, совершают сгибательные, вращательные, поступательные движения. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Грамотрицательны. По Романовскому-Гимзе — сине-фиолетового цвета.

Культуральные свойства

Строгие анаэробы. Прихотливы к питательным средам и условиям культивирования. Оптимальная температура 28 °С. Растут на средах с сывороткой крови и кусочками тканей. Рост скудный, видимым становится через 4−7 суток.

Эпидемический возвратный тиф

Эпидемиология

Источник инфекции — больной человек. Переносчик — вши.

Патогенез и клиника

Попавшие в организм бактерии захватываются фагоцитами и размножаются в их цитоплазме. К окончанию инкубационного периода боррелии в большом количестве оказываются в кровотоке, где разрушаются под действием антител и комплемента. Выделяется эндотоксин (ЛПС), под его действием повышается температура, появляется головная боль. Повреждаются клетки ЦНС, кровеносной системы, паренхиматозные органы. Часть боррелий в тканях изменяют антигенную структуру (ускользают от действия первично синтезированных антител) и повторно выходят в кровь. Запускается синтез нового пула антител. После нескольких приступов (2−3, иногда до 5) образуется пул гетерогенных антител, которые полностью уничтожают возбудитель.

Лихорадочный период продолжается 5−7 дней. Иммунные механизмы удаляют боррелии из кровотока — приступ заканчивается.

Иммунитет гуморальный, нестойкий, не перекрестный с другими боррелиозами.

Лабораторная диагностика

Включает бактериологический и серологический методы Для бактериоскопии кровь необходимо брать в начале лихорадочного

периода (максимальная концентрация боррелий). Кровяные мазки окрашивают по Романовскому-Гимзе или метиленовым синим.

Для выявления антигенов боррелий в исследуемом материале можно использовать РИФ, ИФА.

Серологический метод. Используют реакцию иммобилизации боррелий (РИБ). Исследуемый материал — сыворотка больного, которую смешивают с музейной культурой Borrelia recurrentis. Если в сыворотке больного есть антитела, то через 18−20 часов после инкубации в термостате наступает обездвиживание боррелий. Учет результатов — микроскопирование препарата «висячая капля» в «темном» поле или фазовом контрасте. Если процент обездвиживания более 50%, реакция считается положительной. Для выявления антител также используют ИФА или непрямую РИФ.

Профилактика неспецифическая: уничтожение вшей. Лечение — антибиотикотерапия (пенициллины, тетрациклины).

ЛЕПТОСПИРЫ Лептоспироз — острое природно-очаговое зоонозное инфекционное

заболевание, протекающее с интоксикацией, миалгией, поражением почек, печени, нервной и сосудистой систем.

Таксономия

Семейство Leptospiraceae включает два вида. Leptospira interrogans — возбудитель лептоспироза.

Вид включает в себя 38 серогрупп и более 200 сероваров, многие из которых имеют собственные названия. Основные серовары:

•L. icterohaemorragiae

•L. grippotyphosa

•L. canicola

•L. pomona

Leptospira biflexa — сапрофит

Морфология

Длинные извитые нити, много (12−20) равномерных плотно прилегающих друг к другу завитков. За счет вторичных изгибов имеют форму латинской буквы «S» или «С». Спор и капсул нет. Активная подвижность за счет аксиальных фибрилл (периплазматических жгутиков). Плохо окрашиваются анилиновыми красителями, поэтому лептоспиры лучше изучать в «темном» поле. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в розовый цвет.

Культуральные свойства

По типу дыхания аэробы, микроаэрофилы. Хорошо растут на среде с 30% кроличьей сыворотки (среда Уленгута) при температуре 28−30°С; растут медленно 5−7 суток. При росте нет помутнения среды. Оценивают рост при микроскопии жидкой среды в темном поле.

Антигены

Имеются группоспецифические антигены, по наличию которых все лептоспиры разделены на 38 серогрупп, и типоспецифические поверхностные липопротеиновые антигены, по которым лептоспиры разделены на 200 серовариантов. Их определяют в реакции микроагглютинации с монорецепторными сыворотками.

Факторы патогенности:

•эндотоксин (ЛПС);

•экзотоксин;

•ферменты агрессии (гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза) - обеспечивают быстрое распространение и паразитизм возбудителя в организме больного;

•адгезины.

Эпидемиология

Источник и резервуар инфекции — животные, птицы. Лептоспиры выделяются из их организма с мочой в воду, почву.

Пути передачи: водный, реже алиментарный и контактный. Входные ворота — кожа и слизистые.

Патогенез

Возбудитель от входных ворот лимфогенным и гематогенным путем распространяется по организму. Вызывает поражение паренхиматозных органов (печени, почек и селезенки). Лептоспироз сопровождается геморрагическим синдромом, что связано с действием токсинов на эндотелий сосудов. В результате нарушается проницаемость сосудистой стенки, и появляются геморрагии. Начиная со 2-й недели заболевания возбудитель исчезает из крови и накапливается в извитых канальцах почек (возможно развитие острой почечной недостаточности).

Иммунитет пожизненный, типоспецифический, гуморальный.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования зависит от стадии заболевания: кровь, моча, сыворотка.

Микроскопический метод. Исследуют кровь на наличие возбудителя до пятого дня заболевания, мочу на 2−3 неделе. Материал микроскопируют в фазово-контрастном или темнопольном микроскопах после приготовления препарата «висячая» или «раздавленная капля». Выявляют типичную морфологию и подвижность.

Бактериологический метод. Делают посев 5−10 мл крови и мочи в жидкие сывороточные среды, культивируют при 28°С. Через 5−7 дней микроскопируют среду в «темном» поле. Идентификацию возбудителя проводят в реакции агглютинации и лизиса, РИФ, реакции иммобилизации лептоспир антисывороткой, или используют генодиагностику (ПЦР и др.) Серологический метод. Исследуют антитела, начиная со 2−3 недели. Ставят РНГА, ИФА или реакцию микроагглютинации-лизиса.

Антибиотикотерапия (пенициллины, цефалоспорины, доксициклин).

•эндотоксин,

•липопротеины (участвуют в развитии иммунопатологических процессов).

При первичном сифилисе исследуют экссудат (отделяемое) из язвышанкра, соскоб из элементов сыпи и пунктат из лимфоузлов на наличие возбудителя.

Из материала готовят препарат «висячая» или «раздавленная капля» и микроскопируют его в «темном» поле или в фазово-контрастном микроскопе.

Серологический метод включает в себя 2 группы реакций:

1)ускоренные (отборочные), с нетрепанематозными (кардиолипиновыми) антигенами;

2)подтверждающие, с трепонематозными антигенами.

Ускоренные отборочные реакции проводят для выявления антител при массовых обследования.

1.Реакция микропреципитации с сывороткой больного и кардиолипиновым антигеном (жировая вытяжка из сердца быка), холестерином и лецитином.

2.Реакция Вассермана (РСК) с кардиолипиновым антигеном. Подтверждающие реакции.

1.Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). С этой целью используют сыворотку больного, живые тканевые трепонемы и комплемент. Реакцию ставят в стерильных пробирках и через 20 часов инкубации в термостате оценивают в темном поле результаты по проценту обездвиженных трепонем. Если обездвижены более 50%

трепонем, реакция положительная, 10−50% — слабоположительная, меньше — отрицательная.

2.РНГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом.

3.ИФА с трепонемным антигеном.

Профилактика сифилиса — только неспецифическая. Выявление, изоляция и лечение больных, контроль за эффективностью лечения; обязательное выявление источника инфекции и контактных с ним лиц.

Лечение — антибиотикотерапия. Пенициллины или цефалоспорины назначают курсом до полного излечения.

КАМПИЛОБАКТЕРИИ Кампилобактериоз — острое инфекционное зоонозное заболевание,

характеризующееся синдромом общей интоксикации, преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта и возможностью генерализации патологического процесса.

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Spirillaceae. Род Campylobacter.

Виды: C.jejuni, C.lari, C.coli, С. fetus Род Helicobacter, вид: H.pylori