29. Определить гиалуронидазную активность бактерий по готовым результатам. Гиалуронидаза.
Принцип
метода:
В пробирку с гиалуроновой кислотой
(экстракт пупочных канатиков новорождённых)
вносят испытуемую культуру. После
инкубации в термостате добавляют реактив
(15 % уксусная кислота), вызывающий
свёртывание гиалуроновой кислоты, и
учитывают результаты. При положительном
результате, вследствие расщепления
гиалуроновой кислоты ферментом
гиалуронидазой сгустка не образуется.
При его отсутствии - образуется сгусток.
Методика
определения:
В начале надо приготовить гиалуроновую
кислоту — субстрат, на который действует
гиалуронидаза. Гиалуроновую кислоту
получают из тщательно отмытых от крови
пупочных канатиков новорождённых. Их
взвешивают, измельчают, заливают двойным
количеством дистиллированной воды,
доводят до кипения, фильтруют, фильтрат
титруют, то есть находят тот его объём,
который с 15 % СН
COOH даёт
типичный сгусток.
К
экзаменационному билету прилагается
микропрепарат.