Диагностика
Материал для исследования:
У женщин:
• отделяемое влагалища;
• первая порция мочи.
У мужчин:
• отделяемое уретры;
• первая порция мочи.
Диагностика основана на выявлении клинических признаков заболевания и обнаружении в исследуемом материале Trichofrionas vaginalis, однако при постановке диагноза не опираются исключительно На клинику по следующим причинам: .
1) указанные клинические симптомы могут быть проявлениями других инфекций урогенитального тракта;
2) классический и патогномоничный для трихомониаза «клубничный» симптом встречается только у 2% пациенток;
3) пенистые выделения, которые можно связать с активным ростом трихомонад, наблюдаются примерно у 12 % инфицированных женщин.
В настоящее время применяют четыре лабораторных метода определения Trichomonas vaginalis: микроскопический, культуральный, иммунологический и генодиагностический.
Как и при других инфекционных заболеваниях, при трихомониазе диагностическая эффективность тестов в значительной степени зависит от качества взятия клинического материала для исследования и его правильной транспортировки в лабораторию. Самые лучшие тесты могут давать неправильные результаты при низком качестве взятия образца. Методики взятия образцов для тестирования, их хранения и транспортировки зависят от пола пациента, анатомической области взятия материала и метода тестирования. Врач, осуществляющий взятие материала для исследования на наличие трихомониаза, должен обеспечить:
• высокое качество взятия образца;
• точную маркировку образца;
• своевременную и правильную транспортировку образца в лабораторию.
Важно помнить, что:
• в течение 48-72 часов до взятия клинического материала обследуемый не должен получать антимикробную терапию;
• образцы из уретры у мужчин и образцы первой порции мочи (ППМ) у лиц обоего пола следует получать после задержки мочеиспускания в течение не менее 2 часов перед обследованием.
Методы, применяемые для диагностики инфекции, вызываемой Т. vaginalis
• Микроскопическое исследование нативного или окрашенного мазка отделяемого половых органов.
• Культуральное исследование.
• Методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК).
• Иммунологические методы, направленные на обнаружение трихомонадного антигена, включая иммунохроматографический стрип-тест.
• Определение антител (например, методом иммуноферментного анализа — ИФА).
Инструменты, необходимые для взятия образцов
• Вагинальное зеркало.
• Стерильный ватный/дакроновый тампон или одноразовая бактериологическая петля объемом 1 мкл и 10 мкл.
• Предметные и покровные стекла (чистые, сухие и без царапин).
• Стерильный физиологический раствор (оптимально — имеющий температуру 37 °С).
• Стерильный контейнер для сбора первой порции мочи;
• Пробирки с транспортной средой и/или средой для культивирования.
Получение и обработка образцов
Методы сбора образцов для тестирования на Т. vaginalis указаны в таблице.
Таблица
Методы взятия образцов для тестирования на Т. vaginalis
|
Образец |
Методика взятия |
|
Отделяемое влагалища |
• Очистить наружные половые органы стерильным марлевым тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором/ • Ввести во влагалище теплое гинекологическое зеркало, смоченное стерильным физиологическим раствором. • Материал собрать стерильным ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей объемом 10 мкл под контролем зрения из заднего и боковых сводов влагалища. • У женщин после гистерэктомии образцы взять с боковых сводов влагалища. • У девочек взять образцы через отверстие девственной плевы с задней стенки влагалища без использования гинекологического зеркала. • У детей и женщин, не имевших в анамнезе половых контактов с проникновением, образцы взять из преддверия влагалища. • Исследование вагинальных образцов, самостоятельно собранных пациенткой, и образцов, полученных врачом, показало сравнимые результаты при использовании культурального метода, тест-системы InPouchTM TV и МАНК |
|
Первая порция мочи у женщин |
• Образец ППМ (объемом 10-15 мл) собрать в стерильный контейнер, затем центрифугировать и исследовать осадок. Чувствительность тестов при исследовании мочи уступает таковой при исследовании вагинальных образцов |
|
Отделяемое уретры |
• При наличии свободных выделений собрать их стерильным ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей объемом 1 мкл из наружного отверстия уретры. • При отсутствии выделений перед взятием материала попросить пациента помассировать уретру скользящими движениями от основания пениса к его головке, затем осторожно ввести в уретру стерильный ватный/дакроновый тампон или одноразовую бактериологическую петлю объемом 1 мкл на глубину 2—4 см и получить выделения. Ложку Фолькмана для получения материала из уретры использовать не рекомендуется |
|
Отделяемое препуциального мешка |
• Материал из препуциального мешка собрать стерильным ватным/ дакроновым тампоном. • Стерильным тампоном, смоченным физиологическим раствором, очистить головку полового члена и внутреннюю поверхность препуциального мешка и таким образом получить образец для исследования |
|
Первая порция мочи у мужчин |
• Исследовать центрифугат (объемом 600 мкл), полученный из 20 мл первой порции мочи. • Перед взятием образцов пациент должен воздерживаться от мочеиспускания не менее 2 часов |
Рекомендации по подготовке, транспортировке и хранению образцов, предназначенных для дальнейшего микроскопического исследования нативных и окрашенных акридиновым оранжевым препаратов, культивирования и применения МАНК, представлены в таблице.
|
Метод диагностики |
Рекомендации |
Комментарии |
|
Исследование нативного препарата |
• Каплю теплого стерильного физиологического раствора (оптимальнаятемпература — 37 °С) помещают на предметное стекло. • Образцы, собранные ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей, осторожно смешивают с физиологическим раствором и накрывают покровным стеклом. • Препарат исследуют немедленно с помощью обычного светового микроскопа с применением различных методов контрастирования (светлое поле, фазовый контраст или темное поле) |
- |
|
Исследование нативного препарата |
• Микроскопическое исследование нативного препарата желательно осуществлять непосредственно после взятия образца. В тех случаях, когда требуется транспортировка, препарат следует поместить в атмосферу <;влажной камеры» в чашку Петри (на увлажненную фильтровальную бумагу) и немедленно, не допуская охлаждения, доставить в лабораторию
|
- |
|
Исследование препарата, окрашенного акридиновым оранжевым |
• Полученный материал помещают на стекло, передвигая бактериологическую петлю по его поверхности с легким нажатием. • Если образец был получен с помощью тампона, тампон прокатывают по поверхности стекла. • Подготовленный препарат должен быть промаркирован, высушен при комнатной температуре и доставлен в лабораторию. • Если препарат не может быть доставлен в лабораторию в течение 24 часов, он должен быть после высушивания фиксирован 80%этиловым спиртом в течение 3 минут, а перед окрашиванием подвергнут регидратации в течение 3 минут |
• Материал наносят на стекло тонким слоем. • Для исследования необходим люминесцентный микроскоп. • При несоблюдении правил взятия и условий доставки биологического материала (разбитые, не промаркированные, склеенные друг с другом стекла, отсутствие материала на стекле) образцы не подлежат микроскопическому исследованию |
|
Культуральный |
• Сразу после получения образец должен быть помещен в жидкую питательную среду или в транспортную среду Amies. В транспортной среде Stuart’s после 24 часов Т. vaginalis сохраняется недостаточно хорошо |
Продолжительность хранения образцов должна соответствовать рекомендациям производителя транспортных систем, но не более 12 часов при комнатной температуре. Внимание! Колебание температур губительно действует на жизнеспособность Т. vaginalis |
|
Методы амплификации нуклеиновых кислот |
Полученный образец помещают в транспортную среду, предоставляемую производителем тест-системы или в сухую пробирку. Температура и продолжительность хранения образцов должны соответствовать рекомендациям производителя тест-системы |
- |
Трихомонада (окраска метиленовым синим)
Трихомонада (окраска по Граму)
Содержание:
-
История
-
Этиология
-
Классификация
-
Патогенез
-
Симптомы трихомониаза
-
Эпидемиология
-
Лечение
-
Профилактические мероприятия
-
Диагностика
-
Список литературы
Список литературы:
-
Учебник по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии под редакцией А.А. Воробьева 2003
-
Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии под редакцией А.А. Воробьева А.С. Быкова 2003
-
Медицинская микробиология-Позднеев-2001-778с
-
Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни. Издательство «Триада – Х», Москва, 2000, с. 604;
-
Библиогр.: Бодяжина Б.И., Сметник В.П. и Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология, с 292, М., 1990;
-
Избранные разделы гинекологии, под ред. Г.М. Савельевой, М., 1984;
-
Ильин И.И. Негонококковые уретриты у мужчин, с, 153. М., 1983;
-
Кобозева Н.В. Методы обследования и лечения детей с гинекологическими заболеваниями, Л., 1978;
-
Титкинский О.Л., Новиков И.Ф. и Михайличенко В.В. Заболевания половых органов у мужчин, с. 25, Л., 1985;
-
Туранова Е.Н., Частикова А.В. и Антонова Л.В. Гонорея женщин, М., 1983.