Опыт 1. Накопление красителей в вакуоли
Цель опыта: показать различие свойств плазмалеммы и тонопласта.
Материалы и оборудование: микроскоп, предметные и покровные стекла, скальпель или нож, пинцет, препаровальная игла, фильтровальная бумага, 1М (10%) раствор KNO3, 0,01%-ного водный раствор нейтрального красного, раствор NH4OH.
Растения: бесцветный лук (Allium cepa).
Ход работы: на предметное стекло в каплю 0,01%-ного водного раствора нейтрального красного поместить эпидермис с выпуклой поверхности неокрашенного лука, закрыть препарат покровным стеклом и сразу же рассмотреть под микроскопом при малом увеличении. Если видны равномерно окрашенные в розовый цвет клетки, значит, краситель проник в вакуоль. Для доказательства того, что краска проникла через цитоплазму, надо вызвать плазмолиз содержимого клеток. Для этого, не поднимая покровного стекла, в препарат вводится плазмолитик, например, 1 М раствор KNO3. Наступивший плазмолиз говорит о том, что клетки, окрашенные нейтральным красным, – живые, краситель проник через живую протоплазму. Мертвые клетки имеют окрашенную протоплазму и ядро и не плазмолизируются в растворе солей.
Пользуясь тем, что в работе применяется нейтральный красный, обладающий индикаторными свойствами, можно определить, какова реакция клеточного сока. Для этого под покровное стекло вводят каплю щелочи, например, NH4OH. Если окраска препарата изменится, значит, клеточный сок имеет кислую реакцию.
Задание: зарисовать клетку, накопившую краску, плазмолизированную клетку и клетку при действии на нее аммиака, сделать подписи к рисункам и выводы из наблюдений.
Опыт 2. Наблюдение колпачкового плазмолиза
Цель опыта: показать различие свойств плазмалеммы и тонопласта.
Материалы и оборудование: микроскоп, предметные и покровные стекла, скальпель или нож, пинцет, препаровальная игла, фильтровальная бумага, 1М раствор KCNS, 0,01%-ного водный раствор нейтрального красного, раствор NH4OH.
Растения: окрашенный лук (Allium cepa).
Колпачковый плазмолиз возникает под действием солей, проникающих через плазмалемму в мезоплазму и вызывающих её набухание. Сквозь тонопласт за время опыта соли не проникают.
Ход работы: срез эпидермиса выпуклой стороны чешуи окрашенного лука поместить на предметное стекло в каплю 1 М раствора KCNS и накрыть покровным стеклом. Следить, чтобы на срезе были клетки, содержащие в клеточном соке антоциан. Препарат рассмотреть под микроскопом сначала на малом увеличении (окуляр х15, объектив х8), а затем – на большом (окуляр х15, объектив х40).
Поскольку взят гипертонический раствор, во всех клетках будет наблюдаться сильный плазмолиз. Слой протоплазмы, окружающий вакуоль, имеет заметную толщину. Со стороны поперечных стенок протоплазма имеет вид колпачков на полюсах.
Задание: зарисовать клетку в состоянии колпачкового плазмолиза, сделать вывод о проницаемости мембран протоплазмы.
Опыт 3. Наблюдение плазмолиза в различных плазмолитиках
Цель опыта: изучить влияние разных солей на форму и степень плазмолиза.
Материалы и оборудование: микроскоп, предметные и покровные стекла, скальпель или нож, пинцет, препаровальная игла, фильтровальная бумага, 1М (10%) раствор KNO3, 0,8М Са(NO3)2, часы.
Растения: окрашенный или бесцветный лук (Allium cepa).
Ход работы:
Поместить кусочки эпидермиса чешуи лука на предметное стекло в капли растворов 1М раствор KNO3, 0,8М Са(NO3)2. Накрыть препараты покровным стеклом (время от времени вводить под покровные стекла новые капли растворов). Записать время погружения срезов в растворы и сразу приступить к наблюдению под микроскопом. Необходимо отмечать время наступления фаз плазмолиза (не следует учитывать периферическую зону, так как свойства цитоплазмы могут быть изменены за счет раневого раздражения), руководствуясь рис.1.
Таблица 1