Транскрипционный цикл у эукариот Л1-2014 - 11 февраля

Состав и функции базальных транскрипционных факторов дрожжей S. cerevisiae

52

Фосфорилирование С-концевого домена (CTD) РНК-полимеразы II

TFIIH

TFIIF

TFIIB

CTD содержит повторы (YSPTSPT)26-52

Фосфорилирование CTD происходит после инициации транскрипции, является сигналом перехода от инициации к элонгации транскрипции.

Возможно, CTD взаимодействует

с базальными транскрипционными факторами,

с регуляторными белками (SRB),

с белками CASP, которые инициируют сборку сплайсеосомы.

54

СTD - код

55

Модификации С-терминального домена РНК полимеразы II (Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser)

Фосфорилирование : гипофосфорилированная форма связана с преинициирующим комплексом промотора, любое фосфорилирование блокирует инициацию

гиперфосфорилированная форма обнаружена при элонгации транскрипции, фосфорилирование происходит в процессе транскрипции

Фосфорилирование по Ser 5 - (Cdk7 human, Kin28 yeast) – компонент

TFIIH - помогает привлекать к сайту транскрипции ферменты, которые добавляют метилгуанозиновый кэп к 5’концу РНК . Кроме того, отсоединяет Медиатор от полимеразы на промоторе.

Фосфорилирование по Ser 2 - Cdk9 ( Ctk1 in yeast) это каталитическая субъединица фактора элонгации транскрипции комплекса (P-TEF)b. Усиливается по мере продвижения полимеразы к 3’ концу гена.

Фосфорилирование по Ser2 и Ser5 - Киназа Cdk8 ( супрессор РНК пол В

– Srb10) и СDC2 (Cdk1 yeast)

56

Модификации С-терминального домена РНК полимеразы II (Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser)

продолжение

Tyr1 – консервативен, потенциальный сайт для тирозинкиназ, фосфорилирование наблюдается in vivo. Киназа c-Abl, только у позвоночных

Изомеризация пролина. Возможно 4 комбинации.

Регулируют активность CTD (у млекопитающих Pin1, у дрожжей ESS1). Мутации в ESS1 – влияют на 3’-процессинг пре-мРНК. Pin1, может изменять статус фосфорилирования CTD за счет ингибирования фосфатазы Fcp1 и это негативно влияет на транскрипцию.

Гликозилирование. СTD может быть модифицирован добавлением моносахарида N-ацетилглюкозамина ( O- GlcNAc) к гидроксильной группе Ser или Thr.



57