3. Определение спор сульфитредуцирующих клостридий

Определение методом прямого посева

Пробу воды 20 мл (две пробирки по 10 мл) прогревают на водяной бане в пробирках при температуре 75 ^оС в течение 15 мин для исключения вегетативных форм (при исследовании хлорированной воды прогревание проб можно не производить). Посевы заливают горячим железо-сульфитным агаром в количестве, превышающем объем воды в 2 раза. Посевы быстро охлаждают и инкубируют при 44 ^оС в течение 16 - 18 часов. Подсчитывают черные колонии, выросшие в толще питательной среды.

Результат анализа выражают в КОЕ спор сульфитредуцирующих клостридий в 20 мл воды.

Учет результатов.

Вывод: рост сульфитредуцирующих клостридий в 20 мл воды (обнаружен, не обнаружен)

4. Определение колифагов.

Используемые методы: титрационный.

Наиболее часто содержание колифагов в питьевой воде определяют титрационным методом, включающим предварительное подращивание их в среде обогащения с культурой Escherichia coli и последующим выявлением на питательном агаре бляшек колифага на газоне кишечной палочки.

Вывод: количество бляшкообразующих единиц (БОЕ) фагов кишечных палочек в 100 мл воды (указать).

5. Обнаружение бактерий родов сальмонелла и шигелла.

Посев исследуемой воды в количестве 1 л на среды накопления: селенитовый бульон, магниевая среда. Инкубация при 37 ⁰С 18 - 20 часов. Затем высев на элективно-дифференциальные среды и дальнейший ход исследования (такой же как при диагностике кишечных инфекций).

Учет культуральных свойств на питательных средах (магниевая, селенитовый бульон, висмут-сульфит агар, среда Плоскирева).

Вывод: сальмонеллы, шигеллы (обнаружены, не обнаружены).

Общий вывод о качестве воды.

Вопросы к заданию №2.

1. Какой метод исследования воды закреплён ГОСТом (титрационный, фильтрационный)?

2. Перечислите СПМ воды?

3. Нормативы для воды питьевой?

4. Дайте оценку полученным результатам?

5. Какие могут быть последствия?

Задание № 3. Санитарно-бактериологическое исследование продуктов.

Провести санитарно-бактериологическое исследование пастеризованного молока.

См. приложения № 3, 5, 6, 8, 10, 11.

Цель: определение доброкачественности молока и молочных продуктов по микробиологическим критериям.

Определяемые показатели: в пастеризованном молоке (перечислить).

Определение общего количества бактерий: посев из разведений продукта 10^-3 и 10^-4 по 1 мл методом Коха, подсчет числа выросших колоний после инкубации при 37 ^оС в течение 48 часов.

Результат.

Вывод.

Определение коли-титра. В молоке и молочных продуктах определяют количество грамотрицательных палочек, не образующих спор, способных к росту на среде Кесслер при 44 ^оС, не использующих цитрат в качестве единственного источника углерода (отсутствие роста на среде Козера), расщепляющих лактозу до кислоты и газа.

Ход исследования пастеризованного молока:

Основные этапы исследования	Засеваемые объёмы, мл
	1	1	1
1-й день Посев на среду Кесслер Инкубация при 44 оС 2-й день Учет результатов Отсев на среду Эндо 3-й день Учет результатов Мазок по Граму Отсев: в среду Козера в среду Гисса с лактозой 4-й день Учет результатов: среда Козера среда Гисса с лактозой

Примечание: «+» - есть рост, «-» - нет роста

Коли-титр исследуемого молока: (указать).

Вывод.

Вопросы к заданию №3.

1. Какой метод обнаружения СПМ был использован (фильтрационный, титрационный)?

2. Какие ещё показатели определяют в молоке пастеризованном?

3. Дайте оценку полученным результатам?

4. Какие могут быть последствия?

Задание №4. Микробиологическое исследование мяса.

Определить свежесть мяса методом микроскопии.

См. приложение № 9.

Цель: определение свежести мяса по степени микробной обсеменённости и выраженности распада мышечной ткани.

Отбор проб. Поверхность исследуемых мышц стерилизуют раскалённым металлическим шпателем или обжигают, после чего при помощи стерильных ножниц вырезают кусочки мяса размером 2 х 1,5 х 2,5 см. Поверхность срезов прикладывают к предметным стёклам.

Ход исследования: микроскопия мазка-отпечатка, окрашенного по Граму.

Критерии оценки: (мясо свежее, мясо сомнительной свежести, мясо несвежее).

Оценка результата исследования (вывод).

Вопросы к заданию №4.

1. Какие свойства микроорганизмов можно изучить в мазках-отпечатках, окрашенных по Граму?

2. Какие морфологические группы микроорганизмов присутствуют в мазках-отпечатках?

3. Можно ли определить вид микроорганизма, почему?

4. Дайте оценку полученным результатам?

5. Какие могут быть последствия?

Задание №5. Санитарно-бактериологическое исследование поверхностей.

Провести санитарно-бактериологическое исследование рук персонала и поверхностей объектов внешней среды.

См. приложения № 5, 6, 7, 10, 11.

Цель: контроль микробной обсеменённости оборудования и предметов, рук персонала на пищеблоках, в лечебно- профилактических и детских учреждениях, на предприятиях пищевой промышленности.

Метод исследования: (указать).

Определяемые микроорганизмы: (указать).

Исследование методом смывов на наличие кишечных палочек.

Правила взятия смывов.

Результаты исследования:

№ смыва	Откуда взят	Рост на среде цитратом	Рост на среде Эндо	Окраска по Граму	Рост на среде Гисса с лактозой
1 2 3	Руки повара

Вывод.

Исследование методом смывов на наличие стафилококков.

Результаты исследования:

№ смыва	Откуда взят	Рост на солевом бульоне	Рост на ЖСА	Окраска по Граму	Плазмокоа- гулазная активность
1. 2. 3.	Руки повара

Вывод.

Вопросы к заданию №5.

1. Какие виды микроорганизмов присутствуют в посевах?

2. Дайте оценку полученным результатам?

3. Какие могут быть последствия контаминации рук персонала, оборудования и предметов кишечной палочкой и золотистым стафилококком?