
- •Цели и задачи постановки биопробы на лабораторных животных
- •Инфекция и инфекционный процесс
- •Основные признаки, позволяющие отличать инфекционное заболевание от соматического:
- •Механизмы, пути и факторы передачи инфекции при различных формах инфекционных болезней (по л.В. Громашевскому)
- •Основные формы и классификации инфекционных процессов и заболеваний
- •I. Адгезии и колонизации.
- •II. Факторы вирулентности (агрессии и инвазии).
- •Ферменты и механизм действия
- •Характеристика бактериальных экзо- и эндо-токсинов
- •III. Факторы персистенции
- •Бактерицидная функция кожи
- •Бактерицидная активность лизоцима слюны
- •Бактерицидная активность сыворотки крови (баск)
- •Фагоцитоз
- •Иммуномодуляторы
- •1) Интерферон лейкоцитарный
- •1) Что изображено на схеме?
- •Классификация антительных препаратов
- •1) Что изображено на схеме?
- •Реакция агглютинации
- •Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рпга, рнга) Методы постановки рнга
- •Самостоятельная работа
- •Реакция иммунного лизиса
- •Реакция связывания комплемента (рск)
- •Реакция иммунной флюоресценции (риф)
- •Иммуноферментный анализ (ифа)
- •Самостоятельная работа
- •1) Что изображено на схеме?
- •2) Что изображено на схеме?
Классификация антительных препаратов
(самостоятельно, используя теоретическую справку)
Работа № 2. Антительные препараты
Цель: классифицировать предложенные антительные препараты.
Схема описания антимикробных препаратов:
Название
Классификационное положение
Действующее начало
Получение
Применение
Способ применения
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА
Классифицировать предложенные препараты:
1) Противогангренозная лошадиная сыворотка 5000 МЕ
1) Иммуноглобулин человека нормальный
1) Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка
1) Ботулиническая сыворотка тип - А 400 МЕ
1) Противосибиреязвенный глобулин
1) Гемолитическая сыворотка
1) Холерная агглютинирующая сыворотка Огава
1) Люминесцирующая туляремийная сыворотка
1) Иммуноглобулин против клещевого энцефалита человека
1) ЭСНО-диагностическая сыворотка
1) Иммуноглобулин человека против гепатита В
Работа № 3. Специфическая десенсибилизация. Метод A.M. Безредка
Цель: Изучить метод десенсибилизации по A.M. Безредка для профилактики анафилактического шока при введении в организм сывороток.
У сенсибилизированных антигеном (анафилактогеном) животных анафилактическое состояние сохраняется в течение многих месяцев, а у человека - практически всю жизнь. В целях предупреждения анафилаксии у человека А. М. Безредка предложил способ специфической десенсибилизации организма посредством дробного введения аллергена, который постепенно связывает анафилактические антитела. Предварительно определяют чувствительность организма к белку.
Методика
В сгибательную поверхность предплечья внутрикожно вводят 0,1 мл чужеродной сыворотки, разведенной 1:100. При отрицательной реакции, проявляющейся образованием папулы диаметром 9 мм с небольшим ободком покраснения, через 20-30 мин поочередно вводят 0,1 мл и 0,2 мл цельной сыворотки, а спустя 1,0 -1,5 часа - остальную дозу. В случае положительной внутрикожной пробы с инфильтратом более 10 мл десенсибилизация вначале проводится разведенной 1:100 сывороткой в дозах 0,5; 1,0; 2,0; 5 мл с интервалом 20 мин, а затем с теми же промежутками три раза цельной - 0,1; 0,2 оставшийся объем. Состояние десенсибилизации непродолжительно и у животных через 5-14 дней вновь сменяется сенсибилизацией.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА
Ситуационные
задачи:
1) Что изображено на схеме?
Охарактеризовать структуру объекта.
Описать функцию объекта.
Роль в организме.
Возможные пути образования в организме.
2) Что изображено на схеме?
Охарактеризовать структуру объекта.
Описать функцию объекта.
Роль в организме.
Возможные пути образования в организме.
3)
Что изображено на схеме?
Охарактеризовать структуру объекта.
Описать функцию объекта.
Роль в организме.
Возможные пути образования в организме.
4) Что изображено на схеме?
Охарактеризовать структуру объекта.
Описать функцию объекта.
Роль в организме.
Возможные пути образования в организме.
Теоретическая справка
1) Лечебно-профилактические сыворотки (см. материалы лекции)
2) Классификация диагностических сывороток
I. По составу:
1) поливалентные – содержат АТ против нескольких АГ одного рода (для определения рода)
2) моновалентные, монорецепторные – содержат АТ против конкретного АГ (для определения вида)
II. По направленности действия (по типу реакции)
агглютинирующие – содержат АТ–агглютинины, которые с АГ способны образовывать комплекс в виде осадка - агглютината
преципитирующие – содержат АТ-преципитины, которые с АГ образуют комплекс в виде кольца или «усов преципитации»
люминесцирующие (меченные флюорохромом - ФИТЦ) – содержат АТ, к Fc-фрагменту которых присоединяют флюорохромы, поэтому с АГ образуют светящиеся комплексы
меченные пероксидазой – содержат АТ, к Fc-фрагменту которых присоединяют фермент. При наличии пероксидазы химическое соединение ортофенилдиамин (субстрат), изменяет цвет.
гемолитические – содержат АТ-гемолизины, которые способны лизировать эритроциты
антивирусные, антириккетсиозные
антитоксические (МЕ<3000)
Подпись преподавателя_________________________________________________________
Дата____________
ЗАНЯТИЕ № 11
ИММУНИТЕТ. ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ И ИХ ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
Цель: изучить механизмы взаимодействия АГ-АТ, принципы и методы постановки: РА, РПГА, РП.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
РА. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
Реакция Кумбса. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
Реакция коагглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
РПГА. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
РП. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
РН (флоккуляции). Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
использовать реакции иммунитета в диагностике инфекционных болезней.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
о существовании различных модификаций серологических реакций, усиливающих их чувствительность (информативность).
Теоретические аспекты:
Серология - раздел иммунологии, изучающий взаимодействие Аг и Ат в реакциях in vitro.
Серологические методы - совокупность реакций in vitro, основанных на Аг-Ат взаимодействии и направленных на выявление в сыворотке крови и других жидкостях организма Ат, а также Аг в исследуемом материале.
Сероиндикация - обнаружение возбудителя в исследуемом материале (определение рода возбудителя) с поливалентными сыворотками.
Сероидентификация - определение вида возбудителя или отдельных антигенов с монорецепторными сыворотками.
Серодиагностика - обнаружение антител или определение титра антител в сыворотке крови
Схема описания реакции:
направление (цель)
ингредиенты (компоненты)
механизм (схема)
способ постановки реакции
результат
Работа № 1. Реакция агглютинации
Цель:
Определить родовую принадлежность выделенной чистой культуры в ориентировочной РА на стекле с поливалентными сыворотками: сальмонеллезной ABCDE, шигеллезной, иерсиниозной (сероиндикация). Поставить, учесть, оценить результат РА (см. теоретическую справку)
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель:
Определить вид исследуемой культуры в развернутой РА на стекле с
моновалентными сыворотками (сероидентификация). Поставить, учесть, оценить результат РА
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм (схема см. выше)
Постановка:
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель:
Учесть результат РА с дизентерийным диагностикумом с целью выявления антител в парных сыворотках пациента (серодиагностика). Парные сыворотки - это сыворотки от одного и того же больного, взятые в начале болезни и через одну две недели с целью выявления нарастания титра антител. Сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм (см. выше)
Постановка:
1/100
1/200 1/400 1/800 1/1600
КС КД
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Выполните задания для самоконтроля:
Агглютинация-это__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ингредиенты для постановки РА:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции _____________________________________________________________
Работа № 2. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА или РПГА)
Цель:
Учесть результат РПГА с эритроцитарным сальмонеллезным диагностикумом для определения специфических АТ в парных сыворотках больного
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Выполните задания для самоконтроля:
Ингредиенты для постановки РПГА:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции_____________________________________________________________
Работа № 3. Реакция преципитации
Цель:
Поставить РП для выявления сибиреязвенного Аг в экстракте из шерсти животного. Оценить результат, сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
«К» «О»
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Разобрать принцип постановки РП в геле. Сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
Механизм (см. выше)
Постановка:
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Выполните задания для самоконтроля:
Реакцию преципитации ставят в том случае, если____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ингредиенты для постановки РП:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции____________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 1