Раздел 4. Физиология системы крови

Техника взятия и методы изучения физико-химических свойств крови

План занятия

Контроль теоретической подготовки

Пояснения к выполняемым работам

Демонстрационные опыты:

а) Способы и техника взятия крови у разных видов животных

б) Получение сыворотки, плазмы, дефибринированной крови и фибрина

в) Определение плотности крови

г) Гемолиз. Определение осмотической устойчивости (резистентности) эритроцитов

Проверка выполненных работ

Вопросы для подготовки к занятию

1. Кровь - внутренняя среда организма, функции крови.

2. Количество крови у животных. Функции крови в организме. Способы взятия крови у разных видов животных

3. Химический состав крови и плазмы

4.Физические свойства крови - рН, удельный вес, вязкость, поверхностное натяжение и др.

5. Основные форменные элементы. Эритроциты.

6.Гемолиз. Причины и виды гемолиза.

7.Осмотическая устойчивость эритроцитов.

Литература для подготовки к занятию

1. Лысов, В.Ф. Физиология и этология животных / В.Ф. Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. - М.: КолосС, 2012, - 605 с.

2. Лысов, В.Ф. Практикум по физиологии и этологии животных. /В. Ф.Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. КолосС, 2010. - 303 с.

3. Лекционный курс.

Работа 1. Способы и техника взятия крови у разных ви­дов животных. Демонстрационный опыт

1. Ознакомьтесь с содержанием опыта и с инструмента­рием для взятия крови у животных.

2. Примите участие в обработке операционного поля и взятии крови у кролика, собаки.

3. Запишите, каким способом и из каких сосудов берутся большие и малые пробы крови у разных видов животных.

Работа 2. Получение сыворотки, плазмы, дефибринированной крови и фибрина. Демонстрационный опыт

1. Ознакомьтесь с содержанием опыта.

2. Понаблюдайте за получением плазмы, сывороткиа, дефибринированной крови, фибрина.

3. Запишите:

- чем отличается плазма от сыворотки?

- какие вещества используются в качестве антикоагу­лянтов, каков механизм их действия, какие вещества применялись в данном опыте?

Работа 3. Гемолиз. (Практикум, оп., с. ).

Для выполнения дома. Дайте определение гемолиза, пере­числите его виды и механизмы

1. Выполните опыт, результаты внесите в таблицу. В выводах укажите наблюдаемые в пробирках виды гемолиза.

Номера пробирок Реактивы	1	2	3	4	5
1. Физраствор , мл	5			1
2. Дистиллированная вода.		5
3. Глюкоза 5%, мл			5
4. Нашатырный спирт, мл				4
5. NaCl 3%, мл					5
6. Кровь, капель	5	5	5	5	5
Результат (наличие или отсутствие гемолиза (+/-)

Выводы:

Работа 4. Определите резистентность эритроцитов крови, заполнив пробирки согласно схеме. Запишите ре­зультаты и сделайте выводы.

Содержимое пробирок	Номера пробирок
	1	2	3	4	5	6
1. NаС1, 1%, мл	9	7	5	4	3	2
2. Дистиллированная вода, мл	1	3	5	6	7	8
Всего, мл	10	10	10	10	10	10
Итоговая концентрация NаС1, %	0,9	0,7	0,5	0,4	0,3	0,2
Результат (наличие или отсутствие гемолиза (+/-)

Выводы: проанализируйте полученные результаты. Сопоставьте их с физиологической нормой.

Дата выполнения:________

Подпись преподавателя_______________

Изучение химических свойств крови

План занятия

Контроль теоретической подготовки

Пояснения к выполняемым работам

Самостоятельная работа студентов:

а) Определение буферных свойств и рН крови

б) Определение количества гемоглобина в крови

Проверка выполненных работ

Вопросы для подготовки к занятию

1. Реакция крови у с.-х. животных; рН крови - жесткая константа гомеостаза.

2. Буферные системы крови.

3. Щелочной резерв крови, его значение.

4. Гемоглобин, его строение и функции. Количество гемоглобина в крови с.- х. животных

6. Соединения гемоглобина и способы их определения

7. Кристаллизация гемоглобина. Использование видовой специфики кристаллизации гемоглобина в идентификации крови

Литература для подготовки к занятию

1. Лысов, В.Ф. Физиология и этология животных / В.Ф. Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. - М.: КолосС, 2012, - 605 с.

2. Лысов, В.Ф. Практикум по физиологии и этологии животных. /В. Ф.Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. КолосС, 2010. - 303 с.

3. Лекционный курс.

Работа 1. Определение буферных свойств и рН крови (Практикум, оп., с.).

1. Ознакомьтесь с оборудованием и реактивами для выполнения опыта 44

2. Определите кислотный буфер сыворотки крови и сравни­те его с кислотным буфером воды.

Пробирки Реагенты	1 контроль	2 опыт
1. Вода дистиллированная, мл	10	10
2. Сыворотка крови, мл	-	1
3. Фенолфталеин, кап.	1-2	1-2
4. Титровать 0,1н р-ром NaOH, кап.	1-2 до слабо-розового окрашивания	1-2 до слабо-розового окрашивания

Расчет: Кб = (n-m)/ m х 10, где

n - число капель 0,1н р-ра NaOH, пошедшее на титрование рабочей пробы;

m - число капель 0,1н р-ра NaOH, пошедшее на титрование контрольной пробы (10 мл дистиллированной воды);

10 - приведение V сыворотки к V дистиллированной воды в контрольной пробе.

Сравните кислотный буфер сыворотки крови и воды:

Кб/ m = раз (в сыворотке крови он в 40-70 раз больше, чем в воде).

3. Определите щелочной буфер сыворотки крови и сравните его с щелочным буфером воды.

Пробирки Реагенты	1 контроль	2 опыт
1. Вода дистиллированная, мл	10	10
2. Сыворотка крови, мл	-	1
3. Метилоранж, кап.	1-2	1-2
4. Титровать 0,1н р-ром HCl, кап.	1-2 до красно-золотистого окрашивания	1-2 до красно-золотистого окрашивания

Расчет: Щб = (n-m)/ m х 10, где

n - число капель 0,1н р-ра HCl, пошедшее на титрование рабочей пробы;

m - число капель 0,1н р-ра HCl, пошедшее на титрование контрольной пробы (10 мл дистиллированной воды);

10 - приведение V сыворотки к V дистиллированной воды в контрольной пробе.

Сравните щелочной буфер сыворотки крови и воды:

Щб/ m = раз (в сыворотке крови он в 280-350 раз больше, чем в воде).

4. Сравните величины щелочного и кислотного буферов сыворотки крови. Укажите, какой из них преобладает и почему?

Щб/Кб = раз.

Работа 2. Определение количества гемоглобина в крови (Практикум, оп., с,).

1. Ознакомьтесь с устройством гемометра Сали, зарисуй­те его схему с обозначением деталей

2. Определите количество гемоглобина по Сали согласно описанию.

Результаты определения:

Вид животного	Hb, г/100 мл крови	Hb, Ед. Сали

Заполните таблицу, используя справочный материал.

Вид животного	КРС	Лошадь	Свинья	Овца	Курица
Hb, г/100 мл

Дата выполнения:________

Подпись преподавателя_______________

Методы изучения морфологического состава крови

План занятия

Контроль теоретической подготовки	15 мин
Пояснения к выполняемым работам	20 мин
Самостоятельная работа студентов:
а) подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов	45 мин
Проверка выполненных работ	10 мин

Вопросы для подготовки к занятиям

1. Форменные элементы крови и их функции.

2. Количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, осо­бенности их структуры у разных видов с.-х. животных.

3. Виды лейкоцитов. Лейкоцитарная формула и ее роль в кли­нической диагностике.

4. Сущность методов определения форменных элементов крови.

Литература для подготовки к занятию

1. Лысов, В.Ф. Физиология и этология животных / В.Ф. Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. - М.: КолосС, 2012, - 605 с.

2. Лысов, В.Ф. Практикум по физиологии и этологии животных. /В. Ф.Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. КолосС, 2010. - 303 с.

3. Лекционный курс.

Работа 1. Методы подсчета форменных элементов крови (Практикум, оп., с.).

1. Ознакомьтесь с классическим (микроскопическим) мето­дом подсчета форменных элементов крови.

2. Запишите основные этапы подготовки крови для под­счета эритроцитов и лейкоцитов.

3. Подсчитайте количество эритроцитов и лейкоцитов в крови крупного рогатого скота, козы, птицы. Результаты за­несите в таблицу

	КРС		Коза		Птица
	норма	факт	норма	факт	норма	факт
Эритроциты, . млн/мм3
Лейкоциты, тыс /мм3

Выводы:

Дата выполнения:________

Подпись преподавателя_______________

Биологические свойства крови

План занятия

Контроль теоретической подготовки	15 мин
Пояснения к выполняемым работам	10 мин
Самостоятельная работа студентов:
а) определение групп крови человека	20 мин
б) определение резус фактора	20 мин
в) определение скорости свертывания крови	15 мин
Проверка выполненных работ	10 мин

Вопросы для подготовки к занятию

1. Понятие о группах крови.

2. Факторы, положенные в основу деления групп крови человека и животных на группы.

3. Резус-фактор. Понятие о резус-положительной и резус- отрицательной группах крови.

4. Процесс свертывания крови, его значение для животного организма.

Литература для подготовки к занятию

1. Лысов, В.Ф. Физиология и этология животных / В.Ф. Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. - М.: КолосС, 2012, - 605 с.

2. Лысов, В.Ф. Практикум по физиологии и этологии животных. /В. Ф.Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. КолосС, 2010. - 303 с.

3. Лекционный курс.

Работа 1. Определение групп крови (Практикум, оп. , с. )

1. Ознакомьтесь с опытом. Зарисуйте схему переливания (совместимости) и определения групп крови.

2. Выполните опыт под руководством преподавателя.

3. Запишите результаты в тетрадь. Укажите, какие группы крови совместимы с исследованной Вами.

Работа 2. Определение резус-фактора.

1. Ознакомьтесь с методами определения резус-фактора. Запишите основные принципы метода.

2. Определите резус-фактор у животного (человека) под руководством преподавателя.

3. Запишите результат. Сделайте заключение.

Работа 3. Определение скорости свертывания крови (Практикум, оп. , с. ).

1. Ознакомьтесь с методом определения свертываемости крови. Обозначьте схематично механизм свертывания крови.

2. Определите скорость свертывания крови у птиц и млекопитающих.

3. Сравните скорость свертывания крови у разных видов животных. Результаты запишите:

Животные	Время свертывания крови, мин

Вывод:

Дата выполнения:________

Подпись преподавателя_______________