
- •Принципы организации и оборудования микробиологической лаборатории, правила работы в ней
- •5Окраска по Граму. Методика:
- •Светлопольная микроскопия
- •Темнопольная микроскопия
- •Темнопольная микроскопия
- •Фазовоконтрастная микроскопия
- •Люминесцентная микроскопия
- •Электронная микроскопия
- •Структурные элементы бактериальной клетки:
- •Цитоплазматическая мембрана
- •Периплазматическое пространство
- •Цитоплазма
- •Мезосомы
- •Нуклеоид
- •Клеточная стенка
- •Химический состав клеточных стенок грамположительных и грамотрицательных прокариот
- •Клеточная стенка
№1 Медицинская микробиология, ее задачи, методы, разделы.
Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами.
ЗАДАЧИ медицинской микробиологии:
установление этиологической (причинной) роли микроорганизмов в норме и патологии.
разработка методов диагностики, специфической профилактики и лечения инфекционных заболеваний, индикации (выявления) и индефикации (определения) возбудителей.
бактериологический и вирусологический контроль окружающей среды, продуктов питания, соблюдения режима стерилизации и надзор за источниками инфекции в лечебных и детских учреждениях.
контроль за чувствительностью микроорганизмов к антибиотикам и другим лечебным препаратам, состоянием микробиоценозов (микрофлорой) поверхностей и полостей тела человека. (1.изучение микроорганизмов; 2.патогенез действия микроорганизмов; 3.происхождение микроорганизмов)
Основные МЕТОДЫ микробиологии:
микроскопический (фазово-контрастная, темнопольная, люминисцентная, электронная, окраска по Романовскому-Гимзе) — с использованием приборов для микроскопии. Определяет форму, размеры, взаиморасположение микроорганизмов, их структуру, способность окрашиваться определенными красителями.
микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) — выделение чистой культуры и ее идентификация.
серологический (сыворотка)
аллергологический
биологический — заражение лабораторных животных с воспроизведением инфекционного процесса на чувствительных моделях (биопроба).
хемотоксонамический
молекулярно-биологический ( ПЦР, ЛЦР, саузернблоттинг и нозенблоттинг, ДНК-ДНК-гибридизация, риботипирование, рестрикционный анализ).
№2 Основные этапы развития микробиологии. Работы Л.Пастера и Р.Коха и их значение для развития микробиологии.
Историю развития микробиологии можно разделить на 4 этапов морфологический, физиологический, иммунологический и молекулярно-генетический.
Открытие мира микроорганизмов связано с именем Антония Левенгука (1632-1723). А. Левенгук создал свой микроскоп, дающий увеличение до 300 раз, что позволило ему обнаружить, описать и зарисовать основные формы бактерий и клеток. Этот период назван – морфологическим, так как исследования в области микробиологии сводились к описанию форм бактерий.
Пастер сделал ряд выдающихся открытий. За короткий период с 1857 по 1885 г. он
Второй период развития микробиологии физиологический связан с именами ученых Луи Пастера (1822-1895) и Роберта Коха (1843-1910). Л. Пастер -установил, что молочнокислое и маслянокислое брожение, процесс разложения белковых продуктов есть результат жизнедеятельности микроорганизмов. -Он доказал, что микроорганизмы являются возбудителями ряда заболеваний, -разработал методы профилактики инфекционных заболеваний путем вакцинации, которые успешно используются до настоящего времени. Л. Пастер разработал не только принципы вакцинации, но и способ приготовления вакцин.
Роберт Кох. Физиологический период в развитии микробиологии связан также с именем немецкого ученого Роберта Коха, которому принадлежит разработка методов получения чистых культур бактерий, окраски бактерий при микроскопии, микрофотографии
Он разработал и, в дальнейшем, сформулировал триаду Коха:
предполагаемый микроорганизм - возбудитель данного заболевания не может быть выделен при других инфекционных заболеваниях;
микроорганизм должен быть выделен в чистой культуре;
чистая культура возбудителя должна вызывать у экспериментальных животных специфическую болезнь.
Благодаря методам, предложенным Р. Кохом, были изучены обмен веществ, дыхание, ферментативная активность, рост и размножение, культивирование на искусственных питательных средах, экзотоксины бактерий.
Третий период микробиологии ознаменовался созданием нового направления в микробиологии - иммунологией. Русский ученый И.И. Мечников (1845-1916) и немецкий ученый П. Эрлих (1854-1915) считаются основоположниками иммунологии. И.И. Мечников разработал фагоцитарную теорию иммунитета и впервые ввел понятие «Клеточный иммунитет». И.И. Мечников рассматривал фагоцитоз, как основной фактор защиты организма человека от возбудителей инфекционных заболеваний.
Молекулярно-генетический этап развития микробиологии начинается с 40-50 годов ХХ века. Огромные успехи в области молекулярной биологии, генетики, биотехнологии, биохимии позволили расшифровать геном бактерий и вирусов, создать рекомбинантные штаммы микроорганизмов и использовать их для получения разнообразных биологически активных веществ (антибиотиков, гормонов, ферментов, витаминов)
№3 История кафедры микробиологии Сибирского медицинского Университета.
История кафедры
|
|
В 1919 году на базе бактериологического института была открыта первая в Сибири кафедра микробиологии, которую возглавил директор института профессор П.В. Бутягин. Приоритетным направлением в деятельности кафедры явилась подготовка врачей —бактериологов для нужд здравоохранения. Научные исследования этого периода касались вопросов общей микробиологии, эпидемиологии, изучения специфического лечения и профилактики инфекционных заболеваний.
П. В. Бутягин создал первую школу микробиологов в Сибири.
После отъезда П.В. Бутягина в Новосибирск в 1931г., где он стал заведовать кафедрой микробиологии в Новосибирском медицинском институте, руководство кафедрой принял профессор И.Е. Ломакин. В этот период сотрудники кафедры изучали вопросы лабораторной диагностики брюшного тифа, серотерапии бешенства, фаготерапии и фагопрофилактики инфекционных заболеваний.
В 1937 году заведующим кафедрой был назначенС.П. Карпов, который работал в этой должности в течение 40 лет. В эти годы на кафедре был создан музей живых культур, разработаны учебные пособия, организован студенческий научный кружок
С 1976 по 1986 г. кафедрой микробиологии заведовал академикН.В. Васильев.
В 1986 году — руководство кафедрой перешло к профессору Ю.В. Федорову.
В 1998 году заведующим кафедрой микробиологии избран профессор Е.П. Красноженов.
В это время развернуты серии научных работ по определению участия тучных клеток в процессах инфекции и иммунитета, состоянию колонизационной резистентности слизистых оболочек и кожи при различных патологических процессах.
№4 Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней.
лаборатории подразделяются на 3 категории:
1) базовые (общего типа); 2) режимные; 3) лаборатории особого режима.
Принципы организации и оборудования микробиологической лаборатории, правила работы в ней
Микробиологическая лаборатория в зависимости от ее профиля выполняет бактериологические, вирусологические и иммунологические исследования. В соответствии с назначением, лаборатория должна быть оснащена соответствующей аппаратурой и помещением. Лаборатория должна располагаться в отдельном здании или изолированной его части, оборудована водопроводом, канализацией, отоплением, горячим водоснабжением и иметь отдельный вход. Микробиологическая лаборатория общего назначения должна иметь следующие комнаты.
Лабораторные
Автоклавную
Средоварочную
Бактериологическую с боксами
Моечную
Виварий
Подсобные помещения (душ, склад, гардероб, туалет)
Лабораторная комната должна быть светлой, просторной, стены окрашены масляной краской или облицованы керамической плиткой. В лабораторной комнате необходима холодная и горячая вода, раковина, дезинфицирующий раствор для мытья и обработки рук, аптечка для оказания первой медицинской помощи. В комнате должен находится холодильник, термостат, центрифуги, микроскопы, лабораторная мебель, рабочие столы, емкость для сбора инфицированной посуды и материала.
Бактериологическая комната с боксами. Для работы в стерильных условиях в бактериологической комнате должны быть оборудованы боксы с предбоксниками, с системой приточно-вытяжной вентиляции и бактерицидными лампами. В боксе должен находится стол с необходимыми принадлежностями для проведения стерильных посевов (горелка, стерильные пипетки, пробирки, чашки Петри и пробирки с питательной средой, бактериологическая петля и др.). Поверхность рабочего стола должна быть водонепроницаема, устойчива к дезинфектантам, кислотам, щелочам, органическим растворителям и умеренному нагреванию. Стены, потолок и пол комнаты должны быть моющимися, непроницаемыми для жидкости, устойчивы к дезинфицирующим растворам. В настоящее время используют для проведения стерильных работ ламинированные боксы, где оборудована подача стерильного воздуха под давлением.
Автоклавная используется для стерилизации посуды, питательных сред, одежды, а также для обеззараживания лабораторных отходов. Автоклавная должна быть оснащена следующим оборудованием: автоклавы, печи Пастера, стерилизаторы различной емкости, шкафы для стерильной посуды. К работе на автоклавах допускаются лица прошедшие специальную подготовку.
Виварий предназначен для проведения исследований на животных. Необходимо иметь два помещения вивария – одно для содержания чистых животных и второе для лабораторных животных, с которыми проводятся исследования. Вход в виварий должен быть ограничен специально отобранным персоналом. Клетки, кормушки для животных должны быть изготовлены из материала устойчивого к дезинфицирующим растворам.
Моечная комната предназначена для мойки лабораторной посуды и должна быть оборудована холодным и горячим водоснабжением, раковиной, а также шкафами для хранения и складирования пипеток, колб, чашек Петри и другой посуды.
Средоварочная комната располагается рядом с моечной и стерилизационной комнатами и предназначена для приготовления и разлива питательных сред. Комната оборудуется газовой или электрической плитой, раковиной с подведенной холодной и горячей водой. В ней необходимо иметь дистиллятор, холодильник для хранения питательных сред и биологических компонентов, бокс для приготовления и разлива питательных сред и растворов в стерильных условиях, шкафы для хранения сухих питательных сред, лабораторной посуды и химических реактивов.
Правила работы и поведения
в бактериологической лаборатории общего назначения
В помещение лаборатории нельзя входить без специальной одежды – халата, шапочки, сменной обуви.
Запрещается в помещении прием и хранение пищи. Курение.
Нельзя использовать лабораторную спец. одежду за пределами лаборатории.
Зараженный материал подлежит уничтожению, инструменты и поверхность рабочего стола, дезинфицируют после окончания работ.
После работы с культурой, животными, перед уходом из лаборатории необходимо вымыть руки.
Штаммы микроорганизмов, заразный материал должны хранится в сейфе или холодильнике закрытыми и опечатанными.
Необходимо проводить обеззараживания предметов, одежды, стола, комнаты, в случае если разбился сосуд с инфицированным материалом или произошел неосторожный разлив заразного материала.
Сотрудники лаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех инфекционных заболеваний, с возбудителями которых возможна работа в лаборатории.
В лаборатории должна быть инструкция по технике безопасности, которую персонал должен знать и строго выполнять. Необходимо обязательно немедленно сообщить руководителю лаборатории обо всех аварийных ситуациях, создающих угрозу биологической безопасности и проводить все мероприятия для предотвращения последствий.
Каждая бактериологическая лаборатория должна иметь лицензию на право работы с возбудителями.
№5 Техника приготовления бактериального мазка и простые методы его окраски.