3. Бактериологическое исследование мочи

При заборе мочи на бактериологическое исследование нужно помнить, что если инфекция локализуется в почках, микроорганизмы содержатся во всех порциях мочи, а при инфекции мочевого пузыря моча остается стерильной. В отдельных случаях делают надлобковую пункцию мочевого пузыря, при которой получают наиболее достоверные результаты.

Исследованию подлежит средняя порция свободно выпущенной мочи, взятой в количестве 3-5 мл в стерильную посуду. Перед сбором необходимо наружные половые органы тщательно обмыть стерильной или кипяченой водой и обтереть салфеткой. Катетеризация мочевого пузыря для рутинного исследования не применяется, так как она может привести к инфицированию мочевых путей.

Содержащиеся в моче микробы быстро размножаются при комнатной температуре, что может дать ложные результаты при определении степени бактериурии. В связи с этим, от момента взятия пробы мочи, до начала ее исследования в лаборатории должно пройти не более 1-2 ч, допускается хранение мочи не более суток в холодильнике.

Осадок, полученный после центрифугирования мочи, высевают штрихом на необходимые питательные среды, подбор сред осуществляют в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на кровяной агар и сахарный бульон. Посевы ставят в термостат при 37°С. На следующий день при наличии подозрительных колоний выделяют чистую культуру и идентифицируют. Эшерихии, протей, синегнойная палочка и клебсиеллы чаще выделяются из мочи больных уроинфекцией. Дифтероиды, лактобациллы, грамположительные палочки обычно выделяются из мочи здоровых людей.

Выделение микроорганизмов из мочи не позволяет дифференцировать бактериурию, возникающую в результате загрязнения мочи нормальной микрофлорой дистального отдела уретры, от бактериурии, развивающейся при инфекционных процессах в мочевыводящей системе, возбудителями которых являются условно-патогенные микроорганизмы. С этой целью применяют количественный метод секторных посевов Gould, позволяющий определить число микробных клеток в 1 мл мочи, т.е. степень бактериурии (СБУ) или обсемененности.

Рис. 1 Метод секторных посевов (метод Gould)

Для посева используют платиновую петлю, диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл, производят посев мочи (30-40 штрихов) на сектор I чашки Петри с МПА и кровяным агаром. После этого петлю прожигают и производят 4 штриховых посева из сектора I в сектор II и аналогичным образом – из сектора II во III и из III в IV (рис. 1). Чашки инкубируют при 37°С 18-24 ч, после чего подсчитывают число выросших колоний в разных секторах на МПА и в соответствии с таблицей (см. ниже) рассчитывают обсемененность на 1 мл мочи. Метод секторных посевов позволяет не только определить степень бактериурии, но и выделить возбудителя заболевания в чистой культуре.

Таблица

Определение степени обсемененности по количеству выделенных колоний

I	Количество колоний в секторах			Количество бактерий в 1 мл мочи
	II	III	IV
1-6	-	-	-	менее 1000
8-20	-	-	-	3000
20-30	-	-	-	5000
30-60	-	-	-	10000
70-80	-	-	-	50000
100-150	5-10	-	-	100000
не сосчитать	20-30	-	-	500000
-//-	40-60	-	-	1 млн.
//-	100-140	10-20	-	5 млн.
-//-	не сосчитать	30-40	-	10 млн.
-//-	-//-	60-80	1-3	100 млн.

Если СБУ  10 КОЕ/мл – отсутствие воспалительного процесса (контаминации мочи);

если СБУ = 10 КОЕ/мл – сомнительный результат и исследование следует повторить;

если СБУ  10 КОЕ/мл – наличие воспалительного процесса.