
- •Лабораторна робота № 3 Визначення вмісту вітамінів у рослинному матеріалі
- •Теоретична частина
- •1. Якісні реакції на вітамін a
- •2. Якісні реакції на вітамін к
- •Хід роботи:
- •3. Якісні реакції на вітамін е
- •Хід роботи:
- •4. Реакція відновлення вітаміну в2 (рибофлавіну)
- •5. Якісні реакції на вітамін с
- •Хід роботи
- •6. Якісні реакції на вітамін в5 або рр
- •Хід роботи
- •7. Кількісне визначення вмісту вітаміну с за Тільмансом
- •Хід роботи.
- •8. Кількісне визначення вмісту вітаміну р у чаї за Левенталем
- •Хід роботи.
- •Контрольні питання
4. Реакція відновлення вітаміну в2 (рибофлавіну)
Принцип методу. Водень, який утворюється при додаванні металічного цинку до концентрованої соляної кислоти, відновлює жовтий рибофлавін спочатку до родофлавіну (проміжної сполуки) червоного кольору, а потім до безбарвного лейкофлавіну.
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, 0,025 %-ий розчин вітаміну В2 (завись рибофлавіну), концентрована соляна кислота, металічний цинк.
Хід роботи.
В пробірку внести 1 мл розчину вітаміну В2, 0,5 мл концентрованої соляної кислоти та опустити в неї шматок металічного цинку. Водень, який виділяється при цьому, реагує з рибофлавіном і відновлює його. При цьому вміст пробірки поступово забарвлюється в рожевий колір, а потім знебарвлюється. При збовтуванні знебарвленого розчину лейкофлавін знову окислюється киснем повітря в рибофлавін.
5. Якісні реакції на вітамін с
Принцип методу. Аскорбінова кислота здатна легко вступати в окисно-відновні реакції та відновлювати 2,6-дихлорфеноліндофенол, гексоціано-(III) феррат калію, нітрат срібла, метиленовий синій. При цьому окислена форма 2,6-дихлорфеноліндофенолу (синій колір) і метиленовий синій відновлюються в безбарвні лейкосполуки, а K3Fe(CN)6 відновлюється до K4Fe(CN)6, який із йонами валентного заліза дає сіль Fe4[Fe(CN)6]3 синього або зеленого забарвлення.
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, крапельниці, піпетки градуйовані, термостат, 0,4 %-ий розчин аскорбінової кислоти, 0,1 %-ий розчин 2,6-дихлорфеноліндофенолу, 10 %-ий розчин соляної кислоти, 0,01 %-ий розчин метиленового синього, 10 %-ий розчин карбонату натрію, 1 %-ий розчин гексоціано-(III) феррат калію (K3Fe(CN)6), 1 %-ий розчин хлориду заліза (ІІІ), дистильована вода.
Хід роботи
А. Реакція з 2,6-дихлорфеноліндофенолом.
У пробірку внести 0,5 мл розчину 2,6-дихлорфеноліндофенолу, 1-2 краплі розчину соляної кислоти та краплями розчин аскорбінової кислоти. При цьому розчин 2,6-дихлорфеноліндофенолу знебарвлюється.
Б. Реакція з метиленовим синім.
У дві пробірки внести по одній краплі розчину метиленового синього та по одній краплі розчину карбонату натрію. В першу пробірку прилити 5 крапель розчину аскорбінової кислоти, в другу – 5 крапель води та обидві пробірки поставити в термостат при температурі 37-40º С. Через деякий час
рідина в пробірці з розчином аскорбінової кислоти знебарвиться.
В. Реакція з гексоціано-(III) ферратом калію.
До 1 мл розчину аскорбінової кислоти додати 1 мл розчину K3Fe(CN)6 і 0,5 мл розчину хлориду заліза (ІІІ). При цьому спостерігається утворення синьо-зеленого забарвлення.
6. Якісні реакції на вітамін в5 або рр
Принцип методу. Вітамін В5 при нагріванні з розчином ацетату міді утворює погано розчинний синій осад мідної солі. Цей вітамін також відновлює гідросульфіт натрію з утворенням сполуки жовтого кольору. При нагріванні його з 2,4-динітрохлорбензолом у присутності лугу утворюється забарвлена сполука.
Обладнання та реактиви: Ваги технохімічні, штатив із пробірками, крапельниці, піпетки градуйовані, скляні палички, водяна баня, фарфорова чашка, годинник, порошок вітаміну В5, 0,1 %-ий спиртовий розчин нікотинової кислоти або нікотинаміду, 10 %-ий розчин оцтової кислоти, 5 %-ий розчин ацетату міді, 10 %-ий розчин карбонату натрію, 5 %-ий розчин гідросульфіту натрію (NaHSO3), 1 %-ий спиртовий розчин 2,4-динітрохлорбензолу, 4 %-ий спиртовий розчин гідроксиду натрію.