- •Лабораторна робота № 3 Визначення вмісту вітамінів у рослинному матеріалі
- •Теоретична частина
- •1. Якісні реакції на вітамін a
- •2. Якісні реакції на вітамін к
- •Хід роботи:
- •3. Якісні реакції на вітамін е
- •Хід роботи:
- •4. Реакція відновлення вітаміну в2 (рибофлавіну)
- •5. Якісні реакції на вітамін с
- •Хід роботи
- •6. Якісні реакції на вітамін в5 або рр
- •Хід роботи
- •7. Кількісне визначення вмісту вітаміну с за Тільмансом
- •Хід роботи.
- •8. Кількісне визначення вмісту вітаміну р у чаї за Левенталем
- •Хід роботи.
- •Контрольні питання
1. Якісні реакції на вітамін a
Принцип методу. Хлороформний розчин вітаміну А утворює з хлоридом сурми (ІІІ) продукт реакції, що забарвлений у синій колір. Із концентрованою сірчаною кислотою цей розчин дає продукт реакції червоно-бурого кольору.
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, крапельниці, скляні палички, олійний розчин вітаміну А, хлороформ, 33 %-ий хлороформний розчин хлориду сурми (ІІІ) (SbCl3), концентрована сірчана кислота.
Хід роботи:
А. Реакція з трихлористою сурмою.
В суху пробірку внести 3 краплі олійного розчину вітаміну А та додати сюди 3 краплі хлороформного розчину хлориду сурми (ІІІ). Вміст пробірки перемішати. При цьому спостерігається поява синього кольору, що поступово переходить у рожево-фіолетовий.
Б. Реакція з сірчаною кислотою (реакція Друммонда).
В суху пробірку внести 3 краплі олійного розчину вітаміну А та додати 1-2 мл хлороформу. Вміст пробірки перемішати та додати 5-6 крапель сірчаної кислоти. Вміст пробірки при цьому забарвлюється в червоно-бурий колір.
2. Якісні реакції на вітамін к
Принцип методу. Спиртовий розчин вітаміну К у лужному середовищі з діетилмалоновим ефіром дає червоно-фіолетове забарвлення, а в присутності діетилдитіокарбомату в цих умовах утворює сполуку, забарвлену в блакитний колір. При наявності аніліну спиртовий розчин вітаміну К забарвлюється в червоний колір внаслідок утворення 1-метил-2-феніламінонафтохінону.
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, крапельниця, скляні палички, спиртовий розчин вітаміну К, 0,05 %-ий спиртовий розчин вікасолу, 1 %-ий розчин діетилмалонового ефіру, 1 %-ий розчин гідроксиду калію, 5 %-ий розчин діетилдитіокарбомату, 4 %-ий спиртовий розчин гідроксиду натрію, розчин аніліну.
Хід роботи:
А. Реакція з діетилмалоновим ефіром.
У пробірку з 2 мл спиртового розчину вітаміну К додати 0,5 мл розчину діетилмалонового ефіру та 0,1 мл розчину гідроксиду калію. При цьому спостерігається поява червоно-фіолетового забарвлення.
Б. Реакція з діетилдитіокарбоматом.
У пробірку з 2 мл спиртового розчину вітаміну К додати 2 мл розчину діетилдитіокарбомату та 0,5 мл розчину гідроксиду натрію в етанолі. При цьому розчин набуває блакитного забарвлення.
В. Реакція з аніліном.
У пробірку з 1 мл спиртового розчину вікасолу додати 2 краплі аніліну. Після перемішування вміст пробірки забарвлюється в червоний колір.
3. Якісні реакції на вітамін е
Принцип методу. Взаємодія α-токоферолу з концентрованою азотною кислотою зумовлює забарвлювання реакційної суміші в червоний колір. Це обумовлено тим, що продукт окислення α-токоферолу має хіноїдну структуру. При взаємодії з хлоридом заліза (ІІІ) α-токоферол окислюється до α-токоферилхінону – сполуки, забарвленої в червоний колір.
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, крапельниця, піпетки градуйовані, скляна паличка, 0,1 %-ий спиртовий розчин α-токоферолу, концентрована азотна кислота, 1 %-ий розчин хлориду заліза (ІІІ).
Хід роботи:
А. Реакція з азотною кислотою.
В суху пробірку внести 5 крапель спиртового розчину α-токоферолу й додати 1 мл концентрованої азотної кислоти. Пробірку інтенсивно струсити. При цьому спостерігається поява червоного забарвлення.
Б. Реакція з хлоридом заліза (ІІІ).
У суху пробірку внести 0,5 мл спиртового розчину α-токоферолу та 0,5 мл хлориду заліза (ІІІ). Вміст пробірки добре перемішати скляною паличкою. При цьому спостерігається поява червоного забарвлення.
