25. Хламидии. Таксономия патогенных риккетсий. Особенности морфологии и развития. Способы выявления.

Таксономия хламидий

Царство: Procaryota

Отдел: Gracilicutes

Порядок: Chlamydiales

Семейство: Chlamydiaceae

Род: Chlamydia, Chlamydophila

Отличие хламидий от истинных прокариот

• Мелкие размеры элементарных телец (внеклеточных форм) – 0,3-0,6-1,5 мкм.

• Облигатный внутриклеточный паразитизм. Хламидии не имеют систем мобилизации энергии, используют АТФ клетки хозяина.

• Непрокариотный цикл размножения.

Стадия	Функция
Элементарное тельце	Инфекционная (проникновения в клетку-хозяина путем обратного пиноцитоза)
Ретикулярное (инициальное) тельце	Репродуктивная (размножение бинарным делением → формирование цитоплазматического включения – микроколонии)
Промежуточное тельце	Переходная форма от ретикулярного тельца вновь к элементарному тельцу

Методы обнаружения хламидий

• Окраска по Романовскому-Гимзе. Используется для определения хламидий на начальных и конечных этапах цикла. Они выглядят пурпурными на фоне голубой цитоплазмы клетки.

• Обработка мечеными флюорохромами сыворотками – метод РИФ.

• Обнаружение внутриклеточных включений в виде приядерных шапочек цитологическими методами: Туревича, Муромцева и др.

• Окраска по Граму - грамотрицательны (на практике не используется).

26, 27. L-трансформанты. Характеристика. L-формы бактерий. Морфология, биологические свойства.

Под действием различных факторов - L-трансформантов (факторы, индуцирующие L-трансформацию) клеточная стенка может разрушаться. При полном ее разрушении образуются протопласты, сферопласты или L-формы. В отличие от протопластов, L-формы способны размножаться. Они бывают стабильные, то есть, не способны восстанавливать клеточную стенку, и нестабильные - восстанавливающие в исходную форму. Если клеточная стенка растворяется частично, то образуется сферопласт, если полностью - протопласт.

Исключительное значение L-трансформации патогенных бактерий заключается в том, что она является частой причиной перехода острых форм заболеваний в хронические формы и их обострений.

Факторы, индуцирующие L-трансформацию:

-антибиотики, угнетающие синтез клеточной стенки (пенициллин, цефалоспорин);

-ферменты (лизоцим, амидаза);

-антитела;

-рентгеновские ультрафиолетовые лучи;

-высокие концентрации аминокислот (глицин, фенилаланин).

Различают несколько морфологических вариантов L-форм бактерий:

1) крупные сферические тела (1-50мкм);

2) элементарные тельца, или гранулы (0, 6-0, 7 мкм);

3) бесструктурные массы, не имеющие постоянную форму и размера;

4) нитевидные структуры, варьирующие в размерах (до 150 мкм);

5) фильтрующиеся формы.

L-формы размножаются бинарным делением, утрачивают мезосомы, содержание аминокислот снижено, количество липидов увеличено. L-формы полностью или частично лишены клеточной стенки. Вследствие этого, слабо или вовсе не агглютинируются специфическими сыворотками, не лизируются специфическими бактериофагами.

Способы идентификации.

1. Непрямой способ - основан на способности L-форм к восстановлению (реверсии) родительских признаков. Реверсия происходит при исключении из среды фактора индукции или под воздействием мутагенов – УФ - лучей, акридина оранжевого. Морфология культур - ревертантов восстанавливается постепенно после многократных пересевов на обычных питательных средах.

2. Прямой способ – основан на идентификации вида L-форм путем определения специфических антигенов серологическими реакциями, дифференциации белков электрофорезом в агаровом геле и установлении гомологии ДНК у L-вариантов и их бактериальных форм.